新疆良种驴DGAT2基因部分序列PCR-SSCP多态性与生产性状相关性分析

论文摘要

DGAT是脂肪合成代谢中的关键酶之一,它与脂类在脂肪细胞中的沉积、血浆中三酰甘油的调节、肌肉中能量代谢以及畜禽卵母细胞的形成等有密切的关系。研究证明,DGAT基因是影响畜禽肉质性状、产奶性状和体脂性状的重要候选基因,己成为进行分子标记辅助育种主要因素之一,对筛选和鉴定影响新疆良种驴的肉质、产奶等生产性状,具有重要的理论意义和应用价值。本实验采用PCR-SSCP技术,对新疆和田和喀什良种驴的DGAT2基因的多态性进行了检测,对不同SSCP带型的DNA片段进行测序,分析了新疆良种驴的遗传多样性及多态性位点与生产性状的关系,为其合理保护、开发和利用提供了科学依据。实验结果如下：（1） PCR-SSCP技术检测结果分析检测了新疆和田和喀什良种驴DGAT2基因第3、4、5内含子和第5、6外显子的多态性,仅发现第3内含子存在多态性现象,有两种等位基因分别命名为A和B,存在AA和AB两种基因型,没有检测到BB基因型,其中AA基因型为优势基因型。纯合子AA型有两条带,杂合子AB有四条带。基因型频率AA>AB,基因型频率为0.6964（0.3036）。测序结果表明：AB型与AA型相比存在A→G的碱基突变。（2） DGAT2基因第3内含子多态性与体尺性状的相关性分析DGAT2基因第3内含子多态性与体尺性状有极显著或显著的相关性。和田良种驴AA与AB基因型个体相比,体高和胸围差异极显著（P<0.01）,体长差异显著（P<0.05）,AB型体高、胸围和体长高于AA型。喀什良种驴AA与AB基因型个体相比,体高差异显著（P<0.05）,AB型体高、胸围和体长高于AA型,但体长和胸围差异不显著（P>0.05）。实验群体中喀什良种驴在体高、体长和胸围高于和田良种驴,差异极显著（P<0.01）。（3） DGAT2基因第3内含子多态性与屠宰性状的相关性分析和田良种驴AA和AB基因型个体的体重、胴体重、屠宰率及净肉重差异不显著（P>0.05）,只有净肉率差异极显著（P<0.01）,但这几项测定值均是AB型高于AA型。喀什良种驴AA和AB基因型个体的体重、胴体重、屠宰率、净肉重及净肉重差异都不显著（P>0.05）,但这几项测定值中,除AB型的净肉率高于AA型,其余均是AA型高于AB型。和田良种驴的屠宰率和净肉率高于喀什良种驴,差异极显著（P<0.01）。（4） DGAT2基因第3内含子多态性与奶产量的相关性分析DGAT2基因内含子3多态性位点与和田和喀什良种驴的奶产量没有显著的相关性,AB基因型平均日产奶量与整个泌乳期的产奶总量高于AA基因型,但是都没有达到显著水平。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 中英文对照表
• 绪论
• 第一篇 文献综述
• 1 新疆养驴业的历史、现状及发展途径
• 1.1 新疆驴的起源
• 2 良种驴种群的产生及其特点
• 2.1 良种驴的产生
• 2.2 良种驴品种特点
• 3 DGAT2基因研究概况
• 3.1 DGAT基因概述
• 3.2 DGAT基因的定位与结构
• 3.3 DGAT基因的功能与作用
• 3.4 DGAT基因的遗传多态性
• 3.5 DGAT基因研究前景
• 4 PCR-SSCP研究概况
• 4.1 PCR-SSCP原理
• 4.2 PCR-SSCP技术发展及应用前景
• 第二篇 试验研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 聚合酶链式反应（PCR）
• 1.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测
• 1.5 PCR产物回收测序
• 1.6 序列测定
• 1.7 数据统计分析
• 2 结果与分析
• 2.1 基因组DNA样品的检测
• 2.2 DGAT2基因PCR-SSCP多态性检测
• 2.3 DGAT2基因内含子3PCR-SSCP多态性与驴生产性状的相关性分析
• 3 讨论
• 3.1 基因组DNA的制备
• 3.2 影响PCR扩增的因素
• 3.3 影响PCR-SSCP的因素
• 3.4 DGAT2基因第3内含子基因型、等位基因频率分析
• 3.5 DGAT2基因第3内含子PCR-SSCP多态性对良种驴体尺性状的影响
• 3.6 DGAT2基因第3内含子多态性与新疆良种驴屠宰性状的相关性
• 3.7 DGAT2基因第3内含子多态性与新疆良种驴产奶量的相关性
• 总体结论
• 创新点
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介
• 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表