糖皮质激素对巨噬细胞快速非基因组作用的研究

论文摘要

糖皮质激素（glucocorticoid,GC）的基因组作用机制虽然已得到公认,但是越来越多的证据表明,GC还存在着不同于经典基因组作用的非基因组作用。关于GC非基因组作用和机制的研究报道已有很多,但是大部分局限于神经和内分泌系统的调节作用。然而临床上GC最常应用于抗炎和抑制免疫治疗。迄今为止,关于GC的抗炎和抗免疫方面作用尚未见相关报道。巨噬细胞是体内参与炎症反应和免疫的重要细胞。本实验选择小鼠腹腔巨噬细胞,观察短时间（30min）内GC对巨噬细胞吞噬功能和产生超氧阴离子的影响,旨在探讨GC对巨噬细胞的非基因组作用的可能机制。 本实验分离并纯化经巯基乙醇酸钠诱导的小鼠腹腔巨噬细胞,应用中性红（Neutral red,NR）吞噬分析法检测巨噬细胞的吞噬功能;细胞色素C（cytochrome C,Cyto C）还原法检测经PMA刺激后的巨噬细胞超氧阴离子的生成量。结果如下: （1） 10-4mol/L和10-5mol/L皮质酮（corticosterone,CORT）、甲基强的松龙（methylprednisolone,METH）和氢化考的松（hydrocortisone,HYDR）在30min内均能抑制巨噬细胞吞噬功能;任何浓度地塞米松（Dexamethone,DEXA）和10-6mol/L CORT、METH、HYDY在30min内不能能抑制巨噬细胞吞噬功能。 （2）10-4mol/L～10-10mol/LCORT、METH、HYDR和DEXA在30min内均能抑制巨噬细胞产生超氧阴离子,且随着浓度的升高,其抑制作用增强。 （3）RU486（mifepristone）是GC经典受体（GCR）拮抗剂,可以与胞浆内的GC受体结合而阻断GC的基因组作用。GC基因组作用是通过最终效应蛋白发挥作用的,蛋白质合成抑制剂放线菌酮（actidion,ACTI）阻断GC的基因组作用。小牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）是一种大分子物质,而实验证明BSA在30min内很少进入胞浆内,因此BSA偶联的皮质酮（BSA-CORT）在30min内不可能与胞浆受体结合而发挥基因组作用。在反应体系内分别加入RU486和ACTI,发现GC依旧能发挥上述快速抑制作用;BSA-CORT亦能在短时间（30min）内发挥上述快速抑制作用。

论文目录

• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1
• 1.2
• 第二章 实验结果
• 2.1
• 2.2
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• [综述]类固醇激素非基因组作用的机制及意义
• 攻读学位期间的研究成果
• 附录
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明