检测大肠杆菌论文-楼秋雯,陈为为,黄志广,安紫珲,朱振洪

检测大肠杆菌论文-楼秋雯,陈为为,黄志广,安紫珲,朱振洪

导读:本文包含了检测大肠杆菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:水质,大肠杆菌,荧光定量PCR,检测方法

检测大肠杆菌论文文献综述

楼秋雯,陈为为,黄志广,安紫珲,朱振洪[1](2019)在《水质中大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用》一文中研究指出[目的]建立迅速、特异的水质中大肠杆菌群荧光定量PCR检测方法。[方法]根据Genbank中大肠杆菌保守的uida基因序列,设计特异性引物,扩增并构建重组质粒作为标准品。同时设计荧光定量PCR引物,优化荧光定量PCR定量反应体系,建立水质中大肠杆菌的绝对定量方法。[结果]成功地构建了含uida基因的重组质粒,利用标准质粒为参照,分别对不同来源的水质进行检测,成功检出每微升水质中大肠杆菌的基因拷贝数,且方法具有特异性好、重复性高的特点。[结论]初步建立水质中大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法,可为饮用水中大肠杆菌迅速检测,包括污染源头诊断的标准方法的确立提供依据。(本文来源于《科技创新与应用》期刊2019年35期)

郑晓风,刘英玉,姚刚[2](2019)在《食源大肠杆菌和沙门氏菌检测效果评价》一文中研究指出[目的]食源大肠杆菌与沙门氏菌是世界卫生组织列出的主要的食源性致病菌,频繁引起国内外食源性疾病暴发,能研究一种快速、便捷并可实现同时检测食品中大肠杆菌和沙门氏菌的方法,是保证食品安全的关键环节之一。本文对自主研发的大肠杆菌与沙门氏菌纸基微流控联合检测试纸(E.coli+S.en-μPADs)(ZL201720205440.X)临床应用准确性和便捷性进行效果评估。[方法]采集超市冷鲜肉和市场散称肉,用E.coli+S.en-μPADs进行检测,并与大肠杆菌和沙门氏菌检测国标(GB 4789.3—2016;GB4789.4—2016)进行比对。[结果]E.coli+S.en-μPADs特异性100%,大肠杆菌检测限:6×10~6CFU/mL,沙门菌检测限:9×10~3CFU/mL。增菌培养到报告结果用时7h。E.coli+S.en-μPADs和GB 4789.3—2016、GB 4789.4—2016可都对样品完成检测,对超市冷鲜肉检测,二者大肠杆菌符合率为100%,沙门氏菌的符合率为95%;对市场散称肉检测,二者大肠杆菌的符合率为100%,沙门氏菌的符合率为90%,总符合率为96.25%。[结论]Ecoli+S.en-μPADs检测试纸制备简单,操作便捷,为食源大肠杆菌与沙门氏菌的快速检测提供了一种新方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集》期刊2019-12-12)

李凤琴,刘怡[3](2019)在《一例牛腹泻病大肠杆菌的分离鉴定与毒力岛基因检测》一文中研究指出为了探究一例牛腹泻病的病因,通过16SrRNA鉴定分离出大肠杆菌,并对分离株进行了ETT2毒力基因PCR检测,结果显示分离株携带ETT2毒力岛基因,推测该腹泻病的发生可能和毒力基因携带有关。(本文来源于《吉林畜牧兽医》期刊2019年11期)

