调节肾组织免疫微环境预防和逆转肾纤维化

论文摘要

慢性肾病导致终末肾病（ESRD）仍然是威胁公众健康的主要疾病。肾纤维化不仅是所有慢性肾病的基本病理改变,也是慢性肾病导致ESRD的主要原因。肾纤维化表现为细胞外基质过度积聚,进行性取代肾实质组织因而导致肾功能进行性降低。大量的研究表明,免疫反应在肾纤维化的形成和发展中发挥了重要作用,调节免疫反应可能是改变肾纤维化病程的重要途径。我们使用单侧输尿管结扎肾纤维化模型,分别探讨了具有免疫调节作用的真菌多糖CFX和TLR9激动剂CpG的潜在抗肾纤维化作用和机制。体外实验发现,发酵真菌多糖复合物CFX不仅活化肾小管上皮细胞TLRs,同时也有抗氧化应激反应的作用。造模前7天给予CFX（3g/kg/天）,明显预防UUO诱导的肾纤维化病变。CFX防止UUO所致肾纤维化的作用与其抑制UUO引起的炎症反应、减轻UUO肾脏的氧化应激损伤、降低成纤维细胞的活化、减少促纤维化细胞因子的分泌、阻断TGF-β1/Smad3、TAK及p38信号通路以及抑制凋亡信号的活化等相关。我们的研究证明CFX对已形成的肾纤维化也有显著抑制作用。UUO后第4天以不同剂量的CFX（3g/kg或1g/kg）治疗动物至UUO后14天,CFX上调脾脏组织Th1/Th2比值；治疗至UU021天时,CFX明显减少CD206+M2型巨噬细胞数量。CFX降低肾脏促纤维化和抑制性细胞因子TGF-β1的表达,降低其信号分子Smad3的表达及活性,增加IFN-γ/TGF-β1表达比值；抑制抑制性信号分子Stat3的表达。CFX的抗纤维化作用还与其调节多种炎症信号包括MAPKs及NF-KB活性相关。在第二部分工作中,使用同样的肾纤维化动物模型,我们研究了TLR9配基CpG对UUO诱导的肾纤维化病变的作用。我们发现造模前给予刺激Thl免疫反应的CpG显著降低受损肾脏组织的巨噬细胞浸润,显著抑制肾组织表达的促纤维化细胞因子TGF-β1和PAI-1,抑制Th2型细胞因子IL-13的表达,明显减轻肾纤维化病变程度。即使在形成确定的纤维化病变后再给予CpG也能显著逆转UUO诱导的肾纤维化病变。TLR9配基CpG逆转UUO诱导的肾纤维化病变与其调节组织免疫微环境作用相关：UUO诱导肾纤维化主要是由于它导致肾脏组织形成抑制性Th2和M2细胞免疫微环境,CpG显著抑制肾组织Th2细胞因子表达,降低抑制性信号分子Stat3的表达,调节与Th1/Th2平衡相关的MAPK信号表达。我们的研究表明,使用免疫激动剂改变纤维化组织免疫微环境是防治组织纤维化的新途径和方法,具有免疫刺激作用的CFX和TLR9激动剂具有极大潜力开发成为逆转肾纤维化、防治慢性肾病,特别是ESRD的药物。

论文目录

• 缩略词表（Abbreviation）
• 摘要
• Abstract
• 综述 肾纤维化的发病机制研究进展
• 参考文献
• 第一部分 真菌多糖CFX预防单侧输尿管结扎诱导的小鼠肾纤维化
• 摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 1.CFX活化体外培养的肾小管上皮细胞
• 2.CFX阻断H2O2诱导的肾小管上皮细胞氧化应激反应
• 3.CFX预防UUO诱导的肾纤维化
• 4.CFX调节肾脏组织免疫微环境
• 5.CFX抑制肾组织氧化应激反应
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 真菌多糖CFX逆转单侧输尿管结扎诱导的小鼠肾纤维化
• 摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 1.UUO诱导时间依赖性地肾纤维化病变
• 2.CFX逆转确立的肾纤维化
• 3.CFX抑制肾纤维化作用导致肾功能改善
• 4.CFX逆转肾纤维化组织的免疫抑制微环境
• 讨论
• 参考文献
• 第三部分 TLR9激动剂CpG预防和逆转UUO诱导的肾纤维化
• 摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 1.CpG抑制体外培养的巨噬细胞分泌M2细胞因子及IL-17
• 2.CpG预防UUO诱导的肾纤维化
• 3.CpG降低炎症反应,调节肾纤维时抑制性免疫微环境
• 4.CpG逆转已形成的肾纤维化
• 5.CpG逆转肾纤维化是由于逆转抑制性免疫微环境
• 讨论
• 参考文献
• 个人简历
• 致谢