氯化镉诱导HL-7702细胞凋亡及其机制的研究

论文摘要

镉（Cadmium）是一种有毒的重金属元素,易在体内蓄积,镉对机体毒性效应十分复杂。肝脏是镉损伤的主要靶器官之一,目前对镉致肝细胞损伤机制尚不十分清楚。本文对氯化镉诱导肝细胞凋亡作用及其机制进行了探讨。以正常人肝细胞系HL-7702细胞为模型,采用生长曲线法和MTT法检测氯化镉对细胞生长的抑制作用;采用流式细胞术（FCM）检测氯化镉对细胞周期的影响;采用AO/EB双染法和FCM技术检测氯化镉对细胞凋亡的影响;生物化学方法检测氯化镉对细胞的氧化损伤作用;RT-PCR方法检测凋亡相关基因转录水平的变化;采用免疫细胞化学法和Western Blot方法检测凋亡相关蛋白的表达情况。结果表明:氯化镉可以抑制HL-7702细胞生长,诱导细胞发生S期阻滞,诱导细胞发生凋亡,引起细胞发生氧化损伤,还可以引起凋亡相关基因转录水平和蛋白表达水平发生改变。氯化镉诱导HL-7702细胞凋亡的机制与氯化镉可诱导细胞发生S期阻滞,诱发氧化损伤以及调控凋亡相关基因和蛋白表达有关。本研究对于深入探讨镉肝毒性作用机制,特别是对正常人肝细胞毒性作用的机制具有重要的理论意义;对镉作为抗肝癌药物的相关机制研究有重要的参考价值;同时也为镉肝毒性有效防治打下实验基础。

