论文题目: 体外代谢用于中药活性成分筛选的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 分析化学
导师: 邹汉法
关键词: 中药活性成分,体外代谢,大鼠肝匀浆,指纹谱分析
文献来源: 中国科学院研究生院（大连化学物理研究所）
发表年度: 2005
论文摘要: 中药现代化面临的主要问题是物质结构的鉴定、有效成分筛选以及中药药理的建立。现代药物筛选手段并不适用于多成分、多靶点、组合药效的中药活性成分筛选,因此针对中药的筛选新方法不断出现。本文对近年来的中药筛选方法进行了较全面的综述,这些方法多注重相互作用而忽略体内过程。针对中药特点和目前新药(西药)的发展思路,本论文建立了动物肝匀浆中药体外代谢方法,并以此为平台结合体外药理试验,采用HPLC-MS 等分析手段将中药成分代谢指纹谱与活性试验有机结合起来用于中药活性成分筛选。建立了SD 大鼠肝匀浆体外代谢方法,通过考察非那西丁在肝匀浆中的代谢,初步验证了本实验所采用的全肝匀浆体外代谢方法的可靠性。在此基础上,以单味中药黄柏等为样品,采用HPLC 辅以MALDI-TOF-MS 对代谢前后的指纹谱差异与相似性进行比较,进而验证本实验采用的代谢平台用于中药代谢与筛选的可行性。以体外代谢为平台,对单味中药丹参、大黄及其主要活性成分进行体外代谢,结合抑菌、血凝、抗肿瘤体外试验测定提取物及其代谢物、主要成分的活性。从代谢的角度解释了丹参、大黄的抗菌、血凝、抗肿瘤活性在代谢前后变化的原因,并筛选出其中活性成分。以体外代谢平台结合体外抗肿瘤实验在中药川芎的活性成分中筛选出一种具有抗肿瘤活性的的化合物——阿魏酸松柏酯,同时鉴定了它的代谢产物。阿魏酸松柏酯显示出较好的抑制Hela 细胞的活性,而其代谢产物则没有活性,从而解释了粗提物在代谢前后抗肿瘤活性变化的原因。
论文目录:
第一章 文献综述
1.1 引言
1.2.1 经典的动物筛选方法
1.2.1.1 动物筛选模型
1.2.1.2 转基因动物筛选模型
1.2.2 体外药物筛选方法
1.2.2.1 体外组织器官水平的筛选模型
1.2.2.2 细胞水平筛选模型
1.2.2.3 分子水平筛选模型
1.2.2.4 药理学筛选
1.3 药物代谢与中药筛选
1.3.1 药物代谢
1.3.2 药物代谢反应的特点
1.3.3 药物代谢反应类型
1.3.4 药物代谢的研究方法
1.3.5 药物代谢与新药研究
1.3.6 药物代谢与中药活性成分的筛选
参考文献
第二章 大鼠肝匀浆体外代谢平台的建立
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 原理
2.2.2 试剂与材料
2.2.3 仪器设备
2.2.4 样品与溶液的配制
2.2.5 大鼠肝匀浆的制备
2.2.6 肝匀浆的温孵
2.2.7 代谢产物的分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 体外肝代谢体系的选择
2.3.2 采用非那西丁评价大鼠肝匀浆体外代谢方法
2.4 小结
参考文献
第三章 中药体外代谢指纹谱分析
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 试剂与材料
3.2.2 仪器设备
3.2.3 单味中药样品的制备
3.2.4 大鼠肝匀浆的制备
3.2.5 肝匀浆的温孵
3.2.6 代谢后的中药样品的制备
3.2.7 单味中药代谢前后的分析
3.3 结果与讨论
3.3.1 黄柏的体外代谢指纹谱分析
3.3.2 当归的体外代谢指纹谱分析
3.3.3 苦参的体外代谢指纹谱分析
3.4 小结
参考文献
第四章 肝匀浆体外代谢用于丹参活性成分筛选的研究
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 试剂与材料
4.2.2 仪器设备
4.2.3 单味中药样品的制备
