银杏内生真菌球毛壳菌次生代谢产物及抑菌活性的研究

论文摘要

植物内生真菌种类多,分布广泛,是各种活性天然产物的丰富资源。目前已报道从植物内生真菌中得到的许多次生代谢产物具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化和细胞毒等活性。毛壳属真菌是各种结构多样性次生代谢产物的丰富资源。现在已经发现了结构新颖的新的具有生物活性的次生代谢产物,如球毛壳素类化合物、色酮和萜类化合物等,其中许多化合物都具有显著的生物活性,如抗肿瘤、抗炎、细胞毒性、酶抑制活性和抗菌活性等。本实验对一株银杏内生真菌球毛壳菌（Chaetomium globosum）的次生代谢产物及抑菌活性进行了研究,最终从菌丝体和发酵液中分离得到12个化合物,通过波谱技术（MS, 1H, 13C NMR和2D NMR）并结合文献确定了这些化合物的结构,分别为角鲨烯（1）,麦角甾醇过氧化物（2）,胶霉毒素（3）,球毛壳庚素（4）, （22E,24R）-麦角甾-7,22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇（5）, fumitremorgin C（6）,球毛壳丙素（7）,甲硫基胶霉毒素（8）, 2,3,4-三甲基-5,7-二羟基-2,3-二氢苯并呋喃（9）, pseurotin A（10）,对氨基苯乙酸（11）和3,4-二羟基苯乙酸（12）。其中,化合物1, 3, 6, 8-12是首次从该菌中分离得到的。采用抑制菌丝生长速率法对化合物1-12进行体外抑菌活性测试,结果显示:只有胶霉毒素（3）对六种病原菌有好的抑制活性,其中对马铃薯干腐病菌（Fusarium sulphureum）,烟草赤星病菌（Alternaria alternata（Fries） Keissler）和玉米弯孢病菌（Cercospora sorghi）的抑制活性较强,EC50分别为:68.54,36.76和59.79μg/mL;对棉花枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum）,小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum ）和番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑制作用中等。综上,本文对银杏内生真菌球毛壳菌的次生代谢产物及抑菌活性进行了研究。阐明了12个次生代谢产物的结构,其中包括一个抑菌活性好的化合物胶霉毒素（3）。上述研究为新药的开发提供了理论基础,同时为生物发酵这类活性化合物提供了理论依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 毛壳属真菌化学成分及其生物活性的研究
• 1.1.1 生物碱
• 1.1.2 Azaphilones
• 1.1.3 色酮和吡喃酮
• 1.1.4 Chromonopyranes
• 1.1.5 氧杂蒽酮
• 1.1.6 蒽醌酮
• 1.1.7 双（萘-γ-吡喃酮）衍生物
• 1.1.8 缩酚酸环醚
• 1.1.9 Orsellides
• 1.1.10 异香豆素和芳香醛衍生物
• 1.1.11 Aureonitols
• 1.1.12 甾体化合物
• 1.1.13 萜类化合物
• 1.1.14 其他的
• 1.2 本文的立题依据及研究路线
• 1.2.1 立题依据
• 1.2.2 研究总体路线
• 第二章 银杏内生真菌球毛壳菌次生代谢产物及抑菌活性的研究
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 供试植物病原菌
• 2.1.3 主要实验仪器
• 2.1.4 试剂
• 2.1.5 培养基
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 菌种的活化
• 2.2.2 培养基的筛选
• 2.2.3 大规模液体发酵
• 2.2.4 提取
• 2.2.5 分离和纯化
• 2.2.6 化合物结构的鉴定
• 2.2.7 抑菌活性测定
• 第三章 结果与分析
• 3.1 分离和鉴定了的次生代谢产物
• 3.2 结构鉴定
• 3.2.1 化合物1 的结构鉴定
• 3.2.2 化合物2 的结构鉴定
• 3.2.3 化合物3 的结构鉴定
• 3.2.4 化合物4 的结构鉴定
• 3.2.5 化合物5 的结构鉴定
• 3.2.6 化合物6 的结构鉴定
• 3.2.7 化合物7 的结构鉴定
• 3.2.8 化合物8 的结构鉴定
• 3.2.9 化合物9 的结构鉴定
• 3.2.10 化合物10 的结构鉴定
• 3.2.11 化合物11 的结构鉴定
• 3.2.12 化合物12 的结构鉴定
• 3.3 化合物的物理常数
• 3.4 活性测试结果
• 第四章 问题与讨论
• 4.1 培养基的筛选
• 4.2 大规模发酵
• 4.3 化合物的分离
• 4.4 活性测试
• 第五章 结论与创新点
• 5.1 结论
• 5.2 论文的创新之处
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介