冯世文,李军,潘艳,李常挺,贺会利[4](2019)在《广西不同养殖模式猪源大肠杆菌耐药性和耐药基因检测分析》一文中研究指出本研究目的是了解广西不同养殖模式猪源大肠杆菌的耐药情况和耐药基因流行情况,为临床合理用药治疗猪大肠杆菌病以及减缓细菌耐药性产生提供参考。采用K-B纸片法测定了180株分离自广西3种养殖模式猪源大肠杆菌的耐药情况,并通过PCR检测其携带EABLs(bla_(TEM)、bla_(CTX))、PMQR因子(qnrA、oqxA、oqxB、aac(6′)-Ib-cr)、大环内酯类耐药基因(ermB)、磺胺类耐药基因(suL)和氟苯尼考耐药基因(floR)的情况。结果显示,大规模、中小规模和散养户养猪场的大肠杆菌对头孢西丁、头孢他啶和阿米卡星的敏感率高于70%,而对青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、利福平、林可霉素和复方新诺明的耐药率均高于90%。大规模养猪场大肠杆菌对恩诺沙星的耐药率极显着低于散养户(P<0.01),对氧氟沙星、庆大霉素和氟苯尼考的耐药率显着低于散养户(P<0.05);中小规模养猪场大肠杆菌对恩诺沙星、强力霉素和氟苯尼考的耐药性显着低于散养户(P<0.05);散养户大肠杆菌对环丙沙星、卡那霉素和壮观霉素的耐药率极显着高于大规模养猪场和中小规模养猪场(P<0.01),而对头孢噻肟的耐药率极显着低于大规模养猪场和中小规模养猪场(P<0.01)。大规模养殖场、中小规模养殖场和散养户大肠杆菌的多重耐药指数(MARI)分别为0.62、0.63和0.68,分离自散养猪场的83.3%菌株(50株)表现为对13-23种药物的多药耐药,极显着高于大规模养猪场(50%,30株,P<0.01),显着高于中小规模养猪场(61.7%,37株,P<0.05)。在3种模式养猪场的大肠杆菌中均检测到bla_(TEM)、bla_(CTX、)qnrA、oqxA、oqxB、aac(6′)-Ib-cr、ermB、suL和floR 9种耐药基因,其中bla_(TEM)和suL的阳性率高达100%,bla_(CTX)的阳性率最低,各模式猪场均低于57%。3种养殖模式之间的耐药基因阳性率相比差异显着,但与耐药表型不具有显着相关性。结果表明,3种养殖模式的猪场分离的大肠杆菌均具有严重的耐药问题,且菌株可携带多种耐药基因,表现为多重耐药,而不同养殖模式猪场分离的菌株耐药性存在显着性差异。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年11期)

刘子奕,李瑞超,王志强[5](2019)在《鹅源产NDM-5大肠杆菌的检测与分子特征研究》一文中研究指出[目的]本研究2018年从扬州市某鹅场的种鹅场和育雏场共采集样品117份,包括鹅肛拭子、鹅场地表粪便、鹅场饲料、鹅场水样以及周边土壤样品,从中分离耐碳青霉烯的大肠杆菌并进一步对其菌株特征以及耐药分子特征进行研究。[方法]将采集的样品经过前增菌处理后,用含2mg/L美罗培南的麦康凯平板分离耐碳青霉烯的肠杆菌。随后,采用16s rDNA以及测序进一步鉴定菌属,并同时用PCR检测bla_(NDM)基因,采用微量肉汤稀释法测定菌株对9种抗菌药物的最小抑菌浓度,通过接合试验和S1-PFGE分析携带bla_(NDM)基因质粒的可转移性以及质粒分子大小。最后,采用Illumina测序技术对所有bla_(NDM)阳性大肠杆菌进行全基因测序,并根据二代测序结果挑取不同克隆群的菌株进一步进行Oxford Nanopore MinION叁代测序,从而对菌株的遗传特征进行深入探究。[结果]117份样品中,成功分离得到12株bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌,其中种鹅场分离得到11株,育雏场分离获得1株。MIC结果显示,12株菌对美罗培南、链霉素、氨曲南、阿莫西林、头孢喹肟、氟苯尼考以及多西环素表现为耐药,但大多数菌对恩诺沙星以及多黏菌素仍表现为敏感。通过接合转移试验成功得到12株菌对应的接合子,S1-PFGE结果表明12株菌中~46kb大小的质粒可以成功从供体菌转移到受体菌内。最后,全基因测序结果揭示了在种鹅场分离到的11株bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌中有10株属于ST48型,SNP分析发现它们具有高度的亲缘性,说明种鹅场存在bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌的克隆传播,同时在该场中还分离到一株属于ST8809的新ST型bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌。此外,育雏场中分离的bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌属于ST3076型,表明育雏场与种鹅场并不存在bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌的克隆传播。进一步分析发现这些菌中bla_(NDM-5)的基因环境为典型的ISAba125-IS5-bla_(NDM-5)-ble_(MBL)-trpF-dsbC-IS26结构,而且均定位在IncX3型可接合质粒上,这与国际上流行的bla_(NDM-5)的基因环境一致。[结论]本研究首次从鹅源分离到bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌。研究发现bla_(NDM-5)定位在可接合转移的IncX3型质粒上,表明该种类型的质粒具有在鹅场内引起bla_(NDM-5)水平传播的潜力,同时还发现在种鹅场内存在以ST48型bla_(NDM-5)阳性大肠杆菌为优势株的克隆传播现象,提示应该加强对水禽系统的耐药性监测从而遏制多重耐药菌的传播。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13)

