论文摘要
目的制作在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型和心肌缺血预适应模型,观察心肌线粒体形态结构及损伤程度,检测心肌线粒体内缝隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）的蛋白表达水平变化并应用PKC- HSP90信号通路特异性阻断剂进行干预,以期初步探讨线粒体内Cx43在缺血预适应中的作用及PKC- HSP90信号通路参与调控的可能机制。方法建立SD大鼠在体心肌IRI和IP模型,90只大鼠随机分为6组:假手术组（Sham组,n=10）、缺血/再灌注组（IR组,n=16）、缺血预适应组（IP组,n=16）、白屈菜季铵碱+缺血预适应组（CH+IP组,n=16）及格尔德霉素+缺血预适应组（GA+IP组,n=16）,白屈菜季铵碱+格尔德霉素+缺血预适应组（CH+GA+IP组,n=16）,大鼠缺血（I）30min后再灌注（R）60min(R60min)、或120min(R120min)。HE染色光镜分析细胞形态结构;全自动生化分析仪检测CK-MB、LDH;透射电子显微镜半定量观察心肌细胞超微结构及线粒体的损伤程度;透射电子显微镜鉴定提取后的心肌线粒体的完整性及纯度;Western Blot方法检测线粒体内总Cx43（TCx43）蛋白的相对表达水平。结果1.经差速离心结合Percoll密度梯度离心分离纯化线粒体后,心肌线粒体的双层膜结构清晰,嵴排列整齐,并且基本保存完整。2. IR120min组CK-MB及LDH较Sham组明显增高（P<0.05）;IP120min组则明显低于IR120min组（P<0.05）;CH+IP120min组、GA+IP120min组、CH+GA+IP120min组CK-MB及LDH均较IP120min组明显增高（P<0.05）;但与IR120min组比较酶指标无明显统计学意义。CH+IP120min组,GA+IP120min组,CH+GA+IP120min组3组间酶学指标无显著统计学差异。3.心肌线粒体损伤程度及半定量分析显示,Sham组大鼠心肌线粒体结构正常。IP120min组大鼠心肌线粒体损伤主要以1-2级为主,平均分数1.42±0.19。IR120min、CH+IP120min、GA+IP120min、CH+GA +IP120min各组大鼠心肌线粒体损伤以2-3级为主,平均分数分别为2.63±0.13、2.29±0.23、2.33±0.18、2.59±0.48,均明显高于IP120min组评分（F=36.83,P<0.01）。IP120min组心肌线粒体损伤程度明显低于IR120min组（P<0.01）,且凋亡心肌细胞少见。CH+IP120min组和GA+IP120min组心肌线粒体损伤程度低于IR120min组（P<0.01）,明显高于IP120min组（P<0.01）。CH+GA+IP120min组与IR120min组及CH+IP120min组与GA+IP120min组间均无显著差异（P>0.05）。CH+GA+IP120min组心肌线粒体损伤程度高于CH+IP120min组和GA+IP120min组（P<0.05）。4、与Sham组比较,IR组缺血区R60min和R120minTCx43显著下降,以PCx43为主,P<0.05,且随时间的延长TCx43进一步下降,R120min较R60minTCx43显著下降,P<0.05;与IR组比较,IP组缺血区R60min ,R120minTCx43显著增高,以PCx43为主,P<0.05;与IP组比较,CH+IP120min组,GA+IP120min组,CH+GA+IP120min各组心肌线粒体内的TCx43均显著下降,P<0.05,且随时间的延长TCx43进一步下降;CH+GA+IP120min组较GA+IP120min组,CH+IP120min组比较,心肌线粒体内的TCx43蛋白水平均显著下降（P<0.05）。结论1.采用差速离心结合Percoll密度梯度离心法可简单快速成功分离大鼠心肌线粒体。2.不仅在体大鼠IR组缺血区心肌线粒体损伤评分明显高于IP组,而且单用或联用PKC和HSP90特异性阻断剂组在体大鼠的心肌线粒体损伤评分均明显高于IP组。3.较在体大鼠IR组IP可明显提高再灌注缺血区线粒体内TCx43和PCx43蛋白表达水平;若单用或联用PKC- HSP90特异性阻断剂组则可部分逆转之。提示:1.差速离心结合Percoll密度梯度离心法为一较满意的分离心肌线粒体的实用方法;2.线粒体内Cx43参与了在体大鼠IP的心肌保护作用;PKC- HSP90信号通路可能为其调控机理之一。
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- [1].头孢曲松通过抑制Cx43磷酸化参与治疗创伤性颅脑损伤的机制[J]. 井冈山大学学报(自然科学版) 2019(06)
- [2].非霍奇金淋巴瘤侵犯骨髓时Cx43表达情况[J]. 现代肿瘤医学 2020(05)
- [3].皮肤恶性黑色素瘤患者Cx43表达水平及预后影响因素分析[J]. 安徽医学 2020(02)
- [4].Cx43在血管平滑肌及血管重构中的研究进展[J]. 重庆医科大学学报 2016(12)
- [5].Cx43与神经精神疾病的研究进展[J]. 医学综述 2020(06)
- [6].连接蛋白Cx43在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义[J]. 临床肿瘤学杂志 2020(08)
- [7].氧糖剥离对星形胶质细胞CX43蛋白表达及分布的影响[J]. 中风与神经疾病杂志 2013(10)
- [8].近紫外线对兔晶状体上皮细胞Cx43蛋白影响的研究[J]. 重庆医科大学学报 2009(07)
- [9].Cx43在人胚胎早期食管上皮组织中的表达[J]. 现代生物医学进展 2008(05)
- [10].维甲酸对睾丸癌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达及其功能的影响[J]. 四川大学学报(医学版) 2013(06)
- [11].犬交感神经末梢、Cx43的分布与阵发性房颤的相关性研究[J]. 临床心电学杂志 2009(02)
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- [15].黄连解毒汤有效部位对脑缺血半暗带区星形胶质细胞活化及Cx43表达的影响[J]. 中草药 2014(13)
- [16].新疆哈、汉族原发性高血压与Cx43基因多态性的相关性[J]. 实用医学杂志 2014(23)
- [17].穴位、经脉与Cx43的相关性研究(英文)[J]. World Journal of Acupuncture-Moxibustion 2008(04)
- [18].不同灸量隔姜灸对高脂血症大鼠施灸局部Cx43表达的影响[J]. 中国老年学杂志 2013(08)
- [19].戊四氮致痫幼鼠颞叶和海马区Cx43的表达及天麻素干预[J]. 兰州大学学报(医学版) 2008(03)
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- [25].缝隙连接蛋白Cx43介导高糖诱导的气道上皮结构受损[J]. 中国免疫学杂志 2016(05)
- [26].不同恶化程度胃癌细胞系的细胞间隙连接通讯功能及Cx43表达的差异[J]. 北京师范大学学报(自然科学版) 2011(01)
- [27].丙泊酚对失血性休克致兔心肌损伤Cx43表达的影响[J]. 解放军医药杂志 2016(12)
- [28].大鼠精索静脉曲张对睾丸生精细胞Cx43表达的影响[J]. 北华大学学报(自然科学版) 2016(05)
- [29].七氟醚预处理对缺血再灌注心肌细胞CX43蛋白表达的影响[J]. 山东医药 2012(28)
- [30].叶酸对胎鼠心肌细胞Cx43表达的影响[J]. 承德医学院学报 2012(04)