淡紫拟青霉颗粒菌剂研制及其防治禾谷孢囊线虫研究

论文摘要

淡紫拟青霉是重要的食线虫真菌,在植物线虫生物防治中具有很好的应用潜力。本文以耐多菌灵淡紫拟青霉PL221为出发菌株,测定了PL221对小麦禾谷孢囊线虫的寄生能力；筛选出较优的液体菌种,用于PL221的液固双相培养；初步筛选了能够保持菌株活性的助剂,进而研制出PL221颗粒菌剂,并对其田间应用技术和防效进行了评价。室内离体测定了淡紫拟青霉PL221对禾谷孢囊线虫卵粒和褐色孢囊的寄生能力,结果表明,对胚胎时期和含有幼虫的混合卵粒接种第10天,寄生率达61.01%,光学显微观察到菌丝大量缠绕卵壳,卵块内容物被消耗。褐色孢囊接种后,光学显微镜连续观察17天,只见褐色孢囊表面附着有菌丝,但挤破孢囊对孢囊内的卵进行染色观察,卵粒无被侵染现象,初步断定淡紫拟青霉仅在孢囊表面进行生长,而无法侵染健康褐色孢囊内部卵粒。筛选了两种较优的液体培养基——PDB和Czapek’s,作为液体发酵培养基,用于淡紫拟青霉固相培养。PDB液体种子的最佳种龄为60h,接种量为20%,固相发酵12天后孢子量可达7.28×109个/g; Czapek’s液体种子的最佳种龄为60h,接种量为15%,固相发酵12天后孢子量可达6.99×109个/g。初步研制了淡紫拟青霉颗粒菌剂。对淡紫拟青霉颗粒菌剂各组份进行了筛选,并利用不同载体、粘合剂等组分,按照一定的比例,通过造粒机造粒。淡紫拟青霉颗粒菌剂PLC在室温条件下,可放置半年以上,其初始菌落形成单位为8.33×107cfu/g,半年后为7.43×107cfu/g,其数量级保持在107。对淡紫拟青霉颗粒菌剂进行了田间防治禾谷孢囊线虫试验。试验结果表明,四种不同颗粒菌剂用量和5%涕灭威(神农丹)颗粒剂处理均与空白对照存在显著性差异。75kg/ha颗粒菌剂处理后,在小麦苗期和小麦生长后期(抽穗至扬花期)的防效分别为30.90%和31.96%,在小麦收获后,土壤中的孢囊数量比对照减少49.11%,总体防效与神农丹相当；100kg/ha颗粒菌剂处理的防效最好,在小麦苗期和小麦生长后期(抽穗至扬花期)的防效分别为57.25%和40.22%,在小麦收获后,土壤中的孢囊数量比对照减少59.82%；而25kg/ha和50kg/ha的防治效果较低,在小麦苗期,防治效果分别只有20.12%和14.25%,在小麦生长后期(抽穗至扬花期),防治效果分别为14.43%和18.56%,在小麦收获后,土壤中的孢囊数量比对照减少18.75%和13.39%。田间试验结果表明,在土壤中施用适当剂量的淡紫拟青霉颗粒菌剂,可以有效控制禾谷孢囊线虫的危害。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 第一节 小麦禾谷孢囊线虫（Heterodera avenae）病研究进展
• 1 小麦禾谷孢囊线虫病病原及其分类地位
• 2 小麦禾谷孢囊线虫（Heterodera avenae）的发生分布及其经济重要性
• 3 小麦禾谷孢囊线虫危害小麦的症状
• 4 小麦禾谷孢囊线虫的生物学特性及引起病害的发生规律
• 4.1 孵化特性
• 4.2 寄主范围
• 4.3 生活史及其发生规律
• 4.4 传播途径
• 5 小麦禾谷孢囊线虫病的防治对策
• 5.1 栽培措施
• 5.2 生物防治
• 5.3 药剂防治
• 第二节 淡紫拟青霉研究进展
• 1 分类地位
• 2 生物学特征
• 2.1 形态特征
• 2.2 淡紫拟青霉的培养特性
• 2.2.1 培养条件
• 2.2.2 营养条件
• 3 淡紫拟青霉在作物中的定殖及其对作物生长的影响
• 4 淡紫拟青霉对植物线虫的寄生作用和寄生机制
• 4.1 寄生作用
• 4.2 寄生机制
• 5 淡紫拟青霉对植物线虫的生防作用
• 第三节 淡紫拟青霉菌剂研究进展
• 1 食线虫真菌菌剂研究
• 2 淡紫拟青霉发酵生产研究
• 2.1 淡紫拟青霉的液体深层发酵
• 2.2 淡紫拟青霉的固体发酵
• 2.3 淡紫拟青霉的液固两相发酵
• 3 淡紫拟青霉颗粒菌剂的研究
• 4 淡紫拟青霉菌剂应用所面临的问题
