猪血红蛋白的脱色及其珠蛋白源ACE抑制肽的研究

论文摘要

选用脱色率和蛋白质损失率为指标,研究活性炭、羧甲基淀粉脱除猪血红蛋白酶解液色泽的优化工艺条件;以珠蛋白水解度为指标,对胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解珠蛋白条件进行优化;在酶解优化条件下,通过不同水解阶段的珠蛋白水解产物对ACE活性抑制率的测定,筛选具有较高ACE抑制活性的珠蛋白源生物活性肽酶解技术参数;经Sephadex G-25层析分离后获得珠蛋白源ACE抑制肽。1.活性炭对猪血红蛋白酶解液的脱色研究。通过正交试验,比较研究活性炭用量、pH值、温度和时间对活性炭脱除猪血红蛋白酶解液色泽效果的影响。结果表明:活性炭的用量为1%,pH值为4.0,温度为80℃,时间为40min时为活性炭脱除猪血红蛋白色泽的最佳工艺参数,其酶解液脱色率为87.68%,蛋白质损失率为37.83%。2.羧甲基淀粉对猪血红蛋白酶解液的脱色研究。根据单因素试验确定时间为20min,再通过正交试验,比较研究羧甲基淀粉的用量、pH值和温度对猪血红蛋白酶解液脱色效果的影响。结果表明:在羧甲基淀粉的用量为0.2%,pH值为4.0、温度为50℃的条件下脱色吸附20min,为羧甲基淀粉处理猪血红蛋白最佳脱色工艺参数,其酶解液脱色率为84.90%,蛋白质损失率为12.29%。3.用三因素二次旋转试验与正交试验分别优化胃蛋白酶、木瓜蛋白酶水解珠蛋白的水解条件,测定各酶优化水解方式下不同水解阶段的水解产物对ACE抑制活性的影响。结果表明:在胃蛋白酶水解珠蛋白的酶量0.3%,初始pH值2.6,蛋白浓度0.7%,温度37℃,时间4h时,水解产物对ACE抑制活性最大,抑制率为93.2%;在木瓜蛋白酶水解珠蛋白的酶量为0.7%,初始pH值为5.2,蛋白浓度为0.5%,温度为56℃,3h时,水解产物对ACE的最大抑制率为90.49%。4.选择具有分子筛作用的Sephadex G-25为层析材料对具有较高ACE抑制活性的珠蛋白源活性肽进行分离。在洗脱流速为0.5mL/min时,选用三种不同离子强度的磷酸盐缓冲液进行洗脱分离。结果表明:在0.03mol/L离子强度的pH8.3的磷酸盐缓冲液洗脱下,Sephadex G-25可从水解物中分离得到4个组分峰,其第4组分峰对ACE的抑制活性最大,抑制率为93.3%。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 文献综述
• 1.血红蛋白简述
• 2.生物活性肽概述
• 3.猪Hb源生物活性肽及具有降低血压升高功能的ACE抑制肽简述
• 4.前景与展望
• 引言
• 1.材料与方法
• 1.1 试验材料与仪器
• 1.2 试验时间地点
• 1.3 试验方法
• 2.结果与分析
• 2.1 猪血红蛋白酶解液的脱色
• 2.1.1 活性炭对猪血红蛋白酶解液的脱色
• 2.1.2 CMS对猪血红蛋白酶解液的脱色
• 2.2 珠蛋白的水解条件优化
• 2.2.1 胃蛋白酶水解珠蛋白条件的优化
• 2.2.2 木瓜蛋白酶水解珠蛋白条件的优化
• 2.3 各酶优化水解方式下不同水解阶段产物对ACE抑制率的测定
• 2.4 Sephadex G-25分离ACE抑制活性肽条件的筛选
• 3.讨论
• 3.1 猪Hb酶解液的脱色
• 3.2 酶解条件的优化及其不同时间阶段产物对ACE抑制活性的影响
• 3.3 目标活性肽的分离与鉴定
• 4.结论
• 参考文献
• 附录 本论文所用缩写词
• 致谢
• 作者简介
• 在读期间发表的学术论文