rhKD/APP对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

论文摘要

随着药物溶栓、冠状动脉介入治疗及外科冠状动脉搭桥术等再灌注治疗技术的广泛应用,缺血再灌注损伤（IRI）程度已成为影响急性心肌梗死（AMI）治疗效果的一个重要因素。采取有效措施防治心肌缺血再灌注损伤对促进心肌细胞存活,降低AMI病死率具有重要意义。近年来虽已研制了许多药物用于IRI的治疗,但效果均不理想。研究表明丝氨酸蛋白酶抑制剂在减轻CPB术中、术后出血的同时对心肌细胞具有保护作用,但目前我国临床使用的丝氨酸蛋白酶抑制剂主要为牛肺提取物,因是异种蛋白,故有引起致命性过敏反应的危险,加之成本高、价格昂贵,使其临床应用受到了极大限制。为此,我实验室运用DNA重组技术,在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达人淀粉样β蛋白前体（amyloid β-protien precursor,AβPP）中的Kunitz型蛋白酶抑制剂的结构域,利用80L的发酵罐优化发酵条件,合成人Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂（recombination humam Kunitz protease inhibitor Domain,rhKD/APP）。经质谱测定其相对分子质量为6750,抑制胰蛋白酶的比活性为8.4EPU.mg-1。rhKD/APP是由61个氨基酸组成的小分子多肽,能与丝氨酸蛋白酶结合并抑制其活性,rhKD/APP同时还具备无致过敏反应和可工业化大规模生产的优点,为日后广泛临床应用奠定了基础。 本实验采用冠状动脉结扎/松弛法,复制犬在体心肌缺血再灌注损伤模型,研究rhKD/APP对心肌缺血再灌注损伤心肌细胞的保护作用并对其作用机制进行了初步探讨。为能客观地评价rhKD/APP的心肌保护作用疗效,本研究以POE1为阳性对照药横向比较了二者的作用效果。结果表明,rhKD/APP对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。表现为rhKD/APP能维持心肌细胞膜的完整性减少心肌酶的漏出;减轻心肌细胞超微结构的损害;缩小心肌梗死范围;降低再灌注性心律失常的发生率及持

论文目录

• 英文缩写
• 前言
• 第一章 文献综述
• 第一节 心肌缺血再灌注损伤的发病机制
• 第二节 心肌缺血再灌注损伤的病理生理改变
• 第三节 心肌缺血再灌注损伤的治疗
• 第二章 rhKD/APP对心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第三章 rh KD/APP对心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的研究
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 博士期间发表的论文及获奖情况
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