论文题目: 蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用与机理研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 中西医结合临床
作者: 王显刚
导师: 张文高
关键词: 蒺藜总皂苷,心肌缺血再灌注损伤,心肌细胞,保护机制
文献来源: 山东中医药大学
发表年度: 2005
论文摘要: 研究目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI/R)的保护作用及其机理。研究方法:①建立在体大鼠MUR模型,检测指标及方法:苏木素—伊红(HE)染色观察心肌组织病理改变,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积,心肌组织髓过氧化酶(MPO)检测观察中性粒细胞(PMN)浸润,血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸肌酶(CPK)、丙二醛(MDA)检测,放免法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β),流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,免疫组织化学检测Bax、Bcl-2、细胞间黏附分子—1(ICAM-1)、NF-κ B p65蛋白表达。②建立培养乳鼠心肌细胞MI/R模型,检测指标及方法:心肌细胞形态观察,心肌细胞搏动功能观察,心肌细胞存活率,透射电镜细胞超微观察,培养液LDH、CPK、MDA检测,放免法检测培养液TNF-α、IL-1β,细胞ELISA检测心肌细胞ICAM-1表达,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,免疫细胞化学检测Bax、Bel-2、NF-κ B p65蛋白表达。结果:GSTT可以改善MI/R心肌病理及超微结构改变,缩小心肌梗死面积,增加心肌细胞存活率,改善心肌细胞搏动功能,抑制PMN浸润,减少LDH、CPK、MDA、TNF-α、IL-1β释放,抑制心肌细胞凋亡、下调Bax基因、上调Bcl-2基因,抑制ICAM-1、NF-κ B p65蛋白表达。结论:GSTT对大鼠MI/R有保护作用,其机制与抑制PMN浸润,减轻氧自由基损伤,稳定心肌细胞膜结构,抑制炎症因子释放,通过下调Bax基因、上调Bel-2基因抑制细胞凋亡,抑制ICAM-1表达,抑制NF-κ B p65核移位等有关。
论文目录:
引言
第一部分 蒺藜总皂苷对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用与机理研究
材料与方法
一、实验用品
二、实验方法
(一) 大鼠心肌缺血再灌注模型制备
(二) 实验分组及处理
(三) 标本采集
(四) 检测方法
(五) 统计方法
结果
一、大鼠心肌组织病理形态学改变
二、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌梗死面积的影响
三、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤中性粒细胞浸润的影响
四、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤血清心肌酶释放的影响
五、蒺藜总皂昔对大鼠心肌缺血再灌注损伤MDA含量的影响
六、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤炎性因子(TNF-α、IL-1β)的影响．11
七、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤ICAM-1蛋白表达的影响
八、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡率的影响
九、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响
十、蒺藜总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤NF-κB p65活性的影响
第二部分 蒺藜总皂苷对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤的保护作用与机理研究
材料与方法
一、实验用品
二、实验方法
(一) 乳鼠心肌细胞的培养
(二) 培养乳鼠心肌细胞模拟心肌缺血再灌注模型制备
(三) 实验分组
(四) 标本采集及检测方法
(五) 统计方法
结果
一、细胞形态学观察
二、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注心肌细胞超微结构的影响
三、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞搏动功能的影响
四、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞存活率的影响
五、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞心肌酶释放的影响
六、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞MDA含量的影响
七、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞炎性因子(TNF-α、IL-1β)释放的影响
八、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞ICAM-1蛋白表达的影响
九、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡率的影响
十、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡基因(Bax、Bcl-2)蛋白表达的影响
十一、蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞NF-κB p65活性的影响
讨论
一、心肌缺血再灌注模型的构建
二、蒺藜总皂苷可改善心肌缺血再灌注损伤病理损害
三、蒺藜总皂苷可缩小心肌缺血再灌注损伤心肌梗死面积
四、蒺藜总皂苷可保护模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的搏动功能及提高损伤心肌细胞存活率
五、蒺藜总皂苷可抑制心肌缺血再灌注损伤中性粒细胞浸润
六、蒺藜总皂苷可减轻心肌缺血再灌注损伤膜通透性损伤
七、蒺藜总皂苷可减少心肌缺血再灌注损伤中过氧化脂质的生成
八、蒺藜总皂苷可减少心肌缺血再灌注损伤中炎性因子的生成
九、蒺藜总皂苷可抑制心肌缺血再灌注损伤中细胞黏附因子的表达
十、蒺藜总皂苷可降低心肌缺血再灌注损伤中细胞凋亡率及调节凋亡基因的表达
十一、蒺藜总皂苷可抑制心肌缺血再灌注损伤中NF-κB的活性
十二、本研究的意义
结语
参考文献
附图
综述
附录
致谢
发布时间: 2005-07-14
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