西罗莫司缓释片及控释片的研究

论文摘要

西罗莫司（sirolimus,SRL）是一种新型强效免疫抑制剂,临床上可用于器官移植抗排斥作用和治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮、牛皮癣等自身免疫性疾病。但由于其治疗窗窄(4～8ng·ml-1),临床使用时高脂血症的发生率高达44%左右。而研究证明,其不良反应的发生率与药物的血药浓度成正相关,即药物浓度的升高,高脂血症的发生率也随之增高。因此,本文采用缓控释技术制备SRL口服缓控释制剂,以达到降低达峰浓度,维持平稳的血药浓度,减小暴露药物量,降低高脂血症等不良反应发生率,提高临床用药的安全性的目的。采用高效液相色谱法,用于SRL基本理化性质、固体分散体溶出度和含量测定、片剂的体外释放度和含量测定。对SRL大鼠在体肠吸收动力学进行研究。实验表明,西罗莫司在不同肠段十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率常数分别为0.1967,0.1577,0.1220,0.0827h-1,吸收依次降低;在不同药物浓度2.0,5.0,10,20μg·ml-1时分别为0.2461,0.1866,0.2145,0.2316h-1;不同pH值5.4,6.8,7.4时分别为0.2792,0.2974,0.2852h-1;可知其吸收不受药物浓度和pH影响。药物在肠道的吸收呈一级动力学过程,吸收机制为被动扩散。通过考察不同载体、不同药物-载体比例对SRL溶出度的影响,最终选用F68为载体材料制备SRL固体分散体,药物载体比例为1:10。结果表明,采用固体分散技术,使SRL在水中溶解度由0.3μg·ml-1提高到27.29μg·ml-1;溶出速率明显提高,60min内累积溶出度可达到100%。通过X-射线衍射及DSC实验证明药物的结晶峰消失,以无定型的形式存在于分散体中。采用羟丙甲基纤维素（HPMC）等主要辅料,考察了处方因素、工艺因素及释放条件对释药的影响,优选处方制备SRL凝胶骨架缓释片,并对其释药机理进行了初步探讨。结果表明以30%HPMC K4M为骨架材料,2%乳糖为致孔剂,MCC为填充剂时,缓释片具有良好的体外释放行为,符合缓释特性,且其释药过程为骨架溶蚀与药物扩散的共同作用。采用聚氧乙烯（PEO）、氯化钠作为片芯的主要辅料,选用醋酸纤维素（CA）,聚乙二醇400（PEG400）作为包衣材料,丙酮作为包衣溶剂,制备了SRL单层高分子渗透泵控释片。考察了片芯处方组成、包衣膜组成、制备工艺和体外释放条件等因素对释药的影响,并在此基础上,选择氯化钠用量、衣膜增重和PEG400用量作为实验因素,以拟合零级释药方程时的相关系数（r）为考察指标,采用L9（34）正交设计试验优化处方。结果表明,当PEO（Mw20000）用量为30mg,氯化钠用量为70mg,衣膜增重12mg,PEG400用量占CA12%时处方最优,其相关系数r为0.9954,零级释放特征显著。以市售片为对照,对SRL凝胶骨架缓释片进行Beagle犬体内药动学研究。采用微粒子酶联免疫吸附法,用于检测体内血药浓度。采用单剂量双周期交叉实验设计方案,以微粒子酶联免疫吸附法对6只健康Beagle犬体内血药浓度进行测定。单剂量(口服1片,1mg·片-1)给药实验结果为,SRL缓释片与市售片的血药浓度曲线下面积AUC分别为83.8±9.9 ng·h·ml-1和82.1±13.8 ng·h·ml-1、最大血药浓度Cmax分别为4.74±0.585 ng·ml-1和14.0±2.37 ng·ml-1、达峰时间Tmax甜分别为4.00±0.00 h和0.833±0.118 h,相对生物利用度为102.1%。生物等效性分析结果表明自制缓释片和市售片生物等效。体内外相关性判定表明其体内外相关性良好（r=0.9836）。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 1 西罗莫司研究概况
