首页> 正文

番茄抗TYLCV相关分子标记筛选及其分子标记辅助选择抗性聚合研究

2020-12-13阅读(922)

番茄抗TYLCV相关分子标记筛选及其分子标记辅助选择抗性聚合研究

论文摘要

番茄黄化曲叶病（Tomato yellow leaf curl disease）已经成为世界番茄生产上的主要病害之一,近几年,在我国迅速传播,严重威胁到我国的番茄生产。该病由双生病毒科菜豆金色花叶病毒属番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV）引起,主要通过烟粉虱（Bemisia tabaci）.培育抗病品种是阻止该病蔓延的最根本有效的途径,据报道,番茄栽培种种质资源中缺乏抗TYLCV的基因,仅有一些表现为耐病的种质。高抗TYLCV的基因都存在于近缘野生种质中,目前已报道的抗番茄黄化曲叶病的近缘野生种主要有醋栗番茄（S.pimpinellifolium）、秘鲁番茄（S.peruvianum）、多毛番茄（S.habrochaites）、智利番茄（S.chilense）和契斯曼尼番茄（S.cheesmanii）。因此,TYLCV的抗性育种很大程度上基于从野生种向栽培种中转入抗性基因。为了应用分子标记辅助选择技术加快抗病品种培育进程,阻止该病蔓延,本试验以抗病亲本CLN2777A和感病亲本TMXA48-4-0及其F2分离群体为材料,应用AFLP和SSR两种标记技术以及BSA法进行与抗TYLCV基因连锁标记的筛选。同时利用国外开发的分别与抗TYLCV基因Ty-1, Ty-2, Ty-3连锁的标记进行分子标记辅助选择聚合研究,研究结果如下：1.通过对亲本及F2分离群体进行TYLCV接种,发现F2代抗感病分离比率接近3：1,表明抗性受单个显性基因控制。用512对Mse I/Pst I引物组合对亲本及F2代抗感基因池进行AFLP分析,最终引物组合P15/M28与P16/M10在亲本及抗感组间表现多态性,,回收并克隆测序,两片段大小分别为106bp,180bp,分别命名为P15M28-106,P16M10-180.重新设计引物,将P15M28-106成功转化为CAPS标记,命名为P15M28.应用一个F2群体对其进行验证,遗传连锁分析结果表明标记P15M28与抗性基因Ty-2之间的遗传距离为8.8cM,可以应用于标记辅助选择育种。除此之外,根据Kenta Shirasawa （2010）构建的番茄遗传图谱,选取11号染色体末端,TG36到TG393区间上的7个SSR标记,应用同样的亲本和F2群体进行筛选,发现一个与抗TYLCV连锁的EST-SSR标记TES0344,与抗性基因遗传距离为7.8 cM。2.应用分别含有Ty-1, Ty-2, Ty-3三个抗TYLCV基因的育种材料TY52,CLN2777A,99S-C-39-20-1-1-24-17-0-0,以及三个园艺性状优良的感病材料Tmm9060-0, TMXA48-4-0, TA1218,按计划配置杂交组合,每一代都应用对应的标记进行分子标记进行筛选,目前已得到Ty-1与Ty-2, Ty-1与Ty-3, Ty-2与Ty-3两两聚合的纯合抗病材料各一株系。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一部分 文献综述
  • 1 番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）的研究进展
  • 1.1 番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）的发病症状
  • 1.2 番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）及其传播
  • 1.3 番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）的检测
  • 1.4 抗性机理的研究
  • 1.5 番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）接种及抗性鉴定
  • 1.6 主要防治方法
  • 2 抗TYLCV育种进展
  • 2.1 抗性遗传规律及抗原材料的筛选
  • 2.2 抗TYLCV育种进展
  • 2.3 生物工程技术在抗TYLCV育种中的应用
  • 3 分子标记技术及分子标记辅助选择育种
  • 3.1 分子标记的特点
  • 3.2 常用分子标记技术及其原理
  • 3.3 标记筛选方法
  • 3.4 标记筛选所用群体构建常用方法
  • 3.5 与抗TYLCV基因相关标记的开发
  • 3.6 分子标记辅助选择原理及在番茄抗病育种中的应用
  • 3.7 聚合育种及分子标记辅助选择在聚合育种中的应用
  • 3.8 分子标记辅助选择目前存在的问题
  • 第二部分 研究报告
  • 第一章 番茄基因组AFLP反应体系的优化
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料与试剂
  • 1.2 方法
  • 2 结果分析
  • 2.1 DNA模板检测
  • 2.2 酶切与连接
  • 2.3 预扩增
  • 2.4 选择性扩增
  • 3 小结
  • 第二章 抗TYLCV相关标记筛选
  • 1 材料及方法
  • 1.1 试验材料
  • 1.2 接种方法
  • 1.3 TYLCV检测
  • 1.4 AFLP分析
  • 1.5 特异片段的回收
  • 1.6 特异片段的克隆
  • 1.7 CAPS标记转化及分析
  • 1.8 SSR分析
  • 2 结果分析
  • 2单株抗病性鉴定'>2.1 F2单株抗病性鉴定
  • 2.2 AFLP标记筛选
  • 2.3 SSR标记筛选
  • 3 小结
  • 第三章 分子标记辅助选择聚合抗TYLCV基因研究
  • 1 材料及方法
  • 1.1 供体亲本
  • 1.2 受体亲本
  • 1.3 感病对照
  • 1.4 抗性鉴定所用烟粉虱的饲养
  • 1.5 分子检测
  • 1.6 TYLCV接种鉴定及抗性调查分级标准
  • 1.7 田间试验
  • 2 结果分析
  • 2.1 亲本间多态性检测
  • 2.2 Ty-1与Ty-2聚合
  • 2.3 Ty-1与Ty-3聚合
  • 2.4 Ty-2与Ty-3聚合
  • 3 讨论
  • 全文结论
  • 参考文献
  • 缩略表
  • 附录
  • 硕士期间发表的学术论文
  • 致谢

