论文摘要
多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是一种源于晚期B细胞的恶性肿瘤,其特征为骨髓中单克隆浆细胞无限增生及血清或尿中出现单克隆的免疫球蛋白。由于该病的发病机理还不十分清楚,目前一直缺乏根治的有效手段。因此,深入多发性骨髓瘤的发病机理研究对其诊断和治疗将具有重要的意义。 多发性骨髓瘤细胞的增殖及凋亡受细胞因子及骨髓微环境的调节。骨髓瘤细胞本身以及骨髓微环境可以分泌多种细胞因子,尤以IL-6的过度产生与MM的关系最为密切。这些细胞因子通过自分泌或旁分泌的方式对多发性骨髓瘤细胞的增殖、凋亡以及耐药特性发生影响,这其中涉及到多种信号途径,包括JAK-Stat、PI-3K、MAPK、Rho、FAK等。除此之外,是否还有其它的信号转导途径参与?近几年研究证明细胞膜鞘磷脂的衍生物包括Cer、Sp、S1P等多种代谢产物,在调节细胞增殖和凋亡的动态平衡中起着极为关键的作用。而磷酸鞘氨醇激酶（sphingosine kinase,SPK）是维持细胞内上述物质平衡的重要限速酶,也是细胞增殖及存活的重要调控因子。但是,SPK-S1P信号在多发性骨髓瘤发病中的作用并不清楚。本研究检测了SPK-S1P信号途径相关分子在骨髓瘤细胞的表达情况;发现S1P通过上调mcl-1,进而抑制MM细胞的凋亡,并进一步证明了SPK-S1P信号介导IL-6抑制骨髓瘤细胞凋亡的生物学作用。 为了检测SPK-S1P信号通路相关分子在MM细胞的表达。我们利用免疫磁性分离的方法分离了MM病人骨髓中CD138阳性骨髓瘤细胞,利用RT-PCR和Northern Blot的方法分别检测了原代骨髓瘤细胞以及骨髓瘤细胞系中SPK及S1P受体的表达情况。研究结果表明MM原代细胞和细胞系U266、XG-7、SKO-007等都表达SPK及S1P受体EDG1、EDG3、EDG5,这提示多发性骨髓瘤细胞可能受到SPK-S1P信号的调控。为确定S1P对骨髓瘤细胞凋亡的影响,我们利用地塞米松诱导的骨髓瘤细胞系XG-7细胞的凋亡,加入外源S1P能够抑制XG-7细胞凋亡。进一步研究发现外源S1P可以上调XG-7细胞Mcl-1的表达,当用S1P受体阻断剂PTX处理XG-7细胞后,S1P对Mcl-1的上调作用受到抑制。可以得出如下结论:外源S1P可能通过上调Mcl-1的表达来抑制XG-7细胞的凋亡。细胞内S1P是由SPK催化产生,而SPK的活性受多种细胞信号的调节。为探