4.2.4 大鼠肝匀浆的制备
4.2.5 丹参样品在肝匀浆的温孵
4.2.6 代谢后的丹参样品的制备
4.2.7 丹参样品代谢前后的分析
4.2.8 丹参新酮的制备
4.2.9 丹参乙醇提取物及其代谢物、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的抑菌试验
4.2.10 丹参乙醇提取物与其代谢物、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 的血凝集活性试验
4.3 结果与讨论
4.3.1 丹参的体外代谢指纹谱分析
4.3.2 丹参中成分丹参新酮的鉴定及其在肝匀浆体系中的变化
4.3.3 丹参中主要活性成分的SD 大鼠肝匀浆体外代谢
4.3.4 丹参乙醇提取物与其代谢物、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的抗菌活性
4.3.5 丹参乙醇提取物与其代谢物、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的血凝集活性
4.4 小结
参考文献
第五章 肝匀浆体外代谢用于大黄活性成分筛选的研究
5.1 引言
5.2 实验部分
5.2.1 试剂与材料
5.2.2 仪器设备
5.2.3 单味中药样品的制备
5.2.4 大鼠肝匀浆的制备
5.2.5 大黄样品在肝匀浆的温孵
5.2.6 代谢后的大黄样品的制备
5.2.7 大黄样品代谢前后的分析
5.2.8 大黄酸与大黄素的制备
5.2.9 大黄乙醇提取物及其代谢物、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的抑菌试验
5.2.10 大黄乙醇提取物及其代谢物、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的抗肿瘤活性试验
5.3 结果与讨论
5.3.1 大黄的体外代谢指纹谱分析
5.3.2 大黄中主要游离型蒽醌类成分的鉴定与其在SD 大鼠肝匀浆中的变化
5.3.3 大黄酚在SD 大鼠肝匀浆中体外代谢特性的考察
5.3.4 大黄蒽醌类提取物与其代谢物、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的抗菌活性
5.3.5 大黄蒽醌类提取物与其代谢物、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的抗肿瘤细胞活性
5.4 小结
参考文献
第六章 中药川芎中一种抗肿瘤成分的体外代谢研究
6.1 引言
6.2 实验部分
6.2.1 试剂与材料
6.2.2 仪器设备
6.2.3 川芎样品的分析
6.2.4 单味中药川芎样品的制备
6.2.5 阿魏酸松柏酯的制备
6.2.6 大鼠肝匀浆的制备
6.2.7 川芎样品在肝匀浆的温孵
6.2.8 阿魏酸松柏酯的代谢产物的制备
6.2.9 川芎提取物及其代谢物、阿魏酸松柏酯及其代谢物的抗肿瘤活性试验
6.3 结果与讨论
6.3.1 阿魏酸松柏酯的鉴定
6.3.2 阿魏酸松柏酯代谢产物的鉴定
6.3.3 川芎中阿魏酸松柏酯的定量分析
6.3.4 阿魏酸松柏酯的体外肝匀浆代谢
6.3.5 阿魏酸松柏酯及其代谢物的抗肿瘤活性
6.4 小结
参考文献
作者简介及发表文章
致谢
发布时间: 2005-10-15
参考文献
- [1].中药活性成分与血清蛋白的相互作用及其对药物结合影响的研究[D]. 周能.中南大学2007
- [2].中药活性成分的LC/CE-IT-MS分析新方法研究[D]. 陈琴华.武汉大学2012
- [3].滋阴中药活性成分对神经退行性疾病的神经保护作用及机制研究[D]. 李加梅.上海交通大学2015
- [4].中药活性成分姜黄素和川芎嗪作用于肝星状细胞的抗肝纤维化机理研究[D]. 张峰.南京中医药大学2013