论文摘要
B-呋喃果糖苷酶广泛地存在于生物界，不同微生物来源的B-呋喃果糖苷酶的性质不同。黑曲霉、节杆菌、米曲霉等微生物能够产生β-呋喃果糖苷酶，其分子由1～8个亚基所构成，相对分子质量为11 000～409 000D，其作用机理是将蔗糖的葡萄糖基与果糖基的B-（1? 4）糖苷键断裂，生成果糖与葡萄糖。果糖在酶的作用下进一步聚合成功能性低聚糖。大豆低聚糖中功能性因子（棉子糖、水苏糖）与非功能性因子（蔗糖）共存。目前我国生产的大豆低聚糖产品中功能性低聚糖的含量较低（30～40％）。本研究的目的在于用B-呋喃果糖苷酶作用于大豆低聚糖，通过酶改性将其中非功能性蔗糖转化为功能性低聚糖，增加大豆低聚糖中功能因子的含量，提高大豆低聚糖的功能性。本研究从一株节杆菌（Arthrobacter sp．10137）和一株黑曲霉（Aspergillus niger 3.795）中筛选出高产B-呋喃果糖苷酶的菌株Aspergillus niger 3.795，并确定了该菌株的最佳培养条件为温度28℃，时间66～72h，振荡速度为150转／分，培养基初始pH值为6.0。最佳培养基成分为：玉米糖化液10Bx、蔗糖3％、蛋白胨0.35％、硫酸镁0.034％、氯化铁0.034％；采用乙醇法浓缩B-呋喃果糖苷酶的粗酶液，浓缩倍数为2.5倍。β-呋哺果糖苷酶的特性是：（1）在温度=40℃时，B-呋喃果糖苷酶稳定；（2）B-呋喃果糖苷酶在pH值5～7范围内稳定；（3）Ag+对酶有较强的抑制作用，Mg2+、Zn2+对酶有激活作用，其它金属离子基本上对酶的活力没有较明显的影响；（4）采用二次旋转正交回归设计优化B-呋喃果糖苷酶作用大豆低聚糖的工艺参数，确定了最佳工艺参数条件为酶解温度为31.5℃、酶反应体系pH值为6～7、酶用量1.8g、酶作用时间为1.5h。产品中低聚糖的含量由原来的30.98％提高到48.6％。