SSTR2A、SSTR5与EGFR蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

论文摘要

一、研究背景肺癌是世界上最常见的五大恶性肿瘤之一，且发病率和死亡率近年来迅速上升，跃居肿瘤第一位。虽然治疗技术上有了很大的提高，但5年生存率没有明显改善。目前非小细胞肺癌的治疗除手术、化疗、放疗及免疫治疗外，针对于不同靶点的分子靶向治疗正逐渐应用于临床。生长抑素受体（Somatostatin receptor，SSTR）作为基因的肿瘤标记物之一，正逐步受到研究者的重视。随着生长抑素受体5种亚型先后被克隆，人们对生长抑素受体家族各成员的氨基酸序列、分子生物学特性、在正常组织和肿瘤组织中的分布和表达及其特异性配体等方面的研究也进一步深化。既往通过对肿瘤标本组织切片，以放射自显影法及肿瘤匀浆的配体结合分析法观察，证实在多种神经内分泌肿瘤中存在着SSTR的高密度表达。90年代以来，采用先进的分子生物学技术，检测SSTR各亚型的mRNA（包括原位杂交法、RT-PCR法及Norhern印记法等），发现SSTR在各类内分泌肿瘤中的表达阳性率在70％以上。近年来通过放射免疫显像发现除神经内分泌肿瘤外，一些非神经内分泌肿瘤中（如乳腺癌、非小细胞肺癌和结肠癌等）中均含有足以进行闪烁显像的高密度SSTR。为肿瘤的定位诊断、鉴别诊断及肿瘤受体的靶向药物治疗提供了有效依据。关于SST抗肿瘤增殖的机理，认为系由存在于瘤细胞中的SSTR直接介导抑制生长因子受体激酶的有丝分裂信号，从而导致肿瘤生长停滞或肿瘤细胞凋亡，或通过肿瘤周血管壁内高密度表达的SSTR抑制血管形成和促进血管强烈收缩，以及调节免疫细胞等环节发挥抑癌效应。SST有可能作为一种重要的细胞增殖和分化的激素调节肽，其抑制肿瘤细胞增殖的效应，将使SST及其多种类似物（SSA），具有发展成为抗肿瘤药物的乐观前景。EGFR在多种恶性肿瘤包括非小细胞肺癌中高表达，与肿瘤细胞的增殖、肿瘤血管生成、黏附、侵袭、转移和肿瘤细胞的凋亡等密切相关。由于EGFR酪氨酸激酶是信号传导的必要条件，因而成为肿瘤治疗的重要靶分子。本研究通过免疫组织化学的方法检测SSTR亚型SSTR2A、SSTR5与表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor；EGFR）在非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer；NSCLC）组织和癌旁正常肺组织中的表达，探讨与临床病理因素之间的关系，及两者之间的相关性和预后生存期的随访。为非小细胞肺癌的靶向治疗提供新的治疗思路。二、研究对象和方法1、研究对象：收集济南军区总医院胸外科及齐鲁医院1999年8月至2005年2月行根治性手术切除并经病理证实的非小细胞肺癌石蜡标本69例，研究组（62例）：非小细胞肺癌组织；对照组（7例）：癌旁肺组织7例（距肿块10cm以上）。2、实验方法：所有标本均经10％福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片，采用兔抗人SSTR2A多克隆抗体、SSTR5多克隆抗体和EGFR单克隆抗体免疫组织化学标记、以DAB显色系统显色，来显示石蜡切片中SSTR2A、SSTR5和EGFR蛋白的表达。运用统计学方法分析各组数据，结合临床病理资料（肿瘤的大小、患者年龄、性别、肿瘤组织类型、TNM分期、淋巴结转移等），探讨三种蛋白在62例NSCLC组织和7例癌旁正常肺组织中的表达情况及与肺癌临床病理特征的关系，并进行预后随访。三、结果切片组织中SSTR2A表达呈细胞膜棕黄色的颗粒状分布，SSTR5表达定位于细胞浆和细胞膜上，EGFR染色主要分布于细胞膜和细胞浆，呈弥漫性或颗粒性着色；1、7例癌旁肺组织中未发现EGFR蛋白的表达；SSTR2A和SSTR5的在癌旁肺组织中的阳性表达率分别为1／7和2／7。2、62例非小细胞肺癌组织中，SSTR2A蛋白阳性表达30例，占48.3％；SSTR5阳性表达44例，占70.9％。EGFR有35例阳性，占56.4％；3、SSTR2A、SSTR5蛋白表达与NSCLC的TNM分期有密切关系（P＜0.05）。但与NSCLC患者的年龄、性别、吸烟与否、病理类型、肿瘤大小和淋巴结转移均无明显相关（P＞0.05）。同组中，EGFR蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、吸烟与否、肿瘤组织类型、肿瘤大小、TNM分期、病理分级及淋巴结转移均无显著差异（P＞0.05）。SSTR2A、SSTR5蛋白表达与EGFR蛋白的表达呈负相关关系。4、SSTR2A表达阳性组的3年生存率为64.52％，高于阴性组45.16％，Log-rank检验：4.56。两者差异有统计学意义（P＜0.05）。SSTR2A阴性组的中位生存期为32个月，低于阳性组的中位生存期36个月（P=0.326，P＞0.05）。SSTR5表达阳性组的3年生存率为65.91％，高于阴性组22.22％，Log-rank检验：4.01（P＜0.05）。两者差异有统计学意义。SSTR5表达阴性组的中位生存期为32个月，低于阳性组的中位生存期40个月（P=0.453，P＞0.05）。EGFR表达阴性组3年生存率为69.44％高于阳性者30.77％，Log-rank检验：12.41。两者差异有统计学意义（P＜0.05）。EGFR表达阳性组的中位生存期为24个月，低于阴性组的中位生存期50个月（P=0.004，P＜0.05）。四、结论SSTR2A、SSTR5蛋白表达与EGFR蛋白的表达呈负相关关系。联合检测SSTR2A、SSTR5和EGFR表达影响非小细胞肺癌的生物学行为，对非小细胞肺癌淋巴结转移、病理分期及预后的评估有一定临床意义。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 生长抑素和生长抑素受体与肿瘤的研究进展
• 致谢
• 附录
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表