论文摘要
人内皮抑素（Endostatin）是第一个进入临床研究的内源性血管生成抑制剂,是胶原蛋白ⅩⅧC末端非胶原区NCl结构域的20KDa的片段。它可以抑制内皮细胞的增殖和转移,从而降低肿瘤内血管生成,阻断营养通路,达到杀死肿瘤细胞的目的。其最大的优点为无毒性和无抗药性。本文利用反转录PCR克隆人Endostatin基因,分别构建到分离表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP-C1中,然后把两个重组表达载体利用脂质体介导法分别转染真核细胞hela,48小时后可在荧光显微镜下观察到被转染细胞发出的绿色荧光,传代10次后,绿色荧光仍持续表达,说明是稳定转染。并且,利用兔抗人Endostatin抗体对已转染的细胞作免疫细胞化学分析,DAB显色后,在显微镜下观察,结果显示,转染的细胞显棕红色,没有转染的细胞不显色。这说明,Endostatin在转染的细胞内稳定遗传与表达。从而为基因药物和基因治疗的研究奠定了基础。