论文摘要
【目的】运用新西兰大白兔制作心肌缺血再灌注损伤模型,观察促红细胞生成素对缺血再灌注损伤兔心肌细胞凋亡及凋亡关键蛋白酶Caspase-3蛋白表达的影响,探讨促红细胞生成素对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制,为其在临床合理应用提供理论依据。【方法】新西兰大白兔16只,雄性,体重2.0±0.2kg,随机分为2组:①缺血再灌注损伤组（I/R组,对照组）②促红细胞生成素组（EPO组,药物组）。结扎兔左冠状动脉前降支60分钟、再灌注180分钟,制备兔心肌缺血再灌注损伤模型。EPO组于结扎左冠状动脉前降支的同时,耳缘静脉注入重组人促红细胞生成素（recombinant human EPO,rhEPO）1000 U/kg,对照组注入等量的生理盐水。1、分别于缺血前、缺血60分钟、再灌注60分钟和再灌注180分钟取颈静脉血2ml,分离血清,应用全自动生化分析仪检测CK-MB的浓度。2、再灌注180分钟时取缺血区心肌组织,进行相应的固定处理,制作石蜡切片。3、采用免疫组织化学方法检测缺血区心肌细胞的凋亡指数以及凋亡关键蛋白酶Caspase-3的表达水平。4、制作光镜和电镜标本,观察心肌组织的大体形态结构和超微组织结构。【结果】血清CK-MB浓度随缺血及再灌注时间的延长而增加（P＜0.01）;缺血前EPO组与I/R组血清CK-MB浓度无显著差异（P＞0.05）;缺血60分钟、再灌注60分钟、再灌注180分钟时,EPO组血清CK-MB浓度均显著低于I/R组（P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01）。与I/R组相比,EPO组的缺血区心肌细胞的凋亡指数显著下降（P＜0.01）,凋亡关键蛋白酶Caspase-3的表达水平亦显著下降（P＜0.01）。EPO组心肌组织细胞大体形态结构及超微组织结构损伤均较I/R组减轻。【结论】1、EPO对兔缺血再灌注心肌具有明显的保护作用,其机制与稳定心肌细胞膜结构,减少心肌酶的释放和抑制心肌细胞凋亡有关。2、心肌I/R损伤诱导心肌细胞凋亡,EPO能抑制心肌细胞凋亡,并伴随凋亡关键蛋白酶Caspase-3蛋白表达水平的下降,提示EPO可能通过抑制Caspase-3蛋白的表达,发挥其抗心肌细胞凋亡的作用。
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