论文摘要
以团头鲂为研究对象,以酪蛋白和明胶为蛋白源、糊精为糖源、大豆油为脂肪源,配制维生素D3添加量分别为0,500,1000,2000,4000,8000IU/kg的六组试验日粮。选择健康,规格、重量基本一致（初均重20.60±0.15g）的团头鲂随机分为六组,每组四个重复,每个重复20尾鱼。在可控温循环流水圆形蓄养槽(规格为（φ820×700mm）内进行养殖,团头鲂驯养15天后用对照组日粮投喂10天,鱼体称重,采集样品作为初始数据,然后开始分组投喂,进行为期90天的生长试验,分别在投喂45天和90天后采集样品。1.维生素D3对团头鲂生长性能的影响。团头鲂摄食不添加维生素D3的饲料,表现出生长不良,游动缓慢,体色较浅,头盖骨透明、薄而易碎等缺乏症；与无维生素D3组相比,投喂45天后2000IU/kg维生素D3组显著提高了团头鲂的增重率和特定生长率,降低了饵料系数。投喂90天后维生素D3缺乏的试验组增重率和特定生长率显著降低,饵料系数升高。体成分分析表明：鱼体灰分和钙含量以及肌肉中粗灰分随着维生素D3添加量的升高而显著增加,与无维生素D3组相比,500IU/kg和1000IU/kg维生素D3组显著提高了血清中钙和磷含量。显著降低了血清中甘油三脂（TG）的浓度,2000IU/kg维生素D3组显著提高了血清中胰岛素（Ins）含量。由试验结果可知团头鲂饲料中维生素D3的添加量为500IU/kg可以防止缺乏症的发生,添加量1000-2000IU/kg可以促进鱼体生长。2.维生素D3对团头鲂免疫、抗氧化以及肝脏中HSP70mRNA基因表达的影响。通过测定团头鲂血清非特异性免疫指标、肝脏组织中抗氧化指标以及皮质醇水平和肝脏中HSP70mRNA的表达水平来评价饲料中不同水平的维生素D3对团头鲂免疫、抗氧化和抗应激性能的影响,试验结果表明,试验开始时各试验组各项指标均处于同一水平无显著差异,随着养殖时间的延长团头鲂各项血液免疫指标和肝脏抗氧化指标均呈上升趋势。与对照组相比,1000IU/kg和2000IU/kg试验组不同程度的提高了团头鲂血清中碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、补体C4、和白细胞的呼吸爆发活性以及肝脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶活性（POD）和肝脏组织中HSP70mRNAs的表达水平（P<0.05）,降低了谷草转氨酶（AST）活性和皮质醇含量（P<0.05）。由以上试验结果可知日粮中维生素D3在1000IU/kg-2000IU/kg的添加范围内有利于提高团头鲂的非特异性免疫能力、抗氧化能力和应激蛋白的表达。3.维生素D3对团头鲂感染嗜水气单胞菌后血液和肝脏生理生化指标的影响。养殖试验结束后,经腹腔注射感染嗜水气单胞菌,并在攻毒前后检测团头鲂血液和肝脏的生化指标,另从各蓄养槽中取10尾鱼进行同样的攻毒试验,统计攻毒后各时间点团头鲂的累积死亡率。与对照组相比,2000IU/kg和4000IU/kg试验组不同程度的提高了团头鲂血清中碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、补体C3、补体C4以及肝脏组织中超氧化物歧化酶,过氧化物酶活性和总抗氧化能力（T-AOC）,降低了谷草转氨酶活性、皮质醇含量。感染后的累积死亡率显示2000IU/kg试验组团头鲂的累积死亡率最低。由以上试验结果可知,日粮中维生素D3在2000IU/kg和4000IU/kg的添加范围内有利于提高团头鲂的免疫、抗氧化能力,日粮中维生素D3添加量为2000IU/kg时有利于降低病原感染后的死亡率。4.高剂量的维生素D3对团头鲂生长、非特异性免疫以及肝脏和肠道超微结构的影响。以团头鲂为研究对象,以酪蛋白和明胶为蛋白源、糊精为糖源、大豆油为脂肪源,配制维生素D3添加量分别为2000,200OOOIU/kg的两组试验日粮。选择健康,规格、重量基本一致（初均重20.60±0.15g）的团头鲂随机分为2组,每组四个重复,每个重复20尾鱼。在可控温循环流水圆形蓄养槽（规格为φ820x700mm）内进行养殖,团头鲂驯养15天后用对照组日粮投喂10天,鱼体称重,采集样品作为初始数据,然后开始分组投喂,并在45天和90天后采集样品。随后从各蓄养槽中取10尾鱼经腹腔注射感染嗜水气单胞菌,统计攻毒后各时间点鱼的累积死亡率。由试验结果可知,与正常组相比高剂量的维生素D3对团头鲂生长指标、鱼体成分以及各项血液生化指标,均有不同程度的下降。但各项指标间没有统计学上的显著差异,说明团头鲂对200OOOIU/kg维生素D3有一定耐受性。但是高剂量维生素D3降低了团头鲂的免疫和抗氧化指标,并对肝细胞和肠道的结构形态有一定影响。与2000IU/kg试验组相比,200OOOIU/kg试验组显著降低了团头鲂肝脏中过氧化物酶、总抗氧化能力以及鱼血清中皮质醇水平和肝脏HSP70mRNA的表达水平。与正常组相比,高剂量试验组经嗜水气单胞菌感染后死亡率升高。石蜡切片和扫描电镜切片显示饲料中高剂量的维生素D3对团头鲂肝脏和肠道组织结构以及超微结构造成一定的损伤。
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