冯世文,李军,潘艳,贺会利,李常挺[6](2019)在《广西规模化猪场猪源大肠杆菌耐药表型和耐药基因检测及相关性分析》一文中研究指出[目的]了解广西地区规模化猪场猪源大肠杆菌的耐药表型以及耐药基因携带情况及其相关性,从而对指导临床合理用药和控制细菌耐药性产生和传播提供科学的指导。[方法]对120株猪源大肠杆菌进行了头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和酰胺醇类药物耐药表型检测,并通过PCR检测菌株携带ESBLs(blaTEM、blaCTX-M)、PMQR因子(qnrA、oqxA、oqxB、aac(6'')-Ib)、大环内酯类耐药基因(ermB)和氟苯尼考耐药基因(floR)的情况。[结果]猪源大肠杆菌对头孢西丁、头孢他啶和阿米卡星具有高敏感率(>74.0%),耐药率最高为四环素类84.2%,酰胺醇类为70.8%,氟喹诺酮类为68.95%,氨基糖苷类为49.36%,大环内酯类为43.3%,最低为头孢菌素类31.38%。猪源大肠杆菌最低对1种药物耐药,最高对18种药物耐药,111株多重耐药菌以11耐(15株)、8耐(13株)和7耐(12耐)为主,共有82种耐药谱型。猪源大肠杆菌的8个耐药基因的阳性率均≥50.00%,其中阳性率最高为blaTEM基因(91.7%),最低为aac(6'')-Ib基因(50.0%),共携带53种基因组合类型,以blaTEM+blaCTX-M+qnrA+oqxA+oqxB+aac(6'')-Ib+ermB+floR (14株,11.7%)和blaTEM+blaCTX-M+qnrA+oqxA+oqxB+ermB+floR (13株,10.8%)组合类型为主。耐药基因和耐药表型相关性分析结果显示,blaTEM和blaCTX-M与大肠杆菌对头孢氨苄耐药情况极显着相关(P<0.01),blaCTX-M与大肠杆菌对头孢拉啶和头孢曲松耐药情况极显着相关(P<0.01),qnrA、oqxA、oqxB和aac(6'')-Ib基因与大肠杆菌对诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星和环丙沙星耐药情况极显着相关(P<0.01),floR基因与大肠杆菌对氟苯尼考耐药情况极显着相关(P<0.01)。[结论]本研究结果表明广西规模化猪场猪源大肠杆菌仅对极少数抗菌药物具有较高敏感率,多重耐药情况严重,具有丰富的耐药谱型,携带多种耐药基因且具有复杂的基因组合类型,所携带的耐药基因与其耐药表型具有一定的相关性。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13)

