动物性食品中癸氧喹酯残留检测方法的研究

论文摘要

癸氧喹酯（Decoquinate, DEC）是一种喹诺酮类抗球虫药,20世纪70年代由英国may&mark公司研制成功,2006年在中国上市使用。由于其具广谱的抗球虫活性,使之成为预防和治疗鸡球虫病的首选药物之一。该药在中国使用时间较短,球虫尚未对其产生明显的抗药性,所以广泛用于防治肉仔鸡的球虫病,但在产蛋鸡禁用。目前,中国农业部、日本厚生劳动省均规定其在鸡组织中的最高残留限量（MRLs）。动物口服癸氧喹酯后,在体内吸收、代谢主要是以原型药物为主,同时已发现该药在鼠中还有其他3种代谢物（结构不明）。目前尚未发现在动物源性食品中使用高效液相色谱-串联质谱方法（LC-MS/MS）用于癸氧喹酯在鸡不同组织（肌肉、肝脏、鸡蛋）中的检测。本研究目的是建立一种快速、灵敏、可信的LC-MS/MS检测方法,用于检测鸡组织（肌肉、肝脏）及鸡蛋中癸氧喹酯的残留,同时将该方法用于癸氧喹酯在鸡体内残留消除试验的研究。主要结论如下：1.鸡肌肉、肝脏组织中癸氧喹酯残留检测方法的建立建立了一种陕速、灵敏、可信的LC-MS/MS方法用于癸氧喹酯在鸡肌肉、肝脏中的残留检测。本实验选用选用乙腈作为提取溶剂对组织中的待测物进行提取,OasisTMHLB固相萃取柱净化,以0.1%甲酸水：乙腈（30／70,V／V）作为流动相,XTerra C18色谱柱洗脱。在电喷雾正离子模式（ESI+）下选用多反应监测（MRM）进行待测物的分析。该方法在肌肉、肝脏组织中的检测限与定量限分别为1μg/kg和2.5μg/kg,在2～1000μg/kg浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数R2大于0.994,待测物的回收率在85.3-104.9%之间,日内精密度及日间精密度<10.4%。2.鸡蛋中癸氧喹酯残留检测方法的建立建立了一种快速、灵敏、可信的LC-MS/MS方法用于癸氧喹酯在鸡蛋中残留量的检测。本实验选用乙腈-乙酸乙酯作为提取溶剂对组织中的待测物进行提取,OasisTMHLB固相萃取柱净化,XTerra C18色谱柱洗脱。该方法在鸡蛋中的检测限与定量限分别为0.2μg/kg和0.8μg/kg,在0.8～240μg/kg浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数R2大于0.993,回收率在90.7-101.8%之间,日内精密度及日间精密度<11.4%。3.癸氧喹酯在鸡组织及鸡蛋中残留消除试验的研究本实验通过给肉鸡和蛋鸡饲喂添加癸氧喹酯浓度为27.2ppm的饲料,停药后在不同时间点收集肌肉、肝脏、鸡蛋组织,使用之前建立的LC-MS/MS方法测定组织中癸氧喹酯残留浓度,进行消除试验的研究。结果显示：之前建立的方法可成功用于不同组织中癸氧喹酯的残留检测,同时以本试验为基础确定鸡组织（肌肉、肝脏）中癸氧喹酯的休药期为3天,在鸡蛋中停药后11天达较低的浓度水平。综上所述,本研究建立了鸡组织（肌肉、肝脏）及鸡蛋中癸氧喹酯残留检测的LC-MS/MS方法,并且将该方法成功应用于癸氧喹酯在动物体内残留消除试验的研究,确定了该药在鸡组织（肌肉、肝脏）中的休药期为3天,在鸡蛋中停药后11天该药达较低的浓度水平。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略符号
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1. 球虫病简介及其防治措施
• 1.1 鸡球虫病简介
• 1.2 防治措施
• 2. 癸氧喹酯研究情况
• 2.1 癸氧喹酯概况
• 2.2 药物作用机理的研究
• 2.3 在世界各国的使用情况及对其残留量的规定
• 2.4 耐药性及毒副作用
• 2.5 毒理学研究
• 2.6 药物代谢动力学研究
• 3. 癸氧喹酯药物残留研究进展
• 3.1 样品前处理
• 3.2 检测技术
• 4. 本论文的主要任务
• 5. 研究目的及意义
• 参考文献
• 第二章 鸡肌肉、肝脏组织中癸氧喹酯残留检测方法的建立
• 摘要
• 1. 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 色谱条件的优化
• 2.2 质谱条件的优化
• 2.3 前处理方法的优化
• 2.4 方法学考察
• 2.5 环境温度对检测结果的影响
• 2.6 癸氧喹酯碎片离子的裂解规律探索
• 3. 本章小结
• 参考文献
• Abstract
• 第三章 鸡蛋中癸氧喹酯残留检测方法的建立
• 摘要
• 1. 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 色谱及质谱条件的优化
• 2.2 前处理方法的优化
• 2.3 方法学考察
• 3. 本章小结
• 参考文献
• Abstract
• 第四章 癸氧喹酯在鸡肌肉、肝脏及鸡蛋中残留消除试验的研究
• 摘要
• 1. 试验材料
• 1.1 药品与试剂
• 1.2 仪器设备
• 1.3 饲料
• 1.4 实验动物
• 2. 试验方法
• 2.1 给药方式
• 2.2 样品收集与处理
• 3. 结果与讨论
• 3.1 肌肉、肝脏组织残留消除试验结果
• 3.2 鸡蛋中残留消除试验结果
• 4. 本章小结
• 参考文献
• Abstract
• 全文结论
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文