论文摘要
目的:1、研究大黄素对原代培养的人牙周膜细胞生物学活性的影响。2、研究大黄素对大鼠实验性牙周炎模型的牙周组织中IL-6、BGP表达的影响。方法:1、在体外培养人牙周膜细胞的基础上,采用噻唑蓝(MTT)比色法、考马斯亮蓝法、酶动力学方法检测探讨大黄素对原代培养的人牙周膜细胞增殖活性、蛋白合成、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。2、在成功建立大鼠实验性牙周炎模型的基础上,实验动物分别灌服大黄素后第1、2、3、4周处死(每次每组10只),取牙周组织标本作切片,行常规HE染色,观察牙周组织病理变化状况,并采用免疫组织化学法检测IL-6、BGP水平变化。结果:1、大黄素对牙周膜细胞生长增殖的影响:与对照组比较,作用24h,大黄素(B,C,D组)均能明显增强人牙周膜细胞增殖能力(P<0.05),而A、E组与对照组比较无统计学意义;作用48h,大黄素(A,B,C组)均能明显增强人牙周膜细胞增殖能力(P<0.05),而D、E组与对照组比较无统计学意义;作用72h,大黄素(A,B,C组)均能明显增强人牙周膜细胞增殖能力(P<0.05),而D、E组与对照组比较无统计学意义。而且大黄素在20-50μg/ml浓度范围内作用时间最长。2、大黄素对牙周膜细胞蛋白总含量的影响:大黄素组(A,B,C组)细胞培养液中蛋白总含量均明显高于对照组(P<0.05),而大黄素组(D、E组)与对照组比较无统计学意义。说明大黄素在10-50μg/ml浓度范围内蛋白总含量增加,100-200μg/ml浓度时对蛋白总含量无明显影响。3、大黄素对牙周膜细胞ALP活性的影响:大黄素(C组)细胞培养液中ALP活性均明显高于对照组(P<0.05),而大黄素组(A,B,D,E组)与对照组比较无统计学意义。说明大黄素在50μg/ml浓度范围内能增强人牙周膜细胞ALP活性,10、20、100、200μg/ml浓度时对ALP活性无明显影响。4、大黄素对大鼠实验性牙周炎模型的牙周组织中IL-6、BGP表达的影响:牙周炎组牙周组织中工L-6表达明显高于正常组(P<0.05),IL-6表达于治疗第3、4周明显低于牙周炎平行对照组(P<0.05),牙周炎治疗组IL-6表达第1、2周相比无明显差异,第3、4周IL-6表达相比亦无明显差异,而第3、4周IL-6表达明显低于第1、2周(P<0.05)。牙周炎组牙周组织中BGP表达低于正常组(P<0.05),各时间段牙周炎治疗组牙周组织中BGP表达明显高于牙周炎平行对照组(P<0.05),牙周炎治疗组BGP表达第1、2周相比无明显差异,第3、4周BGP表达明显高于第1周(P<0.05),而第3、4周之间BGP表达无明显差异。结论:大黄素在一定浓度范围内(20-50μg/ml)能提高牙周膜细胞的增殖活性、蛋白合成及ALP活性,大鼠实验性牙周炎模型牙周组织中IL-6含量较正常对照组明显升高,BGP含量较正常对照组明显降低,应用大黄素能抑制实验性大鼠牙周炎模型牙周组织中IL-6的表达,增加了BGP的表达。根据上述结果证实大黄素可抑制牙周组织炎性反应和促进组织再生,从而为牙周病临床的合理用药提供科学依据。
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