• 5 淡紫拟青霉菌剂的开发前景
• 第四节 本课题的立题依据和意义
• 第二章 研究内容
• 第一节 淡紫拟青霉PL221对禾谷孢囊线虫的室内寄生测定
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 淡紫拟青霉PL221菌株
• 1.1.2 禾谷孢囊线虫的孢囊及卵粒
• 1.1.3 WA培养基
• 1.1.4 染色试剂
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 淡紫拟青霉PL221对禾谷孢囊线虫卵粒的寄生及寄生率的统计
• 1.2.2 淡紫拟青霉PL221对健康褐色孢囊的寄生观察
• 1.2.3 数据统计与分析
• 2 结果与分析
• 2.1 淡紫拟青霉PL221对禾谷孢囊线虫卵粒的寄生观察和寄生率的统计
• 2.2 淡紫拟青霉PL221对褐色孢囊的寄生观察
• 3 小结与讨论
• 第二节 淡紫拟青霉固态培养过程中液体菌种的选择
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 供试菌株
• 1.1.2 培养基
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 斜面菌种的活化
• 1.2.2 最佳液体种子的选择
• 1.2.3 最佳液体种子菌龄和接种量的确定
• 1.2.4 固体发酵培养
• 1.2.5 固体发酵物孢子量的确定
• 1.2.6 数据统计与分析
• 2 结果与分析
• 2.1 最佳液体种子的选择
• 2.1.1 不同液体种子培养基中淡紫拟青霉的生长情况
• 2.1.2 不同液体培养基中淡紫拟青霉菌丝球数量的测定
• 2.1.3 不同液体培养基中淡紫拟青霉菌丝球干重的测定
• 2.2 最佳液体种子种龄和接种量的确定
• 2.2.1 PDB培养基液体种子其种龄和接种量对固体发酵产孢量的影响
• 2.2.2 Czapek's培养基液体种子其种龄和接种量对固体发酵产孢量的影响
• 2.3 淡紫拟青霉固体发酵培养
• 2.3.1 食用菌培养袋发酵法
• 2.3.2 塑料浅盘发酵法
• 2.3.3 培养皿发酵法
• 3 小结与讨论
• 第三节 淡紫拟青霉颗粒菌剂的研制
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 供试菌株
• 1.1.2 助剂
• 1.1.3 培养基与试剂
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 颗粒菌剂有效成分——淡紫拟青霉的加工
• 1.2.2 颗粒菌剂其它组分的筛选
• 1.2.3 颗粒菌剂的生产
• 1.2.4 颗粒菌剂质量检测
• 1.2.5 数据统计与分析
• 2 结果与分析
• 2.1 颗粒菌剂其它组分的筛选
• 2.1.1 载体硅藻土和膨润土的初步筛选
• 2.1.2 粘合剂的初步筛选
• 2.1.3 分散剂的初步筛选
• 2.1.4 崩解剂和助崩解剂以及润滑剂的初步筛选
• 2.2 颗粒菌剂质量检测
• 2.2.1 颗粒菌剂有效活性成份——淡紫拟青霉的活孢含量测定
• 2.2.2 颗粒菌剂的质量指标
• 2.2.3 常温贮藏期（货架期）
• 3 小结与讨论
• 第四节 淡紫拟青霉颗粒菌剂对小麦禾谷孢囊线虫病的田间防治效果
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 试验地块的预先调查
• 1.2.2 淡紫拟青霉颗粒菌剂及药剂处理
• 1.2.3 田间小麦病情调查
• 1.2.4 收获期孢囊数量调查
• 1.2.5 数据统计与分析
• 2 结果与分析
• 2.1 小麦苗期病情的调查
• 2.2 小麦生长后期（抽穗至扬花期）病情指数调查
• 2.3 收获期不同处理土壤中小麦禾谷孢囊线虫孢囊数量的调查
• 3 小结与讨论
• 第三章 全文总结与讨论
• 1 主要研究结果
• 2 研究展望
• 参考文献
• 附图
• 致谢