荧光分析实验方法的建立及在生物产品分析中的应用

论文摘要

本实验分析了荧光分析的原理、特点以及在药物含量检测和蔬菜中亚硝酸根残留分析中的应用，并分别对维生素B2进行了荧光分析研究，对亚硝酸根进行了催化荧光分析研究。分析了维生素B2标准品的激发波长和发射波长的扫描，选择并确定了最佳波长。研究了维生素B2荧光分析的实验条件，简化了预处理的过程，减少了实验药品的用量，并达到了方法简便快捷，分析结果较好，精确度较高的目的；通过正交试验确定了测定维生素B2的最佳实验条件和影响因素的强弱顺序，证明了测定时间是荧光分析维生素B2中最大的影响因素。维生素B2在激发波长λex=490.0nm和发射波长λem=512.0nm时，回收率可达到96.58～100.37%，变异系数可控制在0.10%以内。采用正交试验法，得出最佳测定结果为：溶液放置时间为45min、测量温度为12℃和光线强度为暗光。三个因素对维生素B2测定的影响顺序分别为测量时间＞温度＞光线强度。亚硝酸根可以催化中性红的荧光退色反应，且亚硝酸根的含量和退色反应的速率成正比。通过单因素实验分析了各个实验条件的选择，并用均匀试验优化了实验条件，确定出了最佳的影响因素组合。通过马铃薯和洋葱两种根茎类植物中亚硝酸盐残留的测定，可以得出蔬菜的表皮中也含有亚硝酸盐，但含量不是很大。采用本法测定蔬菜中亚硝酸根的残留，在激发波长λex=537.0nm和发射波长λem=595.0nm下变异系数为6.5%，平均回收率可达到100.2%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 荧光分析法简介
• 1.1.1 分子荧光的原理
• 1.1.2 荧光分析法的特点
• 1.1.3 荧光分析法的应用
• 1.1.4 荧光分析法与其他分析方法的区别
• 1.1.5 分子荧光分析仪工作原理
• 1.2 分子荧光分析法分类
• 1.2.1 常规的荧光分析法
• 1.2.1.1 直接测定和间接测定
• 1.2.1.2 多组分混合物的荧光分析
• 1.2.2 同步荧光测定
• 1.2.3 三维荧光光谱技术
• 1.2.4 荧光免疫测定
• 1.2.5 荧光动力学分析
• 1.3 荧光分析方法的影响因素
• 1.3.1 分子结构
• 1.3.2 激发光的照射
• 1.3.3 溶剂
• 1.3.4 温度
• 1.3.5 溶液 pH 值
• 1.4 维生素的概述
• 1.4.1 维生素的功能
• 1.4.2 维生素补充的安全性
• 1.4.3 维生素含量的检测方法
• 1.4.4 检测维生素的意义
• 1.5 亚硝酸盐的概述
• 1.5.1 亚硝酸盐的存在与危害
• 1.5.2 亚硝酸根测定的研究现状、发展动态
• 1.5.2.1 分子光谱法
• 1.5.2.2 电化学分析法
• 1.5.2.3 色谱分析法
• 1.6 本课题的研究目的及内容
• 1.7 荧光分析中需要注意的问题
• 第二章 荧光法测定药物维生素 B2的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验仪器与试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 最佳波长的选择
• 2.3.2 单因素实验
• 2.3.2.1 稳定性实验
• 2.3.2.2 测定温度的选择
• 2.3.2.3 光线强度的选择
• 2.3.2.4 溶液 pH 值的选择
• 2.3.3 正交试验
• 2.3.3.1 因素和水平的选择
• 2.3.3.2 正交试验结果
• 2.3.4 标准曲线的绘制
• 2.3.5 样品的测定
• 2.3.6 精密度实验
• 2.3.7 加标回收率实验
• 第三章 催化荧光法测定蔬菜中亚硝酸根的研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验仪器与试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 最佳波长的选择
• 3.3.2 单因素实验
• 3.3.2.1 中性红用量的选择
• 3.3.2.2 溴酸钾用量的选择
• 3.3.2.3 硫酸用量的选择
• 3.3.2.4 水浴时间对反应体系的影响
• 3.3.2.5 水浴温度对反应体系的影响
• 3.3.3 通过均匀试验确定最佳反应条件
• 3.3.3.1 建立试验方案
• 3.3.3.2 软件的初步设置
• 3.3.3.3 多元回归分析
• 3.3.4 绘制标准曲线
• 3.3.5 样品的预处理及测定
• 3.3.6 精密度实验
• 3.3.7 回收率实验
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