论文摘要
第一章四株双歧杆菌对高脂饮食大鼠肥胖形成的影响目的:选取从正常人体肠道内分离出的四株双歧杆菌,分析其对高脂饮食大鼠体内血脂、血糖、脂肪移动、肠道菌群及其肥胖的影响,旨在发现同属不同株的双歧杆菌在体内对动物肥胖作用的差异,从而为筛选到有利于人体不同体重基数的功能菌株打下基础,也为特异性功能菌株的研究提供依据。方法:48只SD大鼠随机均分为6组,D组喂养普通饲料,A、B、C、F、E组喂养高脂饲料,同时给予不同双歧杆菌干预,B组（L66-5）、C组（L75-4）、E组（M13-4）、F组（FS3-1-1-2）、A组（模型组）。6w末处死大鼠,通过对大鼠的体重的变化、OGTT、Lee’s指数、内脏脂肪重量、肝指数、肝脂质测定、血清TG、TCH和INS的检测了解双歧杆菌对高脂饮食大鼠血脂、血糖及脂肪储存的整体影响,利用肝组织病理HE、SudanⅣ、PAS染色观察肝脏脂肪及糖原沉积的情况,大、小肠内容物中菌群分析情况了解肠道内菌群状态。结果:双歧杆菌干预的B、F两组体重有较明显的下降,SD大鼠的体重增加量由模型组的212.55g±18.54g分别下降至175.19g±41.24g（B组）、197.34±35.61（F组）,B、F两组的Lee’s指数及C、E、F肝指数较模型组也有明显降低（P＜0.05）。血脂的测定显示各双歧杆菌干预组均有降低TG的作用,与A组比较有统计学差异（P＜0.05）,同时B、F两组的TCH也明显下降（P＜0.05）,但对OGTT及INS的调整作用较小（P＞0.05）。病理学观察提示各双歧杆菌干预组均可不同程度的减轻肝组织脂质蓄积、脂肪变性、糖原沉积,并可使脂肪细胞增多、体积变小,以双歧杆菌L66-5及FS3-1-1-2组作用更明显。肠道菌群分析发现E组中小肠内容物中的乳酸杆菌明显减少,由A组中的7.48±3.04（lg%）下降到1.23±3.25（lg%）（P＜0.05）,而拟杆菌增多至9.02±4.02（lg%）,相比正常组的6.88±1.03（lg%）具有统计学差异。结论:（1）应用脂肪含量为25.17%,蛋白质含量为16.52%的复合高脂饲料配方连续喂养SD大鼠6w可成功造成营养性肥胖模型。（2）双歧杆菌株L66-5、FS3-1-1-2可较好的阻滞高脂饮食大鼠体重增加,同时具有降低血清TG、TCH,改善肝脏和内脏脂质沉积、增加脂肪细胞数量及减少脂肪细胞体积的作用,并可能影响肝糖原的储存,但对血糖及INS的调节作用不明显。（3）双歧杆菌株M13-4可加速高脂饮食大鼠体重增加,但对血清TG、TCH及肝脏的脂质沉积具有改善作用,而对肝糖原的储存、血糖及INS的调节作用不明显。（4）双歧杆菌株L75-4对高脂饮食大鼠体重影响不明显,但对大鼠血清TG、TCH及肝脏的脂质沉积具有改善作用,对血糖及INS的分泌无影响。第二章四株双歧杆菌干预高脂饮食大鼠肥胖机制的初步探讨目的:探讨四株双歧杆菌菌株进入机体后引发的一系列脂肪细胞内分泌功能的改变对肥胖形成及血脂的影响机制。对四种同属不同株双歧杆菌干预高脂饮食SD肥胖大鼠模型后,大鼠肝、肠、骨骼肌、脂肪组织内PPAR-α、PPAR-γ1、PPAR-γ2、TNF-α、ADIPOQ在基因蛋白水平的表达变化上作出研究。方法:第一章试验处死大鼠时,取各组SD大鼠的肝左叶、回盲部的小肠侧肠粘膜、后腿处骨骼肌、肾周及睾丸周围脂肪组织,提取各组织的总RNA及肝组织的总蛋白。应用RT-PCR方法检测SD大鼠肝、小肠、骨骼肌、脂肪组织中PPAR-α、PPAR-γ1、PPAR-γ2 mRNA及脂肪组织中TNF-α、ADIPOQ mRNA的表达水平,免疫印迹法检测肝组织中PPAR-γ的蛋白表达变化。结果:1、各双歧杆菌干预组的肝组织PPAR-αmRNA表达水平较模型组具有明显上升的趋势（P＜0.05）,肠组织中的PPAR-αmRNA仅在B、E两组中升高明显（P＜0.05）。2、肝、肠组织中的PPAR-γ1 mRNA在双歧杆菌C、E、F组表达较模型组明显升高（P＜0.05）,而在双歧杆菌B组中升高不具有统计学意义（P＞0.05）。3、PPAR-γ2 mRNA在脂肪组织中特异性表达,且各双歧杆菌干预组的脂肪组织中PPAR-γ2 mRNA表达量均高于模型组（P＜0.05）,尤以D、E两组明显,差异具有高度显著性意义（P＜0.01）。E组的肝组织中也出现了较微量的PPAR-γ2 mRNA表达。4、骨骼肌及脂肪组织中的PPAR-α、PPAR-γ1 mRNA的表达在各组之间无明显改变（P＞0.05）。5、双歧杆菌B、C、F组脂肪组织中的TNF-αmRNA表达量较模型组下降明显（P＜0.05）,E组的TNF-αmRNA表达量下降较少（P＞0.05）。6、各组SD大鼠脂肪组织中ADIPOQ mRNA表达量无明显变化（P＜0.05）。7、双歧杆菌C、E、F组的肝组织PPAR-γ蛋白表达水平较模型组具有明显上升的趋势（P＜0.05）,但双歧杆菌B组中蛋白表达水平升高不具有统计学意义（P＞0.05）。结论:（1）双歧杆菌L66-5株具有激活肝组织PPAR-α及脂肪组织PPAR-γ2并减少脂源性的TNF-α生成作用。（2）双歧杆菌FS3-1-1-2株及双歧杆菌L75-4株可增加机体内肝组织中PPAR-α、PPAR-γ1及脂肪组织PPAR-γ2的表达并减少脂肪组织TNF-α的分泌。（3）双歧杆菌M13-4株可引起高脂饮食SD大鼠体内高水平的表达PPAR-α、PPAR-γ。（4）脂联素在高脂饮食SD大鼠及双歧杆菌干预组中均无明显改变。
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