论文摘要
第一部分原发性胆汁性肝硬化小鼠模型的建立和鉴定原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis,PBC）是以胆管上皮损伤为特征的器官特异性自身免疫性肝病,最终导致胆汁淤积、肝脏纤维化甚至肝硬化。目的:本研究拟应用干扰素-1诱导剂,聚肌胞（polyinosinic polycytidylic acid,polyI:C）,诱导PBC样自身免疫过程,从而建立PBC动物模型。方法:6到8周雌性C57BL/6小鼠腹腔注射5 mg/kg的poly I:C,每周两次;于第8周、第16周、第24周收集小鼠肝脏、血清标本,病理检测及免疫组化分析肝脏淋巴细胞浸润程度。间接免疫荧光（immunofluorescence,IIF）和酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA）检测血清抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody,AMA）。结果:poly I:C腹腔注射后,第8周C57BL/6小鼠肝脏开始出现门脉汇管区炎症细胞浸润,随着造模时间的延长到第16周小鼠肝脏出现小胆管增生,第24周出现胆汁淤积。第24周时所有poly I:C腹腔注射小鼠血清AMA均阳性,并出现碱性磷酸酶和总胆红素升高。结论:通过poly I:C腹腔注射可使遗传易感雌性C57BL/6小鼠出现PBC样改变,为PBC发病机制的研究及其新药物疗效的评价提供帮助。第二部分TGF-β1信号传导通路异常与原发性胆汁性肝硬化的发生发展原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis,PBC）以肝内小胆管进行性破坏伴门脉炎症性改变、抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibodies,AMAs）阳性为特征的自身免疫性肝病。最新的研究显示转化生长因子β1（transforming growthfactorβ1,TGF-β1）信号传导通路在PBC的发病中起重要作用。目的:研究TGF-β1信号传导通路在PBC发病中所起的作用。方法:6到8周雌性C57BL/6小鼠（n=6）腹腔注射聚肌胞（poly I:C）复制PBC模型,免疫组化、免疫印迹和实时定量PCR分析模型组小鼠和对照组小鼠肝脏TGF-β1、TGF-β受体Ⅰ（TβRⅠ）、TGF-β受体Ⅱ（TβRⅡ）、p-Smad2/3、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和α1（Ⅰ）型胶原的表达。流式细胞仪分析小鼠肝脏、脾脏淋巴细胞亚群。结果:模型组小鼠具有包括碱性磷酸酶（ALP）升高、AMA阳性、肝内小胆管进行性破坏伴门脉炎症性改变在内的类似人类PBC的特征。免疫组化显示,PBC模型组小鼠肝脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、p-Smad2/3、α-SMA和α1（Ⅰ）型胶原蛋白表达明显增高;免疫印迹和实时定量PCR显示,PBC模型组小鼠肝脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、p-Smad2/3、α-SMA和α1（Ⅰ）型胶原蛋白和mRNA水平高于正常对照小鼠（P＜0.05）。PBC模型组小鼠肝脏、脾脏CD4+CD25+FOXP3+和CD8+T细胞总数和比例均高于正常对照组小鼠（P＜0.01）,且与TGF-β1升高有关。结论:TGF-β1在PBC的发生发展中可能起双重作用:TGF-β1在抑制炎症反应的同时导致肝脏纤维化。TGF-β1信号传导通路的异常对PBC的发生发展中起着重要作用。第三部分姜黄预防和改善原发性胆汁性肝硬化小鼠模型病变的发展姜黄有抗炎、抗氧化和抗纤维化活性,最新的研究显示姜黄有益于慢性肝病的治疗。目的:通过本研究探讨姜黄是否可以预防和减轻原发性胆汁性肝硬化（PBC）小鼠门脉区炎症和胆管损害。研究其治疗机制是否为通过增加过氧化物酶体增生物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）活性抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）所致。方法:6到8周雌性C57BL/6小鼠（n=6）腹腔注射聚肌胞（poly I:C）复制PBC模型,同时分别给以姜黄（200、400和800mg/kg/d）,或容积灌胃治疗。比较对照组和各治疗组之间肝脏生化、抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibodies,AMAs）和肝脏病理组织改变。通过免疫组化、免疫印迹和实时定量PCR分析对照组和治疗组之间小鼠肝脏TGF-βl、TGF-β受体Ⅰ（TβRⅠ）、TGF-β受体Ⅱ（TβRⅡ）、p-Smad2/3、PPARγ、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和α1（Ⅰ）型胶原变化。