山茱萸天然防腐成分的研究

论文摘要

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb.etZucc.）的干燥成熟果肉,是药食同源的植物,有多种药用、保健和改善食品特性的功能,并且来源广泛,是一种具有广阔的开发应用前景的天然植物资源。本文以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等九种常见的食品微生物为供试菌种,对山茱萸提取物的抑菌活性进行了系统的研究,包括抑菌谱及最低抑菌浓度的确定;优化抑菌活性物质的提取工艺;探讨提取物对光、热、金属离子和酸碱度的稳定性;同时对抑菌活性物质进行了分离纯化和成分粗测。结果显示如下:1.试验确定了山茱萸提取物的抑菌谱,证明山茱萸提取物对细菌有良好的抑制作用,并测得其对细菌的最低抑菌浓度均低达0.5%,其中对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌最低抑菌浓度低至0.25%,对枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑菌浓度为0.5%,明显强于山梨酸钾;而对霉菌中的米曲霉的抑菌效果好于桔青霉,其对米曲霉的最低抑菌浓度达到1%,但其对酵母菌的抑菌效果则较差,对霉菌和酵母菌的抑菌效果均弱于山梨酸钾。由此可见,二者具有复配提高产品抑菌效果的可能性。2.山茱萸石油醚、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、95%乙醇、70 %乙醇、蒸馏水、50g/L氢氧化钠粗提物对各种供试菌种抑菌活性不同,其中以70%乙醇的提取物的抑菌活性最强。在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,优化出最佳提取工艺条件为:时间4h,浸提温度80℃,乙醇浓度50%,料液比1:10。在此条件下,其金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径是24.3mm,对大肠杆菌的抑菌圈直径是18.2mm。3.山茱萸乙醇提取物具有较好的热稳定性,即使在121℃处理30min后仍具有较高的抑菌活性;山茱萸乙醇提取物对紫外光具有极高的稳定性;山茱萸乙醇提取物对Na+、K+、Ca2+离子稳定。4.山茱萸乙醇提取物抑菌活性pH范围较宽,在pH<7的基质中,表现出较强的抑菌活性,在pH≥7之后无抑菌活性。5.山茱萸乙醇提取物经石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取后分为石油醚萃取物、三氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和剩余水相五部分,经抑菌活性比较,确定各部分抑菌活性顺序为乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>三氯甲烷萃取物>石油醚萃取物。6.乙酸乙酯萃取物经大孔吸附树脂柱层析和薄层层析进一步纯化,展开后得到3个组分,并对其进行粗测,发现其中一个组分可能属于黄酮类物质,另两个组分可能是酚酸类物质。在硅胶板层析的基础上,以金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,米曲霉为指示菌,通过生物自显影法检测活性组分的抑菌性能,结果表明,山茱萸提取物中至少含有2种具有抑菌活性的组分。用薄层层析法对大孔树脂水洗部分进一步分离纯化,最终从中分离并纯化出2个成分,再用核磁共振（1H-NMR）分析,结合一定的化学方法以及有关文献数据对照,分别鉴定为:天冬氨酸,没食子酸。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 食品的腐败变质和防腐剂的研究现状
• 1.1.1 微生物引起的食品变质及防腐剂的抑菌机理
• 1.1.2 食品防腐剂的研究现状
• 1.2 天然植物防腐剂的研究与利用
• 1.2.1 天然植物防腐剂的研究意义
• 1.2.2 植物抑菌活性物质的的提取、分离与结构鉴定
• 1.3 天然抑菌物质抑菌效果的微生物测定法
• 1.3.1 扩散法
• 1.3.2 比浊法
• 1.3.3 稀释法
• 1.4 植物源抑菌活性成分
• 1.5 山茱萸资源及其保健作用
• 1.5.1 山茱萸的生物学特性及地理分布
• 1.5.2 山茱萸的化学成分
• 1.5.3 山茱萸营养功能及其保健食品的研究
• 1.5.4 食品业应用研究
• 1.5.5 山茱萸的应用前景
• 1.6 立题背景与主要研究内容
• 1.6.1 立题背景与研究意义
• 1.6.2 研究内容
• 第二章 山茱萸抑菌谱及最低抑菌浓度的研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 山茱萸提取物的抑菌谱
• 2.2.2 提取物对供试菌的MIC 的确定
• 2.3 小结
• 第三章 山茱萸抑菌活性物质提取工艺的研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 山茱萸不同溶剂粗提液的抑菌活性
• 3.2.2 山茱萸提取工艺的单因素试验结果
• 3.2.3 乙醇提取条件的确定
• 3.3 小结
• 第四章 山茱萸抑菌活性物质稳定性的研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 热处理对山茱萸提取物抑菌活性的影响
• 4.2.2 pH 值对山茱萸提取物抑菌活性的影响
• 4.2.3 紫外光对山茱萸提取物抑菌活性的影响
• 4.2.4 无机盐对山茱萸提取物抑菌活性的影响
• 4.3 小结
• 第五章 山茱萸抑菌活性物质的分离与检测
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 试验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 山茱萸提取物在处理过程中不同部分的抑菌效果
• 5.2.2 山茱萸不同溶剂萃取物的抑菌活性
• 5.2.3 山茱萸抑菌活性成分系统预试验结果
• 5.2.4 山茱萸乙酸乙酯萃取物柱层析洗脱液的抑菌活性
• 5.2.5 山茱萸抑菌成分薄层层析分离结果
• 5.2.6 生物自显影的结果
• 5.2.7 山茱萸抑菌成分化学检识结果
• 5.2.8 抑菌成分的纯化分析
• 5.2.9 抑菌成分的纯度检测
• 5.2.10 化合物结构波谱解析
• 5.3 小结
• 第六章 结论与建议
• 6.1 结论
• 6.1.1 山茱萸抑菌活性成分特性的研究
• 6.1.2 山茱萸抑菌活性成分的提取方法研究
• 6.1.3 山茱萸抑菌活性成分的稳定性的研究
• 6.1.4 山茱萸抑菌活性成分的成分粗测与分离
• 6.2 建议
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 作者简介