甘菊耐盐性分析及DlBADH基因启动子转化菊花试验

论文摘要

甘菊[Chrysanthemum lavandulifolium （Fisch. ex Trautv.） Makino]是菊属中的二倍体植物,遗传背景简单,对其进行耐盐机理的研究可以为菊花（C. xmorifolium Ramat.）抗逆性育种奠定理论基础。通过研究,作者主要取得了如下成果：1.通过对甘菊进行栽培试验研究,建立了适宜的甘菊水培技术体系。研究结果表明,水培试验中宜选取一年生、幼嫩的植株,插条和剪根的植株不适合以水培方式栽培；参照Hoagland-arnon配方配制营养液,每隔两天更换一次,可使植株正常生长；营养液的深度低于根颈部位适宜植株在水培条件下生长。2.利用100-400mmol/L NaCl溶液处理甘菊植株0-12d,在不同浓度和时间长度的胁迫下,测定各项生理生化指标,分析其耐盐性。结果表明：甘菊在一定范围内的盐胁迫下,通过调节叶绿素含量、过氧化氢酶含量和丙二醛含量途径来抵御胁迫伤害；质膜透性、过氧化氢酶含量、丙二醛含量可作为甘菊耐盐性的鉴定指标,叶绿素含量则可以作为甘菊耐盐性的参考指标；NaCl溶液浓度为100-200mmol/L,处理时间为1d和3d时,各项生理指标均发生明显变化,可以作为诱导甘菊耐盐基因表达的参考条件。3.本文作者还尝试了将耐盐相关基因DIBADH基因的启动子导入菊花（C. xmorifolium Ramat.）中。试验发现,适宜的潮霉素筛选压浓度为7.5mg/L,通过试验初步建立了菊花品种‘粉荷’的转化体系,获得了潮霉素抗性苗。上述研究数据,为甘菊盐诱导表达基因的开发利用奠定了试验基础。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 植物耐盐机理研究进展
• 1.1.1 盐胁迫对植物的影响
• 1.1.2 植物的耐盐机制
• 1.1.3 测定植物耐盐性的相关指标
• 1.1.4 观赏植物耐盐性研究进展
• 1.2 植物基因启动子的研究与应用
• 1.2.1 植物基因启动子的研究方法
• 1.2.2 植物基因启动子的分类与应用
• 1.3 本文的研究内容
• 1.3.1 目的意义
• 1.3.2 主要内容
• 1.3.3 技术路线
• 2 甘菊水培技术的探索
• 2.1 试验背景和目的意义
• 2.1.1 甘菊栽培技术的研究现状
• 2.1.2 试验目的
• 2.2 试验材料和方法
• 2.2.1 植物材料
• 2.2.2 试剂和器材
• 2.2.3 试验方法
• 2.3 试验结果
• 2.3.1 营养液深度对水培生根的影响
• 2.3.2 剪根处理的影响
• 2.3.3 不同年龄的植株水培状况
• 2.3.4 植株不同生长时期的水培状况
• 2.3.5 甘菊茎尖插条水培结果
• 2.4 小结与讨论
• 2.4.1 小结
• 2.4.2 讨论
• 3 甘菊耐盐性分析
• 3.1 材料和仪器
• 3.1.1 植物材料
• 3.1.2 仪器设备
• 3.2 生理生化指标检测方法
• 3.2.1 叶绿素含量的测定方法
• 3.2.2 质膜透性的测定方法
• 3.2.3 过氧化氢酶活性的测定方法
• 3.2.4 丙二醛含量的测定方法
• 3.3 试验结果
• 3.3.1 盐胁迫下甘菊的形态变化
• 3.3.2 盐胁迫下甘菊叶片中叶绿素含量的变化
• 3.3.3 盐胁迫下甘菊叶片中质膜透性的变化
• 3.3.4 盐胁迫下甘菊叶片中过氧化氢酶含量的变化
• 3.3.5 盐胁迫下甘菊叶片中丙二醛含量的变化
• 3.4 分析与讨论
• 3.4.1 甘菊的耐盐性评价
• 3.4.2 NaCl胁迫下甘菊的耐盐机理
• 3.4.3 诱导甘菊耐盐相关基因的盐胁迫参考条件
• 3.5 小结
• 4 DlBADH基因启动子转化菊花的初步研究
• 4.1 试验材料
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 菊花‘粉荷’的叶片再生
• 4.2.2 转基因菊花的潮霉素抗性筛选压的确定
• 4.2.3 农杆菌叶盘法侵染菊花叶片
• 4.3 试验结果
• 4.3.1 菊花‘粉荷’再生体系的建立
• 4.3.2 潮霉素抗性筛选压的确定
• 4.3.3 农杆菌叶盘法转化菊花叶片
• 4.4 讨论
• 4.4.1 农杆菌介导转化菊花中选择压的确定
• 4.4.2 菊花转基因育种研究
• 5 结论
• 参考文献
• 附录:缩略词中英文名称对照
• 个人简介
• 导师简介
• 获得成果目录
• 致谢