论文摘要
目的:用不同浓度的肌醇六磷酸（Inositol Hexaphosphate,IP6）作用于人结肠癌细胞系HT-29,观察IP6对癌细胞增殖的影响并进行作用机制研究,为研究IP6的抗癌作用提供理论依据。 方法:将不同浓度的IP6（0mM、1.8mM、3.3mM、5.0mM、8.0mM、13.0mM）作用于HT-29细胞,分别进行如下研究: （1）通过四甲基偶氮唑蓝实验（MTT法）分别观察IP6持续作用与间断作用对癌细胞增殖的影响; （2）应用免疫细胞化学方法检测细胞增殖相关蛋白P53、细胞周期抑制蛋白p21、增殖细胞核抗原PCNA的表达; （3）应用RT-PCR法检测细胞癌基因mdm2的表达情况。 结果:1 IP6持续作用实验表明,各浓度组与对照组（0.0mM）相比,OD值均显著降低（P<0.05）;同一时间点,随IP6浓度的增高,OD值降低（P<0.05）;随作用时间延长,有2个浓度组（8.0mM、13.0mM）在第6天的OD值与第0天相比明显降低（P<0.05）。显示IP6持续作用对结肠癌细胞系的生长具有抑制作用,并且这种抑制作用具有浓度依赖关系和时间依赖关系。IP6间断作用实验表明,随作用时间的延长,IP6对细胞增殖抑制作用逐渐明显,但作用效果较持续作用效果弱,这也说明IP6的抑制作用具有时间依赖关系。 2 免疫细胞化学实验结果表明,与对照组相比,不同浓度的IP6均可抑制P53蛋白的异常表达（P<0.05）,促进P21蛋白的表达,对PCNA的表达有明显的抑制作用（P<0.05）。 3 RT-PCR实验结果表明,与对照组相比,3.3mM、5.0mM、8.0mM浓度组mdm2 mRNA表达降低（P<0.05）。 结论:IP6对HT-29细胞的生长具有抑制作用,并且这种抑制作用具有浓度依赖关系和时间依赖关系。其抑制细胞生长的作用机制可能有以下几方面:IP6下调癌基因mdm2,降低p53基因的异常表达,上调细胞周期抑制蛋白P21的表达,使细胞周期发生阻滞,降低DNA聚合酶辅酶PCNA的表达,从而减少DNA合成,抑制癌细胞的增殖。
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