论文目录

英文缩写

第一章绪论

1. 环境镉污染及其危害

1.1 镉污染的现状

1.2 镉对人体健康的危害

2. 细胞凋亡及信号转导通路

2.1 细胞凋亡的概念

2.2 细胞凋亡的特征

2.3 细胞凋亡的检测方法

2.4 细胞凋亡基因调控

2.5 凋亡的信号转导通路

第二章材料和方法

1. 实验主要试剂及器材

1.1 试剂

1.2 器材

2. 主要仪器

3. 细胞系

4. 细胞生物学方法

4.1 细胞培养

4.2 细胞生长曲线测定

4.3 细胞毒性作用检测

4.4 细胞周期检测

4.5 FCM 检测细胞凋亡

4.6 AO/EB 双染检测细胞凋亡

5. 生物化学方法

5.1 细胞培养

5.2 蛋白定量

5.3 SOD 活性测定

5.4 MDA 含量测定

5.5 GSH-Px 活性测定

6. 分子生物学实验方法

6.1 引物设计及合成

6.2 细胞总 RNA 的提取和定量

6.3 RT-PCR 法

6.4 琼脂糖凝胶电泳和灰度分析

7. FCM 检测Caspase-3 蛋白的表达

7.1 细胞培养

7.2 抗体标记

7.3 流式细胞术检测蛋白质表达

8. 免疫细胞化学方法检测Fas 和FasL 蛋白的表达

8.1 试剂配制

8.2 实验步骤

9. Western Blot 方法检测 Caspase-3 蛋白的表达

9.1 蛋白提取和定量

9.2 试剂配制

9.3 凝胶制备

9.4 样品的制备、加样及电泳

9.5 蛋白质的电转移

9.6 封闭

9.7 抗体的结合及显示目标蛋白带

10. 统计学方法

第三章实验结果

1. 氯化镉对 HL-7702 细胞的抑制作用

2. 不同浓度氯化镉对 HL-7702 细胞周期的影响

3. 氯化镉对 HL-7702 细胞凋亡的影响

4. 氯化镉对 HL-7702 细胞的氧化损伤作用

5. 细胞凋亡相关基因转录水平的变化

6. 细胞凋亡相关蛋白表达的变化

第四章讨论

结论

参考文献

附录

攻博期间发表的学术论文及其他成果

中文摘要

Abstract

致谢

相关论文文献

[1].梓醇对人肝细胞HL-7702胰岛素抵抗的影响及其机制研究[J]. 中药新药与临床药理 2015(03)
[2].过表达白鳍鲨硒结合蛋白1对HL-7702细胞镉胁迫的解毒作用[J]. 中国细胞生物学学报 2014(01)
[3].胺碘酮对人肝细胞HL-7702生长的影响[J]. 中国医院药学杂志 2014(03)
[4].纳米氧化锌对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用研究[J]. 安徽农业科学 2009(36)
[5].葡萄糖-组胺美拉德产物的生成及对HL-7702细胞生长抑制和细胞周期的影响[J]. 食品与生物技术学报 2015(07)
[6].甲基汞对HL-7702细胞毒性氧化应激的效应[J]. 毒理学杂志 2009(01)
[7].甘氨鹅脱氧胆酸盐对人正常肝细胞HL-7702的影响[J]. 广东医学 2010(14)
[8].碳酸钙材料对HL-7702细胞的体外毒性[J]. 云南大学学报(自然科学版) 2014(04)
[9].甘氨脱氧胆酸盐诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡及其机制的研究[J]. 西安交通大学学报(医学版) 2009(01)
[10].人参皂苷对人肝细胞HL-7702内性激素受体水平的影响[J]. 中国中西医结合杂志 2009(12)
[11].萱草花总黄酮改善肝细胞HL-7702氧化损伤的研究[J]. 中草药 2015(21)
[12].羊栖菜多糖对软脂酸诱导的HL-7702细胞凋亡的保护作用[J]. 中华中医药学刊 2011(03)
[13].天麻粉水浸出物抑制油酸诱导的HL-7702细胞三酰甘油蓄积的实验研究[J]. 中国当代医药 2015(13)
[14].人参皂苷通过Aldolase/AMPK/PINK1信号通路减轻油酸诱导的HL-7702细胞损伤[J]. 中国临床药理学与治疗学 2020(06)
[15].甲泼尼龙对HepG2和HL-7702细胞增殖活性影响的研究[J]. 天津医药 2009(05)
[16].多溴联苯醚对HL-7702细胞和小鼠皮肤成纤维细胞间隙连接通讯的影响[J]. 西北师范大学学报(自然科学版) 2010(03)
[17].姜黄素通过激活AMPK抑制人肝癌细胞HL-7702的增殖[J]. 中国老年学杂志 2014(07)
[18].IL-10对稳定转染HBx基因的HL-7702细胞增殖的影响[J]. 福建医科大学学报 2017(02)
[19].辐照诱导人正常肝细胞系HL-7702细胞远后的微卫星不稳定性[J]. 原子核物理评论 2013(04)
[20].纳米二氧化硅颗粒对HL-7702细胞黏附和迁移能力的影响[J]. 吉林大学学报(医学版) 2015(04)
[21].壁虎粉提取物作用于乙型肝炎病毒侵袭的HepG2和HL-7702细胞的实验研究[J]. 分子诊断与治疗杂志 2011(04)
[22].甘氨脱氧胆酸盐诱导人正常肝细胞株HL-7702凋亡过程中caspase-3,8,9蛋白活性变化及凋亡机制研究[J]. 四川医学 2010(01)
[23].大田软海绵酸对HL-7702肝细胞毒性效应的研究[J]. 安徽农业科学 2010(10)
[24].纳米银对HL-7702肝细胞DNA的损伤作用[J]. 中国药理学与毒理学杂志 2010(06)
[25].甘氨脱氧胆酸盐诱导人正常肝细胞株HL-7702凋亡过程中caspase3,9活性与mRNA表达水平变化[J]. 临床肝胆病杂志 2008(01)
[26].HBV X基因在HL-7702肝细胞中的表达促进细胞凋亡并上调HSP70基因的表达[J]. 福建医科大学学报 2013(05)
[27].饮用水有机提取物对正常人肝HL-7702细胞的毒性[J]. 环境与健康杂志 2011(11)
[28].玉米低聚肽促HL-7702人肝细胞增殖作用[J]. 食品与发酵工业 2012(02)
[29].锌和N-乙酰半胱氨酸对镉致人正常肝细胞HL-7702凋亡的拮抗作用研究[J]. 沈阳医学院学报 2012(04)
[30].亚硫酸钠对HL-7702细胞极低密度脂蛋白组装分泌和内质网应激的影响[J]. 癌变·畸变·突变 2016(03)

标签：氯化镉论文; 细胞周期论文; 细胞凋亡论文; 氧化损伤论文;

氯化镉诱导HL-7702细胞凋亡及其机制的研究

论文摘要

论文目录

相关论文文献

猜你喜欢