    • 相关论文文献

    • [1].烟粉虱取食感染TYLCV番茄对其解毒酶和保护酶活性的影响[J]. 植物保护 2015(06)
    • [2].RNAi介导的转基因番茄抗TYLCV研究[J]. 西南农业学报 2014(06)
    • [3].番茄试管苗抗TYLCV鉴定技术研究[J]. 园艺学报 2012(12)
    • [4].辽宁省越冬粉虱伪蛹初春羽化率及烟粉虱体内TYLCV的检测[J]. 环境昆虫学报 2014(02)
    • [5].抗TYLCV粉果番茄新品种“奥美妮”的选育及栽培技术[J]. 北方园艺 2016(07)
    • [6].RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性[J]. 江苏农业学报 2014(05)
    • [7].核黄素对接种TYLCV后番茄幼苗生长和活性氧代谢的影响[J]. 上海农业学报 2013(06)
    • [8].抗TYLCV樱桃番茄新品种浙樱粉2号的选育[J]. 中国蔬菜 2018(07)
    • [9].携带TYLCV的B型和Q型烟粉虱对非传毒寄主的选择差异[J]. 植物保护学报 2019(03)
    • [10].优质串收抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种‘圣婴'的选育[J]. 上海农业学报 2015(01)
    • [11].三种杀虫剂对携带TYLCV烟粉虱的驱避效应[J]. 山东农业科学 2019(01)
    • [12].陕西杨凌地区TYLCV病毒生物信息学分析研究[J]. 长江蔬菜 2014(04)
    • [13].TYLCV侵染对番茄叶片解剖结构和保护酶系统的影响[J]. 安徽农业科学 2009(29)
    • [14].抗TYLCV优质番茄新品种“露比”的选育[J]. 蔬菜 2019(06)
    • [15].抗TYLCV精品型红果新品种番茄“斯佳丽”的选育[J]. 北方园艺 2017(13)
    • [16].抗TYLCV番茄新品种济农佳粉的选育[J]. 中国蔬菜 2016(01)
    • [17].番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)基因介导抗病性研究进展[J]. 中国蔬菜 2012(20)
    • [18].TYLCV山东分离物株系分化及侵染性克隆的构建[J]. 东北农业大学学报 2015(01)
    • [19].抗TYLCV樱桃番茄新品种——红冠[J]. 中国蔬菜 2013(03)
    • [20].ToCV和TYLCV复合侵染番茄后部分病毒基因序列分析及实时荧光定量PCR分析[J]. 华北农学报 2019(02)
    • [21].抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种丽晶T2的选育[J]. 中国蔬菜 2013(24)
    • [22].GroEL基因抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的研究[J]. 江苏农业学报 2011(02)
    • [23].抗TYLCV番茄新品种苏红11号[J]. 中国蔬菜 2018(01)
    • [24].番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)发生为害与防治[J]. 长江蔬菜 2010(17)
    • [25].与抗TYLCV基因连锁的AFLP标记筛选及CAPS标记的转化[J]. 江苏农业学报 2011(05)
    • [26].抗TYLCV番茄新品种西农2011的选育[J]. 中国蔬菜 2012(02)
    • [27].BTH处理对番茄幼苗TYLCV抗性、光合特性及防御酶活性的影响[J]. 南京农业大学学报 2012(06)
    • [28].番茄抗TYLCV分子标记辅助聚合育种[J]. 中国瓜菜 2019(01)
    • [29].番茄黄化卷叶病毒病(TYLCV)的研究进展[J]. 中国农业科技导报 2009(05)
    • [30].番茄高抗TYLCV与敏感品种光合生理特性比较[J]. 浙江农业学报 2014(02)

    标签：;  ;  

    番茄抗TYLCV相关分子标记筛选及其分子标记辅助选择抗性聚合研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5