结果:姜黄400和800mg治疗组小鼠肝脏生化、AMAs阳性率和肝脏病理组织改变均较PBC模型组明显改善,差距有显著统计学意义（P＜0.05）。免疫组化显示,姜黄400和800mg治疗组小鼠肝脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、p-Smad2/3、PPARγ、α-SMA和α1（Ⅰ）型胶原表达较PBC模型组小鼠降低,而PPARγ表达增加。免疫印迹和实时定量PCR显示,姜黄400和800mg治疗组小鼠肝脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、p-Smad2/3、α-SMA和α2（Ⅰ）型胶原蛋白和mRNA水平低于PBC模型组小鼠（P＜0.05）,而PPARγ表达高于PBC模型组,差距有显著统计学意义（P＜0.05）。结论:姜黄可能通过剂量依赖性活化PPARγ抑制TGF-β1信号通路,预防和改善PBC模型组小鼠肝脏病变发展,可能成为治疗PBC的新药物。
论文目录
相关论文文献
- [1].抑郁模型大鼠海马与脑血管变化的动态研究[J]. 影像视觉 2016(Z3)
- [2].基于最小模型组最优模型扩展的机动目标跟踪方法[J]. 现代雷达 2015(03)
- [3].淫羊藿苷联合骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤区域炎症反应的影响[J]. 广东医学 2020(01)
- [4].慢性光照联合氢醌诱导小鼠年龄相关性黄斑变性模型[J]. 中国实验动物学报 2019(06)
- [5].基于“鼻-脑”通路细胞模型组探索相对分子质量及粒径因素对药物制剂经鼻入脑的影响[J]. 中草药 2020(22)
- [6].背根神经节8型代谢型谷氨酸受体对神经病理性疼痛的影响[J]. 上海医学 2013(06)
- [7].罗格列酮对动脉粥样硬化的影响及其机制研究[J]. 赣南医学院学报 2020(02)
- [8].轴向负载诱导肾虚小鼠椎间盘退变的实验研究[J]. 中国中医骨伤科杂志 2020(01)
- [9].动脉粥样硬化动物模型筛选[J]. 中国食品卫生杂志 2017(01)
- [10].丙戊酸抑制大鼠实验性自身免疫性神经炎机制研究[J]. 解放军医药杂志 2013(02)
- [11].海藻多糖的促排铅药效初步研究[J]. 中国处方药 2020(01)
- [12].参与教学:编外学员的追梦[J]. 新课程(综合版) 2015(05)
- [13].内脏大神经切断对犬急性坏死性胰腺炎的治疗作用[J]. 中国普通外科杂志 2013(03)
- [14].补阳还五汤加味预防动脉粥样硬化形成机制[J]. 中国实验方剂学杂志 2017(07)
- [15].四神丸对伊立替康所致小鼠迟发性腹泻的影响[J]. 辽宁中医杂志 2017(06)
- [16].高脂喂养联合免疫损伤建立兔动脉粥样硬化模型及评价[J]. 中国医药导报 2016(18)
- [17].心痛贴贴敷对大鼠心肌梗死影响的实验研究[J]. 山西医药杂志 2016(20)
- [18].创伤性失血性休克浅低温动物模型的建立[J]. 中华灾害救援医学 2015(01)
- [19].黄连素灌胃对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肠道菌群的影响[J]. 实用肝脏病杂志 2013(02)
- [20].蜂胶对慢性酒精性肝损伤的保护作用及其机制研究[J]. 健康研究 2009(02)
- [21].加味甘麦大枣汤对慢性应激抑郁模型小鼠行为的影响[J]. 广州医药 2019(06)
- [22].淫羊藿苷干预兔早期激素性股骨头坏死的实验研究[J]. 中国修复重建外科杂志 2020(02)
- [23].寒证和热证动物模型的建立方法及评价[J]. 中药药理与临床 2020(01)
- [24].口服恒古骨伤愈药对骨质疏松性骨折树部分血液生化指标的影响[J]. 昆明医科大学学报 2017(07)
- [25].强心一号复方对脓毒症小鼠心脏的保护作用及机制[J]. 中医杂志 2019(24)
- [26].香连片预防小鼠溃疡性结肠炎癌变的作用及机制[J]. 中国老年学杂志 2017(02)
- [27].参麦注射液对线粒体毒素致豚鼠药物性耳聋模型的影响[J]. 海南医学 2017(13)
- [28].双合汤对酒精性股骨头坏死的干预作用[J]. 中国实验方剂学杂志 2016(05)
- [29].低分子肝素对高脂血症性胰腺炎大鼠VEGF表达的影响[J]. 湖南中医药大学学报 2016(05)
- [30].通心络对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用[J]. 医学研究生学报 2015(11)
标签：抗线粒体抗体论文; 动物模型论文; 聚肌胞论文; 原发性胆汁性肝硬化论文; 转化生长因子论文; 调节细胞论文; 肝脏论文; 姜黄论文; 肝脏纤维化论文;