• 2 拟解决的关键性问题
• 3 研究内容
• 仪器与材料
• 1 仪器
• 2 药品与试剂
• 3 实验动物
• 第一章 处方前研究
• 1 方法与结果
• 1.1 最大吸收波长的确定
• 1.2 体外分析方法的建立
• 1.2.1 色谱条件
• 1.2.2 不同溶剂对 SRL含量测定的影响
• 1.2.3 方法专属性考察
• 1.2.4 线性关系考察
• 1.2.5 方法精密度考察
• 1.3 体外释放度测定方法的建立
• 1.3.1 色谱条件
• 1.3.2 溶出介质的选择
• 1.3.3 方法专属性考察
• 1.3.4 线性关系考察
• 1.3.5 方法精密度考察
• 1.3.6 稳定性考察
• 1.4 SRL在不同介质中溶解度的测定
• 1.5 表观油水分配系数的测定
• 2 讨论
• 3 小结
• 第二章 西罗莫司大鼠在体肠吸收动力学研究
• 1 分析方法的建立
• 1.1 肠循环液中酚红的含量测定
• 1.1.1 酚红最大吸收波长的选择
• 1.1.2 线性关系考察
• 1.1.3 酚红浓度测定
• 1.2 肠循环液中 SRL的含量测定
• 1.2.1 色谱条件的建立
• 1.2.2 方法专属性考察
• 1.2.3 SRL在空白肠循环液中的稳定性考察
• 1.2.4 线性关系考察
• 1.2.5 精密度测定
• 1.2.6 肠循环液中SRL回收率测定
• 1.2.7 肠循环液中SRL浓度测定
• 1.3 大鼠在体小肠吸收实验法
• 1.3.1 大鼠在体小肠吸收实验
• 1.3.2 大鼠在体不同肠段吸收实验
• 1.3.3 药物浓度对肠吸收影响的考察
• 1.3.4 介质pH值对肠吸收影响的考察
• 1.4 数据处理方法
• 1.4.1 吸收百分率
• 1.4.2 吸收速率常数
• 2 实验结果
• 2.1 大鼠在体不同肠段吸收实验
• 2.2 不同浓度条件下药物的吸收
• 2.3 不同pH条件下药物的吸收
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 西罗莫司固体分散体的制备
• 1 方法与结果
• 1.1 含量测定方法
• 1.1.1 色谱条件
• 1.1.2 方法专属性考察
• 1.1.3 回收率试验
• 1.1.4 含量测定方法
• 1.2 溶解度测定方法
• 1.3 溶出度测定方法
• 1.3.1 色谱条件
• 1.3.2 溶出介质的选择
• 1.3.3 方法专属性考察
• 1.3.4 回收率试验
• 1.3.5 溶出度测定方法
• 1.4 SRL固体分散体的制备
• 1.4.1 SRL物理混合物的制备
• 1.4.2 SRL固体分散体的制备
• 1.4.2.1 溶剂法制备固体分散体
• 1.4.2.2 溶剂-熔融法制备固体分散体
• 1.5 处方因素考察
• 1.5.1 固体分散体载体种类的选择
• 1.5.2 固体分散体载体用量的选择
• 1.6 物相鉴别
• 1.6.1 体外溶出度曲线法
• 1.6.2 X-射线粉末衍射法
• 1.6.3 差示扫描量热法
• 1.7 固体分散体基本性质考察
• 1.7.1 平衡溶解度测定
• 1.7.2 吸湿量测定
• 1.7.3 在不同介质中的溶出度
• 2 讨论
• 3 小结