冯涛,薛原[7](2019)在《东北地区狐源多重耐药大肠杆菌整合子的检测》一文中研究指出[目的]为了研究不同地区狐源大肠杆菌中1类整合子的存在情况,以及其与耐药性之间的联系。[方法]采用纸片扩散法对164株分离鉴定后的大肠杆菌进行耐药性的检测,汇总其药物敏感特征,然后用PCR技术从狐源大肠杆菌中扩增整合酶基因(intI1 and inI2),在检出1型整合酶的大肠杆菌中扩增1类整合子,通过DNA的克隆测序检测1类整合子的不同基因片段大小,与GeneBank数据库的序列进行比对和分析。[结果]超过60%的大肠杆菌对头孢噻吩、四环素和磺胺甲恶唑/甲氧苄啶表现出耐药表型,而对亚胺培南、阿米卡星和多黏菌素B的表示高敏感性的菌株超过80%。PCR结果表明,1型整合酶和2型整合酶的检出率分别为51.83%和15.24%,1类整合子的阳性率达到79.88%,其中大部分属于不含基因盒的空整合子,序列分析得出共包含5种整合子,各自携带不同组合的基因盒,分别编码对甲氧苄啶二氢叶酸还原酶(dfrA)和氨基糖苷类腺嘌呤转移酶(aadA)的抗性。基因盒的组合方式为aadA5-dfrA17,aadA2-dfrA12-dfrA15,aadA1-aadA22-aadA29,dfrA5-dfrA29和aadA1-aadA2-dfrA1-dfrA12-dfrA15。基因盒阵列aadA1-aadA22-aadA29 (56.25%)在这些大肠杆菌中最为普遍。[结论]Ⅰ型整合子通过特定整合酶催化的位点特异性重组在细菌耐药性的传播过程中发挥着至关重要的作用,在检出的整合子中,几乎都含有空整合子,这类整合子在自然环境中更为常见,其具有较强选择抗生素的能力。基因盒的组合表明携带整合子的分离株一般对两类或两类以上抗生素可以产生耐药性,整合子在耐药基因传播中的潜力将是对毛皮动物的持续威胁,需要我们加强监测和检测,以将威胁降到最低。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13)

马馨,刘一飞,王志宇,任彬琳,陈泽[8](2019)在《鸡源大肠杆菌分离鉴定及ESBLs与AmpC酶基因型检测及耐药性分析》一文中研究指出为了解山西省范围内鸡源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)大肠杆菌分离株的基因型及其耐药现状,本试验从呈现典型鸡大肠杆菌病临床症状的病料中分离、鉴定出68株符合鸡源大肠杆菌生物特性的流行菌株,采用K-B法与双纸片确认法对分离的68株大肠杆菌分别进行药敏试验和ESBLs、AmpC酶耐药表型的筛选;采用PCR方法检测了分离株中质粒介导的ESBLs、AmpC酶的基因型。结果显示,分离到的68株菌对22种抗菌药物均产生不同程度的耐药性,其中耐药谱达7耐以上的有66,占总分离菌株数的97.06%;呈ESBLs、AmpC酶阳性和两者均阳性的菌株数分别为57(83.82%)、19(27.94%)和16(23.53%)株;检测出ESBLs阳性菌株携带的耐药基因型包括bla_(TEM)、bla_(OXA)和bla_(CTX-M-1/9),AmpC酶阳性菌株耐药基因型为bla_(FOX)型。研究结果表明,分离的68株鸡源大肠杆菌已对绝大多数种类抗菌药物产生耐药性,且产ESBLs和AmpC酶菌株已普遍流行。山西省鸡源大肠杆菌中流行的ESBLs基因型与国内其他地区相关报道大体一致,而检测到的bla_(FOX)型AmpC酶基因在国内报道相对较少。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年09期)

方光远,邵金凤,王纾,樊金云,陈俊红[9](2019)在《仔猪腹泻大肠杆菌分离鉴定与Ⅰ类整合子检测》一文中研究指出为了分析南京某养猪场仔猪腹泻发病原因,对腹泻仔猪粪便中分离获得的10株细菌进行培养特性观察、染色镜检、生化鉴定、药敏试验和Ⅰ类整合子酶基因片段及耐药基因盒检测。结果表明,该10株细菌均为大肠杆菌,对头孢哌酮和头孢噻肟全部敏感,对链霉素、氨苄西林、四环素、氯霉素、多粘菌素B和复方新诺明全部耐药,对诺氟沙星敏感度高低不等;10株分离菌均检测出Ⅰ类整合子酶基因片段,8株分离菌检测出4种Ⅰ类整合子耐药基因盒。试验结果为临床预防和控制仔猪腹泻大肠杆菌病提供了理论依据。(本文来源于《金陵科技学院学报》期刊2019年03期)

