Daintain/AIF-1对乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7生理功能的影响

论文摘要

Daintain最初由猪小肠中分离出来,AIF-1 （allograft inflammatory factor-1, AIF-1）是从人心脏异体移植排斥反应中克隆出来的,序列比对表明二者高度一致,因此称为daintain/AIF-1。Daintain/AIF-1全长146个氨基酸,包含一个EF手性结构域,是一种钙结合蛋白和脚手架蛋白。Daintain/AIF-1分布于在多种组织,包括肝脏、神经系统、脾脏和肺脏等。该蛋白参与了免疫应答、血糖调节等生理过程和心血管疾病与自身免疫性疾病等病理过程,并与细胞增殖和迁移相关。但是肿瘤微环境中的Daintain/AIF-1对肿瘤细胞的影响未见报道。为了探索肿瘤炎症微环境中Daintain/AIF-1的生物学功能,我们制备巨噬细胞条件培养基培养乳腺癌细胞,以模拟体内的肿瘤炎症微环境,然后检测对乳腺癌细胞迁移能力的影响。此外,我们还通过转染表达载体,研究Daintain/AIF-1过表达后对乳腺细胞的直接影响,如药物敏感性的改变,细胞粘附能力的改变。本研究完成的工作主要包括以下几个方面：（1）构建了稳定表达Daintain/AIF-1的乳腺癌细胞系MDA-MB-231, MCF-7。（2）构建了siRNA干扰Daintain/AIF-1表达的巨噬细胞系U937。（3）通过巨噬细胞条件培养基刺激乳腺癌细胞,发现Daintain/AIF-1可以激活乳腺癌中的p38MAPK信号通路,上调TNF-α表达,从而促进乳腺癌细胞MDA-MB-231, MCF-7迁移。（4）乳腺癌细胞中Daintain/AIF-1表达上调后,削弱了乳腺癌细胞对抗肿瘤药物阿霉素和顺铂的药物敏感性。（5）乳腺癌细胞中Daintain/AIF-1表达上调后,上调了14-3-3ξ蛋白的表达,降低乳腺癌细胞MCF-7的细胞粘附能力。这些结果暗示着Daintain/AIF-1可能从多种途径参与了乳腺癌的病理过程。

论文目录

• Abstract
• 摘要
• 1 绪论
• 1.1 巨噬细胞
• 1.2 肿瘤相关的巨噬细胞
• 1.3 肿瘤坏死因子
• 1.4 肿瘤微环境与肿瘤
• 1.5 Daintain/AIF-1研究进展
• 1.6 乳腺癌
• 1.7 本研究的意义
• 2 Daintain/AIF-1对乳腺癌细胞迁移的影响及机理研究
• 2.1 实验材料和仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 3 乳腺癌细胞中Daintian/AIF-1过表达后 对细胞粘附性的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 4 DaintainAIF-1对乳腺癌细胞抗肿瘤药物敏感性的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 5 全文总结
• 5.1 主要研究结果
• 5.2 本文的特色和创新之处
• 5.3 有待继续开展的工作
• 致谢
• 参考文献
• 附录1 攻读博士学位期间发表的论文
• 附录2 文中所用缩写对照表
• 附录3 常用氨基酸缩写表