论文摘要
1研究背景食管癌（Esophageal cancer,EC），特别是食管鳞状细胞癌，是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一，具有显著的地域性分布差异，高低发区发病率可相差500倍。河南省林州市（原林县）及毗邻的安阳、辉县等地是世界上食管癌发病率和死亡率最高的地区之一。食管癌在中老年人（≥150岁）最常见。但是，近年发现该地区青年（≤40岁）食管癌并不罕见，其发生率占食管癌患者的3-5％，且发病有增高趋势。与中老年食管癌患者相比，青年食管癌患者癌细胞分化差，易发生浸润性生长和早期血管转移，5年生存率低，预后极差，但有关青年食管癌变的分子变化特征的了解甚少。但值得提出的是，贲门癌（Gastric cardia adenoearcinoma,GCA）也是该地区最常见的恶性肿瘤之一，其中青年贲门癌发生率占贲门癌患者的1-3％。贲门癌显著的流行病学特征是其与食管癌地域性分布的一致性，以及其与胃远侧部位肿瘤的不一致性，有关该地区青年贲门癌变的分子变化研究报道甚少。比较基因组杂交（comparative genomic hybridization，CGH）是一种将原位荧光杂交技术与数字图像分析相结合，用于检测肿瘤组织DNA异常（缺失、扩增、复制）的细胞遗传学技术。利用CGH技术还可获得相应的癌基因扩增或抑癌基因丢失的信息。最近本实验室及其他实验室的研究表明DNA拷贝数变化在食管和贲门癌中频繁发生，但有关青年食管贲门癌的CGH变化特征却未见报道。本研究利用CGH技术，检测青年食管癌和贲门癌基因DNA拷贝数的增加（gain）和丢失（loss）的变化特征和规律，并与该地区中老年CGH结果比较，寻找和定位与青年食管癌和青年贲门癌变相关的基因。2研究对象和方法46例食管癌病人和24例贲门癌病人均来自林州市中心医院和姚村食管癌医院。46例食管癌中，青年食管癌10例（男7例，女3例，平均年龄为39±1岁）；中年食管癌16例（男9例，女7例，平均年龄岁55±4岁），老年食管癌20例（男9例，女11例，平均年龄64±2岁）。24例贲门中，青年贲门癌9例（男3例，女6例，平均年龄为37±2岁）；中年贲门癌患者10例（男8例，女2例，平均年龄54±5岁）；老年贲门癌患者5例（男3例，女2例，平均年龄67±4岁）。所有患者术前均未接受放疗和化疗。术中切除的标本迅速放入液氮中，之后储存于-80℃冰箱中备用。所有标本均经过病理证实。采用比较基因组杂交技术对青中老年食管和贲门癌基因组DNA拷贝数变化进行分析，并将青年组和中老年组结果进行比较。统计学分析采用X2检验，显著性水准α定为0.05。3结果3．1青年食管癌和贲门癌的CGH改变食管癌：食管癌组织发生DNA拷贝数增加较高部位为染色体3q，5p，7p（4/10，40％），其次为5q和8q（3/10，30％），而12p，13q，20p发生的频率非常相似，均为20％，青年食管癌组织发生DNA丢失较高部位是染色体16q（5/10，50％），其它依次为22q（4/10，40％），3p，4p，4q和16p（3/10，30％）。贲门癌：青年贲门癌组织发生DNA拷贝数增加较高部位是12p，12q，13q，19q（4/9，44％），其次为5p（3/9，33％），再次为5q，3q，8q，15q，19p（2/9，22％）。青年贲门癌组织发生DNA丢失较高部位是10q（5/9，56％），其次为4q（4/9，44％），4p，10p，14q，20q（3/9，33％），7q，18q，20p（2/9，22％）。3．2中老年食管癌CGH改变食管癌：41—59岁的中年食管癌患者扩增频率较高部位依次是8q（12/16，75％），3q（11/16，69％），7q（9/16，56％），5p，7p（8/16，50％）；丢失频率较高部位依次为3p（9/16，56％），8p，13p，13q（7/16，44％），9q（6/16，38％），9p（5/16，31％）。大于60岁的老年食管癌患者扩增频率部位从高到低依次为：8q（15/20，75％），3q（13/20，65％），5p（10/20，50％），1q（9/20，45％）；丢失频率从高到低依次为3p（12/20，60％），5q，11q（8/20，40％），4p，9q，1p（7/20，35％）。贲门癌：41—59岁的中年贲门癌患者扩增频率较高部位依次是8q（7/10，70％），3q，20q（5/10，50％），7p，7q，20p（4/10，40％），2q，8p（3/10，30％），2p，5p（2/10，20％）；丢失频率较高部位依次是1p和19p（6/10，60％），17p（4/10，40％），17q，19q（3/10，30％）。大于60岁的老年贲门癌患者扩增频率较高部位依次是：1q，6q（3/5，60％），1p，6p，12q，18p，18q，20p，20q（2/5，40％）；丢失频率较高部位依次是：17p，19p，19q（3/5，60％），1p，4p，6p，16p，17q（2/5，40％）。3．3青中老年食管癌和贲门癌CGH改变食管癌：青年食管癌和中老年食管癌的常见扩增部位比较相似，都有3q，5p，8q；但丢失部位却不太一致，青年食管癌丢失频率较高部位是16q和22q，而中年食管癌常见丢失部位为3p，8p，13p，13q；老年食管癌丢失频率最高部位均为3p，5q和11q。贲门癌：青年食管癌CGH结果与中老年组不同。青年贲门癌常见扩增部位是12p，12q，13q，19q，而中年贲门癌较常见扩增部位分别为8q，3q，20q；老年贲门癌常见扩增部位是1q，6q。青年贲门癌常见丢失部位为10q，4q，而中年和老年贲门癌分别为1p，19p和17p，19p，19q。食管癌和贲门癌：青年食管癌和青年贲门癌的染色体改变不完全相同：青年食管癌常见扩增和丢失部位分别为3q，5p，7p和16q，22q；但青年贲门癌常见扩增和丢失部位分别为12p，12q，13q，19q和10q，4q。中老年食管和贲门癌染色体改变不完全相同：中老年食管癌患者中常见扩增和丢失部位分别为8q，5p，3q和3p。但中年和老年贲门癌患者常见丢失部位为8q，3q，20q，7p，7q，20p和1q，6q。中老年贲门癌常见丢失部位为1p，19p，17p和17p，19p，19q。4结论4．1 3q，5p，7p部位可能含有与青年食管癌相关的癌基因；16q，22q可能含有与青年食管癌相关的抑癌基因。4．2 12p，12q，13q，19q可能含有青年贲门癌癌基因，10q和4q可能含有与青年贲门癌相关的抑癌基因。4．3 8q，3q，5p部位可能含有与中老年食管癌相关的癌基因，3p可能含有与中老年食管癌相关的抑癌基因。4．4 8q，3q，20q，7p，7q，20可能含有与中年贲门癌相关的癌基因，1q，6q可能含有与老年贲门癌相关的癌基因；1p，19p，17可能含有与中年贲门癌相关的抑癌基因，1q，6q可能含有与老年贲门癌相关的抑癌基因。4．5青年与中老年贲门癌常见扩增部位不同，提示不同年龄段的贲门癌可能具有不同的癌基因。青年食管和贲门癌常见丢失部位不同，提示不同年龄段的食管和贲门癌可能含有不同的抑癌基因，为食管和贲门癌的发生提供了线索。4．6青中老年食管和贲门癌常见的扩增和丢失部位不同，提示食管和贲门癌可能含有不同的癌基因和抑癌基因，食管和贲门癌可能有不同的发病机制。