张召兴,李佩国,李蕴玉,贾青辉,张香斋[10](2019)在《致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌分子分群、耐药表型及耐药基因型检测与分析》一文中研究指出为分析邢台和秦皇岛地区致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌(E.coli)分离株的分子分群情况及耐药表型和耐药基因型之间的相关性,本研究采用PCR法和96孔板微量肉汤稀释法分别对临床分离的42株致鸡卵黄性腹膜炎E.coli的系统进化分群、耐药基因和12种抗菌药物耐药表型进行检测。结果显示,42株分离菌株中属于A、B1、B2、D群的分别有7株、9株、14株、12株,以B2+D群流行为主;42株分离菌株对12种抗菌药物耐药性严重且呈现多重耐药性,其中对阿莫西林-克拉维酸、磺胺间甲氧嘧啶、多西环素等9种药物耐药率在45.24%以上,对其它药物耐药率在19.04%~38.10%,耐12种、9种抗菌药物分离菌株最多,分别占分离菌株的19.05%、16.67%;42株分离菌株中耐药基因tetA、Sul1、TEM、Sul2、mcr-1、floR、SHV、tetR检出率在59.52%以上,其它耐药基因检出率为14.29%~38.10%;ESBLs类、四环素类、喹诺酮类、头孢菌素类、磺胺类、多肽类和酰胺醇类7类抗菌药物的耐药表型和耐药基因型符合率在52.6%以上,其中酰胺醇类、多肽类的耐药表型与耐药基因型符合率为100%。本实验为致蛋鸡卵黄性腹膜炎E.coli防控及临床用药提供参考。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年09期)

检测大肠杆菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

[目的]食源大肠杆菌与沙门氏菌是世界卫生组织列出的主要的食源性致病菌,频繁引起国内外食源性疾病暴发,能研究一种快速、便捷并可实现同时检测食品中大肠杆菌和沙门氏菌的方法,是保证食品安全的关键环节之一。本文对自主研发的大肠杆菌与沙门氏菌纸基微流控联合检测试纸(E.coli+S.en-μPADs)(ZL201720205440.X)临床应用准确性和便捷性进行效果评估。[方法]采集超市冷鲜肉和市场散称肉,用E.coli+S.en-μPADs进行检测,并与大肠杆菌和沙门氏菌检测国标(GB 4789.3—2016;GB4789.4—2016)进行比对。[结果]E.coli+S.en-μPADs特异性100%,大肠杆菌检测限:6×10~6CFU/mL,沙门菌检测限:9×10~3CFU/mL。增菌培养到报告结果用时7h。E.coli+S.en-μPADs和GB 4789.3—2016、GB 4789.4—2016可都对样品完成检测,对超市冷鲜肉检测,二者大肠杆菌符合率为100%,沙门氏菌的符合率为95%;对市场散称肉检测,二者大肠杆菌的符合率为100%,沙门氏菌的符合率为90%,总符合率为96.25%。[结论]Ecoli+S.en-μPADs检测试纸制备简单,操作便捷,为食源大肠杆菌与沙门氏菌的快速检测提供了一种新方法。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

检测大肠杆菌论文参考文献

[1].楼秋雯,陈为为,黄志广,安紫珲,朱振洪.水质中大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].科技创新与应用.2019

[2].郑晓风,刘英玉,姚刚.食源大肠杆菌和沙门氏菌检测效果评价[C].中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十五次学术交流会论文集.2019

[3].李凤琴,刘怡.一例牛腹泻病大肠杆菌的分离鉴定与毒力岛基因检测[J].吉林畜牧兽医.2019

[4].冯世文,李军,潘艳,李常挺,贺会利.广西不同养殖模式猪源大肠杆菌耐药性和耐药基因检测分析[J].畜牧与兽医.2019

[5].刘子奕,李瑞超,王志强.鹅源产NDM-5大肠杆菌的检测与分子特征研究[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集.2019

[6].冯世文,李军,潘艳,贺会利,李常挺.广西规模化猪场猪源大肠杆菌耐药表型和耐药基因检测及相关性分析[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集.2019

[7].冯涛,薛原.东北地区狐源多重耐药大肠杆菌整合子的检测[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集.2019

[8].马馨,刘一飞,王志宇,任彬琳,陈泽.鸡源大肠杆菌分离鉴定及ESBLs与AmpC酶基因型检测及耐药性分析[J].中国畜牧兽医.2019

[9].方光远,邵金凤,王纾,樊金云,陈俊红.仔猪腹泻大肠杆菌分离鉴定与Ⅰ类整合子检测[J].金陵科技学院学报.2019

[10].张召兴,李佩国,李蕴玉,贾青辉,张香斋.致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌分子分群、耐药表型及耐药基因型检测与分析[J].中国预防兽医学报.2019

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