芦笋边角料提取分离及活性研究

论文摘要

芦笋（Asparagus officinalis Linn.）,学名石刁柏,属百合科天门冬属多年生宿根性草本植物。是一种药食兼用的上等蔬菜。药理学研究表明:长期食用可提高免疫、活血通经、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、降血脂、降血糖等。其中甾体皂苷为其重要物质基础。目前我国正在进行芦笋的大规模种植与产品上市,生产发展十分迅速,随着芦笋种植的大量推广,加工过程产生的大量边角料作为废料被弃去,任其自然腐败,既污染了环境,又造成了资源的极大浪费。据测定,这些废弃物中除含有大量营养元素外,还含有丰富的皂苷类成分,为提高芦笋的综合利用率,本文主要对以下几个方面进行了研究:1、芦笋边角料的提取分离。首先选用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇对芦笋边角料提取物进行萃取分离,然后采用大孔吸附树脂D101对正丁醇部分进行柱层析分离,最后根据活性实验提示,针对D101树脂80%醇洗部分进行硅胶柱层析分离,薄层层析及定性试验显示:得到三个显色斑点单一的皂苷化合物,并命名为:皂苷1、皂苷2、皂苷3。2、芦笋皂苷降血糖活性的初步研究。通过体外a-葡萄糖苷酶.抑制剂模型,对芦笋皂苷提取物的不同组分进行了筛选,结果表明:皂苷1、80醇洗组分、皂苷3有显著的a-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50分别为0.25mg/mL、0.41mg/mL、0.52mg/mL。表明芦笋皂苷有一定的降血糖作用。3、芦笋皂苷抗糖尿病并发症活性的初步研究。首次采用牛血清白蛋白-葡萄糖模型,针对芦笋皂苷对非酶糖基化产物生成量的影响进行了考察。结果表明:多数组分对非酶糖基化产物的生成均有不同程度的抑制作用,且抑制能力与浓度对数呈现良好的线性关系。其中80%醇洗组分、皂苷1、皂苷3抑制作用最为显著,80%醇洗组分的IC50仅为0.024mg/mL。初步显示芦笋皂苷有一定的抗糖尿病并发症活性。4、芦笋皂苷体外抗凝活性研究。通过ADP诱导的大鼠血小板聚集实验,初步研究了芦笋皂苷对血小板聚集的影响。测定结果显示:皂苷3有一定的血小板聚集抑制活性,且其浓度与抑制能力呈现一定的量效关系,其IC50为1.27mg/mL。另外,皂苷3对大鼠血浆凝血酶原时间（PT）、血浆活化部分凝血酶时间（APTT）、血浆凝血酶时间（TT）具有明显延长作用,同对照组相比具有显著性差异,提示皂苷3可能具有抗血栓的药理作用,有防治心脑血管疾病方面的前景。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 1.1 芦笋化学成分研究进展
• 1.1.1 皂苷类
• 1.1.2 黄酮类
• 1.1.3 多糖类
• 1.1.4 蛋白质和氨基酸类
• 1.1.5 矿物质元素
• 1.1.6 维生素
• 1.1.7 其它成分
• 1.2 芦笋药理活性研究进展
• 1.2.1 抗肿瘤作用
• 1.2.2 降血脂作用
• 1.2.3 保肝解毒作用
• 1.2.4 调节免疫功能
• 1.2.5 抗氧化及衰老作用
• 1.2.6 抗疲劳作用
• 1.2.7 抗溃疡作用
• 1.2.8 其它药理作用
• 1.3 甾体皂苷研究进展
• 1.3.1 甾体皂苷的提取分离
• 1.3.2 甾体皂苷的含量测定方法
• 1.4 a-葡萄糖苷酶研究进展
• 1.4.1 a-葡萄糖苷酶体内作用机制
• 1.4.2 a-葡萄糖苷酶抑制剂种类的研究
• 1.4.3 a-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的研究
• 1.5 非酶糖基化反应研究进展
• 1.5.1 非酶糖基化反应原理
• 1.5.2 非酶糖基化反应抑制剂种类的研究
• 1.5.3 非酶糖基化反应抑制剂筛选模型的研究
• 1.6 选题目的及意义
• 1.7 研究内容
• 1.7.1 研究方案
• 1.7.2 工艺路线
• 参考文献
• 第二章 芦笋皂苷的提取分离
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料与仪器
• 2.3 提取
• 2.4 分离
• 2.4.1 大孔吸附树脂的预处理
• 2.4.2 分离流程
• 2.4.3 分离组分的定性鉴别
• 参考文献
• 第三章 皂苷对a-葡萄糖苷酶抑制作用的初步研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与仪器
• 3.3 酶活力测定方法的建立
• 3.3.1 体系反应原理
• 3.3.2 测定方法的验证
• 3.3.3 体系中DMSO对酶活力的影响
• 3.4.样品溶液的制备
• 3.5 各组分抑制活性的测定
• 3.5.1 萃取组分抑制活性的测定
• 3.5.2 D101柱层析组分抑制活性的测定
• 3.5.3 硅胶柱层析组分活性测定
• 3.6 各组分抑制活性比较
• 3.7 小结
• 参考文献
• 第四章 皂苷对非酶糖基化反应抑制作用的初步研究
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与仪器
• 4.3 非酶糖基化反应抑制剂筛选体系的建立
• 4.3.1 体系反应原理
• 4.3.2 激发与发射波长的选择
• 4.3.3 测定方法的验证
• 4.4 样品溶液的制备
• 4.5 各组分抑制活性的测定
• 4.5.1 萃取组分抑制活性的测定
• 4.5.2 D101柱层析组分抑制活性的测定
• 4.5.3 硅胶柱层析组分抑制活性的测定
• 4.6 各组分抑制活性比较
• 4.7 小结
• 参考文献
• 第五章 皂苷体外抗凝活性的初步研究
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料与仪器
• 5.2.1 实验仪器与试剂
• 5.2.2 实验动物
• 5.3 ADP诱导大鼠血小板聚集实验
• 5.4 对大鼠血浆凝血酶原时间（PT）的影响
• 5.5 对大鼠血浆活化部分凝血酶时间（APTT）的影响
• 5.6 对大鼠血浆凝血酶时间（TT）的影响
• 5.7 小结
• 参考文献
• 第六章 总结与展望
• 6.1 总结
• 6.2 展望
• 附录
• 致谢