蝇蛆蛋白的提取及其抗菌活性研究

论文摘要

近期一种可抵御大多数抗生素的耐药性超级细菌NDM-I在英国、美国、印度等国家小规模爆发,这种细菌其实是一种特殊的蛋白酶,它能够进入大多数细菌的DNA线粒体中存活,从而使细菌产生广泛的耐药性。抗菌肽（antibacterial peptides）是生物免疫系统产生的一类抵抗外界病原体感染的多肽,它除具有非特异性的抵抗细菌、真菌、病毒等病原体外,还有抗肿瘤细胞的作用,特别是对多重耐药菌和肿瘤细胞有杀伤作用,而不破坏人体的正常细胞,是一类具有巨大发展潜力的新型抗菌药。蝇及幼虫主要生长在腐物、粪便和垃圾等含有大量细菌的恶劣环境中,其体表带有许多病原菌,能传播多种疾病,但其自身却不会因为感染病原菌而引起死亡,这说明蝇应该对病原微生物有强大的免疫力,并能产生强效抗菌物质。本试验建立了家蝇幼虫养殖方法,通过损伤感染免疫诱导的方法使家蝇幼虫分泌抗菌活性蛋白。经过试验,对幼虫的干燥工艺的进行优化,幼虫处死温度、蛋白提取液的设置、蛋白提取液pH等提取因素的变化对粗提取液抗菌活性的影响,提取液抗菌活性检测方法等进行了初步研究,为开发利用家蝇抗菌肽提供一定前期基础。幼虫养殖是提取抗菌蛋白的前提条件,经过反复试验建立了较为稳定的养殖方法。家蝇幼虫养殖要保持正常的换气,充足的养料,室内温度需保持在35-40℃,湿度为65～70%,适当的光照。蝇蛆的成虫微波干燥和磨浆微波干燥相比,成虫干燥所需时间相对较少,对于大规模的生产来说可以节省不少的成本,虽然磨浆干燥在色泽方面相对较理想,但综合产品的品质考虑,所以还是选择成虫干燥可以带来较大收益,成虫干燥的最佳条件为采用微波功率为231w、平铺厚度为7mm。正交设计法优选抗菌蛋白的提取工艺为：幼虫诱导的超声波处理时间20s,幼虫的热处理时间25min,幼虫的热处理温度75℃,提取液的pH值为6.0。蝇蛆抗菌蛋白具有广谱抗菌活性,对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌均有明显的抗菌作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 第二章 蝇蛆的规模化养殖
• 1 材料和方法
• 2 结果与讨论
• 第三章 蝇蛆的干燥技术
• 1 材料和方法
• 2 结果与讨论
• 第四章 蝇蛆蛋白的提取单因素的影响
• 1 材料和方法
• 2 结果与讨论
• 第五章 正交设计法优选抗菌蛋白的提取工艺
• 1 材料和方法
• 2 结果与讨论
• 第六章 蝇蛆蛋白抗菌活性研究
• 1 材料和方法
• 2 结果与讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