• 第四章 西罗莫司凝胶骨架缓释片的研究
• 1 方法与结果
• 1.1 含量测定方法
• 1.1.1 色谱条件
• 1.1.2 方法专属性考察
• 1.1.3 回收率试验
• 1.1.4 含量测定方法
• 1.2 体外释放度测定方法
• 1.2.1 色谱条件
• 1.2.2 方法专属性考察
• 1.2.3 回收率试验
• 1.2.4 释放度测定方法
• 1.3 SRL凝胶骨架缓释片制备工艺
• 1.4 SRL凝胶骨架缓释片单因素考察
• 1.4.1 HPMC规格对药物释放的影响
• 1.4.2 HPMC用量对药物释放的影响
• 1.4.3 致孔剂用量对药物释放的影响
• 1.4.4 填充剂种类对药物释放的影响
• 1.4.5 压片压力对药物释放的影响
• 1.4.6 溶出装置对药物释放的影响
• 1.4.7 转速对药物释放的影响
• 1.4.8 溶出介质对药物释放的影响
• 1.5 自制 SRL凝胶骨架缓释片处方确定
• 1.6 SRL凝胶骨架缓释片释药机理的初步探讨
• 2 讨论
• 3 小结
• 第五章 西罗莫司单层高分子渗透泵控释片的研究
• 1 方法与结果
• 1.1 含量测定方法
• 1.1.1 色谱条件
• 1.1.2 方法专属性考察
• 1.1.3 回收率试验
• 1.1.4 含量测定方法
• 1.2 体外释放度测定方法
• 1.2.1 色谱条件
• 1.2.2 方法专属性考察
• 1.2.3 回收率试验
• 1.2.4 释放度测定方法
• 1.3 SRL单层高分子渗透泵控释片制备工艺
• 1.3.1 制备片芯
• 1.3.2 包衣
• 1.4 SRL单层高分子渗透泵控释片单因素考察
• 1.4.1 片芯组成对药物释放的影响
• 1.4.1.1 PEO分子量对药物释放的影响
• 1.4.1.2 PEO用量对药物释放的影响
• 1.4.1.3 促渗剂种类对药物释放的影响
• 1.4.1.4 促渗剂用量对药物释放的影响
• 1.4.2 制备工艺对药物释放的影响
• 1.4.2.1 片剂硬度对药物释放的影响
• 1.4.2.2 释药孔大小对药物释放的影响
• 1.4.3 包衣膜对药物释放的影响
• 1.4.3.1 PEG分子量对药物释放的影响
• 1.4.3.2 PEG用量对药物释放的影响
• 1.4.3.3 衣膜增重对药物释放的影响
• 1.4.4 体外释放条件对药物释放的影响
• 1.4.4.1 溶出装置对药物释放的影响
• 1.4.4.2 转速对药物释放的影响
• 1.4.4.3 溶出介质对药物释放的影响
• 1.5 正交实验
• 1.5.1 正交实验设计
• 1.5.2 评价指标的选择
• 1.5.3 正交实验数据分析
• 1.6 处方确定
• 2 讨论
• 3 小结
• 第六章 西罗莫司凝胶骨架缓释片 Beagle犬体内药动学研究
• 1 方法与结果
• 1.1 体内分析方法的建立
• 1.1.1 标本的预处理
• 1.1.2 标准曲线的制定
• 1.1.3 测定方法
• 1.1.4 反应原理
• 1.1.5 结果
• 1.2 药动学研究实验方法
• 1.2.1 受试制剂和参比制剂
• 1.2.2 实验动物
• 1.2.3 给药方法及采样时间
• 1.2.4 血药浓度测定结果
• 1.3 数据处理
• 1.3.1 隔室模型药动学参数
• 1.3.2 非隔室模型药动学参数
• 1.3.3 相对生物利用度
• 1.3.4 生物等效性评价
• 1.3.4.1 方差分析法
• 1.3.4.2 双单侧检验和（1-2α）置信区间法
• 1.3.5 体内外相关性评价
• 2 讨论
• 3 小结
• 全文结论
• 参考文献
• 发表文章目录
• 致谢