SPF鸡感染IBV后脑肠肽类物质和抗氧化酶的动态观察

论文摘要

本研究以免疫-神经-内分泌网络学说为依据,运用免疫组织化学技术、免疫电镜技术和图像处理技术,采取定性、定位和定量相结合的方法,从时间病理学的角度观察了雏鸡感染IBV后P物质和血管活性肠肽这二种重要的脑肠肽类物质在病毒作用主要靶器官气管、肺、肾组织中的动态表达,同时利用酶化学方法检测了雏鸡感染IBV后血清中几种抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）的动态变化。结果如下: 1.感染IBV后,血清SOD活力下降,在感染后第5d,第7d,实验组血清SOD活力显著低于对照组（P<0.05）。感染IBV后第7d开始实验组血清GSH-PX活力也开始出现下降趋势,一直持续到第15天,但统计学上无显著差异（P>0.05）。感染IBV后第3d开始血清MDA含量即有所上升,在感染后第5d,实验组血清MDA含量显著高于对照组（P<0.05）。 2.感染IBV后,从第3d直至第15d,血清NOS含量一直高于对照组,但统计学上无显著差异（P>0.05）。而血清NO含量从第3d开始即有所上升,且在攻毒后第5、7、11d,实验组血清NO含量显著高于对照组（P<0.05）。 3.免疫组织化学观察结果发现,鸡的气管、肺和肾组织中,存在SP和VIP阳性反应物。气管中阳性反应物主要位于黏膜上皮的游离面;肺脏中阳性反应物主要位于支气管和细支气管的黏膜上皮的游离面;肾脏中阳性反应物主要位于近曲小管上皮细胞内。感染IBV后,气管组织中P物质含量在第5d和第7d时显著高于对照组（P<0.05）,VIP含量在接种后第7d,11d,显著高于对照组（P<0.05）;肺组织中SP和VIP阳性表达量未出现明显变化;肾组织中P物质含量在接种后第5d,7d和11d,显著高于对照组（P<0.05）,VIP含量在接种后第7,11d,显著高于对照组（P<0.05）。 4.扫描电镜观察结果发现:感染IBV后,气管粘膜结构受损,局部气管粘膜上皮脱落,固有层裸露,大量炎性细胞渗出。免疫电镜观察结果显示,大多数肾小管上皮细胞胞浆内均见有SP及VIP阳性颗粒,在上皮细胞间还可见有DNES细胞;肺脏中异嗜性白细胞颗粒也常呈SP及VIP阳性反应,肺脏内也可见DNES细胞。感染IBV后,肾小管上皮细胞内SP及VIP阳性颗粒明显增多。 综上所述,感染IBV后,SP、VIP两种脑肠肽均出现了明显升高,炎性因子NO的表达也增多,而抗氧化酶SOD和GSH-PX的活力则出现下降,这表明上述各种因子都参与了IB的发病过程,但在IB的发生发展过程中,这些因子各自的功能作用是不同的。尤其是SP和VIP两种脑肠肽的表达量在IB的发病过程中出现了明显升高的变化,这在过去的研究中还未见有报道。本观察结果初步揭示了脑肠肽类物质在呼吸道感染性疾病IB的发病过程中有一定的作用。这一结果为进一步丰富免疫-神经-内分泌网络学说提供了新的有价值的资料,为生产实践中更好地防治IB提供了新的理论依据。

论文目录

• 第一章 文献综述
• 1 关于鸡传染性支气管炎
• 1.1 概述
• 1.2 IBV病原分子生物学研究
• 1.3 诊断与防治
• 2 关于弥散性神经内分泌系统及脑肠肽类物质
• 2.1 DNES细胞的组成及其形态特点
• 2.2 DNES细胞的产物及其功能
• 2.3 P物质的研究概况
• 2.4 血管活性肠肽的研究概况
• 3 关于抗氧化酶及一氧化氮
• 本研究的目的和意义
• 第二章 IBV感染SPF鸡实验
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 第三章 IBV感染SPF鸡后血清中抗氧化酶的动态观察
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 第四章 IBV感染SPF鸡后血清中NOS和NO的动态观察
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 第五章 IBV感染SPF鸡后脑肠肽类物质的动态变化
• 实验一 IBV感染SPF鸡后气管、肺及肾中SP的动态表达
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 实验二 IBV感染SPF鸡后气管、肺及肾中VIP的动态表达
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 第六章 电镜观察
• 实验一 IBV感染SPF鸡后气管黏膜扫描电镜观察
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 实验二 IBV感染SPF鸡后肺、肾组织中SP和VIP的免疫电镜观察
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 小结与讨论
• 第七章 总结
• 第八章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 图版与说明
• 个人简介