Apelin促大鼠血管平滑肌细胞增殖的PI3K/Akt信号通路研究

论文摘要

目的:研究G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽apelin-13是否通过PI3K/Akt信号通路促进血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的生长增殖，发现apelin-APJ系统促血管平滑肌细胞增殖的新的信号转导机制。方法:培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，噻唑蓝比色法（MTT）观察PI3K抑制剂LY294002和Akt抑制剂1701-1对apelin-13促VSMCs增殖的影响；Western blot检测PI3K、pPI3K、pAkt、pERK1/2、ERK1/2、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）等的表达。结果: MTT法显示PI3K抑制剂LY294002和Akt抑制剂1701-1能明显抑制apelin-13诱导的VSMCs增殖;Western blot检测结果显示，apelin-13（0、0.5、1、2、4μmol/L）刺激大鼠血管平滑肌细胞pPI3K、pAkt表达增加，以1μM最为明显；1μM apelin-13分别刺激大鼠VSMCs0、5、15、30、45、60min，pPI3K、pAkt表达增加，在30min时最为明显; PI3K阻断剂LY294002明显抑制apelin-13诱导的PI3K、Akt、ERK1/2的磷酸化及cyclinD1的表达，Akt阻断剂1701-1明显抑制apelin-13诱导的Akt、ERK1/2的磷酸化及cyclinD1的表达。结论: Apelin-13通过PI3K/Akt信号转导通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖。

论文目录

• 主要英文缩略语索引
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 实验材料
• 一 、实验动物
• 二、主要试剂
• 三、主要仪器
• 实验方法
• 1.大鼠血管平滑肌细胞的培养
• 2.MTT比色法检测PI3K抑制剂LY294002和Akt抑制剂1701-1对apelin-13促VSMCs增殖的影响
• 3. Western Blotting检测不同因素处理后VSMCs中PI3K、pPI3K、pAkt、ERK1/2、pERK1/2、CyclinD1的表达
• 4、统计处理
• 实验结果
• 1.大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的形态
• 2. PI3K抑制剂LY294002对apelin-13诱导的VSMCs增殖的影响
• 3.Akt抑制剂1701-1对apelin-13诱导的VSMCs增殖的影响
• 4. Apelin－13对VSMCs PI3K/Akt信号转导机制的影响
• 讨论
• 结论
• 参考文献