畜禽产品中残留有毒有害物质检测方法的研究

论文摘要

黄曲霉毒素（aflatoxin, AFT）是目前发现的多种由霉菌所产生有致癌作用的毒素中最强的一种,是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,主要有B1, B2, G1, G2, M1, M2等。它主要诱使动物发生肝癌,也能诱发胃癌,肾癌,直肠癌及乳腺,卵巢,小肠等部位的癌症。世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许浓度为15ug/kg。我国政府对牛奶中黄曲霉毒素M1的最高允许量为0.5 ug/kg。在自然界中,砷的存在形式主要有：一甲基砷化合物（MMA）、二甲基砷化合物（DMA）、三甲基砷的氧化物（TMAO）、砷酸盐（AsV）、亚砷酸盐（AsⅢ）、砷甜菜碱（AsB）、砷胆碱（AsC）和砷糖（AsS）等多种形态,其中有机砷中仅有一甲基砷化合物（MMA）和二甲基砷化合物（DMA）有较小的毒性,而As（Ⅴ）、As（Ⅲ）等无机砷（iAs）毒性很高,因此也可以简单的认为无机砷的含量基本能够代表有毒砷的含量,这也是测量无机砷含量的卫生学基础。本论文通过对牛奶及奶粉进行前处理优化,建立了超高效液相色谱-串联荧光检测仪检测牛奶、奶粉中黄曲霉毒素M1的方法：通过对动物源性食品进行样品前处理优化,建立了氢化物原子发生荧光（HGAFS）检测动物源性食品中残留的重金属砷的方法。并进行了方法学考察。方法皆具有快速、灵敏、选择性高的特点。本论文所作的工作及结论如下：1.建立了超高效液相色谱-串联荧光检测仪检测牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1残留的方法。以Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,18：18：64甲醇：乙腈：水溶液作为流动相,黄曲霉毒素M1在五分钟内达到完全分离。线性相关系数R大于0.9984,在10ppt、20ppt、50ppt、100ppt、200ppt五个浓度的添加回收实验中,回收率为85.48%94.78%。应用此方法检测了从全国各地抽检的的106份牛奶和奶粉样品,结果表明样品中没有发现超标的黄曲霉毒素残留。2.在GBT5009.11-2003的基础上对肉类产品中无机砷（iAs）的检测在前处理方面进行了进一步的细化和改进,使实验过程更为简单,实验结果更为稳定,准确度也得到了很大的提高。应用此方法检测了全国各地抽检的40份肉类样品,结果表明样品中没有发现超标的重金属砷残留。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章:绪论
• 1.1 黄曲霉毒素简介
• 1.1.1 黄曲霉毒素对人和动物健康的危害
• 1.1.2 黄曲霉毒素的基本性质
• 1.1.3 黄曲霉毒素的产生因素
• 1.1.4 部分国家和地区对黄曲霉毒素的检验检疫要求
• 1.1.5 黄曲霉毒素M1残留检测的样品前处理方法
• 1.1.6 黄曲霉毒素M1残留的检测方法
• 1.1.6.1 薄层分析法（TLC）
• 1.1.6.2 酶联免疫吸附法（ELISA）
• 1.1.6.3 荧光光度法（FS）
• 1.1.6.4 液相色谱法（HPLC/FLR）
• 1.2 重金属简介
• 1.2.1 重金属的化学形态
• 1.2.2 重金属元素在生物体内的生化特点
• 1.2.3 食品中重金属污染的来源
• 1.2.4 国内外对食品中重金属污染的限量
• 1.2.5 砷（As）简介
• 1.2.6 重金属砷对人体健康的影响
• 1.2.7 无机砷（As）的分离技术
• 1.2.7.1 氢化物发生法（HG）
• 1.2.7.2 色谱法
• 1.2.7.3 毛细管电泳法（CE）
• 1.2.7.4 溶剂萃取法
• 1.2.7.5 离子交换法
• 1.2.8 检测技术
• 1.2.8.1 吸光光度法
• 1.2.8.2 原子吸收光谱法（AAS）
• 1.2.8.3 电感耦合等离子法（ICP）
• 1.2.8.4 原子荧光光谱法（AFS）
• 1.3 本论文研究的意义和主要任务
• 第二章 牛奶及奶粉中残留黄曲霉毒素M1含量UPLC-FLR检测方法的优化及应用
• 2.1. 前言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 试剂与样品
• 2.2.2 实验使用的主要设备及仪器
• 2.2.3 标准储备液、校正曲线及流动相的配制
• 2.2.3.1 黄曲霉毒素M1标准储备液的配制
• 2.2.3.2 黄曲霉毒素M1标准曲线的配制
• 2.2.3.3 流动相的配制
• 2.2.4 主要检测仪器条件
• 2.2.5 黄曲霉毒素M1的分离提取
• 2.3 实验结果及讨论
• 2.3.1 液相条件的优化
• 2.3.2 样品前处理条件的优化
• 2.3.2.1 过柱样品体积的选择
• 2.3.2.2 免疫亲和柱保存及重复使用的选择
• 2.3.3 方法学考察
• 2.3.3.1 线性关系
• 2.3.3.2 回收率与精密度
• 2.4 实际样品的检测
• 2.5 小结
• 第三章:肉制品中残留重金属砷（As）含量检测方法的优化及应用
• 3.1 前言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 试剂与样品
• 3.2.2 设备及仪器
• 3.2.3 标准储备液及标准曲线的配制
• 3.2.3.1 标准储备液
• 3.2.3.2 标准曲线的配制
• 3.2.3.3 载流液及还原剂的配制
• 3.2.4 实验仪器与实验条件
• 3.2.5 样品的前处理及上机操作
• 3.3 结果、讨论及应用
• 3.3.1 消解酸度的选择
• 3.3.2 消解温度的选择
• 3.3.3 消解时间的选择
• 3.3.4 还原时间的选择
• 3.3.5 消泡剂正辛醇添加量的选择
• 3.3.6 方法学考察
• 3.3.6.1 线性关系
• 3.3.6.2 精密度
• 3.4 实际样品检测
• 3.5 小结
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 导师简介