白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠保护作用的研究

论文摘要

血管性痴呆（vascular dementia, VD）是继阿尔茨海默病之后第二位最常见的痴呆症,在我国老年人中尤为常见和多发。随着社会的老龄化程度加剧,近年来国内外越来越重视对血管性痴呆的研究。滨海白首乌为萝藦科植物耳叶牛皮消（Cynanchum auriculatum Royle ex Wight）的块根。据报道白首乌有很多显著的药理作用,如抗肿瘤、增强免疫功能、抗氧化、延缓衰老等。但滨海白首乌对血管性痴呆的防治作用国内外鲜有报道。本文通过建立血管性痴呆的小鼠模型,从整体动物实验考察了白首乌提取物对血管性痴呆的防治作用。白首乌加热醇提物用大孔树脂分离,收集乙醇洗脱部分,其主要成分为白首乌C21甾苷,经紫外分光光度法测定,其可测含量在65%左右。用白首乌提取物（extract of Cynanchum auriculatum, EOCA）给小鼠连续灌胃24天。在灌胃第15天用反复脑缺血再灌注加尾静脉放血降压的方法建立VD小鼠模型。经Morris水迷宫实验证实,VD模型小鼠的学习记忆能力较假手术组显著降低。白首乌提取物组小鼠较模型组小鼠的学习记忆能力得到显著改善。进一步的研究表明,白首提取物主要从以下几个方面发挥对VD模型小鼠的保护作用:①减轻由造模引起的脑水肿程度。②降低脑内单胺氧化酶（monoamine oxidase, MAO）含量。③维持脑内乙酰胆碱酯酶（acetylcholine esterase,AchE）的活力。④降低脑内兴奋性递质谷氨酸的含量。⑤维持神经细胞正常数量和结构形态。⑥抑制脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体（N–methyl-D-aspartic acid receptor, NMDAR ）的过度表达,从而降低兴奋毒性作用导致神经元损伤。⑦提高小鼠的抗缺氧能力。⑧增强小鼠的抗氧化、清除自由基能力:增强小鼠脑内SOD活力,提高抗超氧阴离子能力和抑制羟自由基能力,降低脑内MDA含量和过氧化氢的含量。同时白首乌提取物还能提高小鼠远隔器官肝、肾的抗氧化酶系活性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 研究背景
• 1.1.1 血管性痴呆简介
• 1.1.2 血管性痴呆动物模型简介
• 1.2 白首乌介绍
• 1.2.1 白首乌简介
• 1.2.2 白首乌的成分
• 1.2.3 白首乌的药理作用
• 1.2.4 白首乌主要活性成分的毒理研究
• 1.3 本课题研究的意义和主要内容
• 第二章 白首乌有效成分的提取和血管性痴呆小鼠模型的建立
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 原料,药材及实验动物
• 2.2.2 实验试剂
• 2.2.3 主要实验仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 实验用药的提取分离
• 2.3.2 白首乌提取物中主要成分的含量测定
• 2.3.3 白首乌提取物化学成分的初步定性实验
• 2.3.4 血管性痴呆模型的制备
• 2.3.5 造模后小鼠一般状态的观察
• 2.3.6 造模后小鼠学习记忆能力的测定
• 2.3.7 统计学处理
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 白首乌提取物TLC 定性分析
• 2.4.2 白首乌提取物中主要成份含量的测定结果
• 2.4.3 白首乌提取物化学成分初步分析
• 2.4.4 小鼠一般状态的改变
• 2.4.5 Morris 水迷宫测定结果
• 2.5 本章小结
• 第三章 白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠的药效药理研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与仪器
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 主要实验仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 断头后张口喘气时间的测定
• 3.3.2 脑指数的测定
• 3.3.3 脑组织匀浆的制备
• 3.3.4 脑匀浆总蛋白含量的测定
• 3.3.5 脑匀浆单胺氧化酶含量的测定
• 3.3.6 脑匀浆乙酰胆碱酯酶含量的测定
• 3.3.7 脑匀浆谷氨酸含量的测定
• 3.3.8 脑组织病理学的改变
• 3.3.9 免疫组化法检测脑组织NMDAR 的表达
• 3.3.10 统计学处理
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 白首乌提取物对小鼠断头后张口喘气时间的影响
• 3.4.2 白首乌提取物对小鼠脑指数的影响
• 3.4.3 白首乌提取物对小鼠脑匀浆单胺氧化酶含量的影响
• 3.4.4 白首乌提取物对小鼠脑匀浆乙酰胆碱酯酶含量的影响
• 3.4.5 白首乌提取物对小鼠脑匀浆谷氨酸含量的影响
• 3.4.6 白首乌提取物对小鼠脑组织病理形态的影响
• 3.4.7 白首乌提取物对小鼠脑组织 NMDAR 表达的影响
• 3.5 本章小结
• 第四章 白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠脑组织抗氧化水平的影响
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与仪器
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 主要实验仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 脑组织匀浆的制备
• 4.3.2 脑匀浆总蛋白含量测定
• 4.3.3 脑匀浆SOD 活力和MDA 含量的测定
• 4.3.4 脑匀浆抗超氧阴离子自由基能力的测定
• 4.3.5 脑匀浆抑制羟自由基能力的测定
• 4.3.6 脑匀浆过氧化氢含量的测定
• 4.3.7 统计学处理
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 小鼠脑匀浆 SOD 活力和 MDA 含量测定结果
• 4.4.2 小鼠脑匀浆抗超氧阴离子能力测定结果
• 4.4.3 小鼠脑匀浆抑制羟自由基能力的测定结果
• 4.4.4 对小鼠脑匀浆过氧化氢含量的影响
• 4.5 本章小结
• 第五章 白首乌提取物对血管性痴呆模型小鼠远隔器官的影响
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料与仪器
• 5.2.1 实验材料
• 5.2.2 主要实验仪器
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 组织匀浆的制备
• 5.3.2 组织匀浆总蛋白含量测定
• 5.3.3 肝匀浆和肾匀浆SOD 活力和MDA 含量的测定
• 5.3.4 肝、肾、心、肺组织光镜病理学检查
• 5.3.5 统计学处理
• 5.4 结果与讨论
• 5.4.1 肝、肾匀浆中 SOD 活力和 MDA 含量测定结果
• 5.4.2 肝组织病理切片观察
• 5.4.3 肾组织病理切片观察
• 5.4.4 心组织病理切片观察
• 5.4.5 肺组织病理切片观察
• 5.5 本章小结
• 结论及展望
• 一、主要结论
• 二、 工作展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文