论文摘要
目的:本课题旨在通过应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA法）和流式细胞术检测急性白血病患儿血浆SDF-1水平和骨髓细胞表面CXCR4的表达情况,并探讨其临床意义。方法:1.病例及分组:本研究将2006年5月2007年10月于我院确诊的初诊未治急性白血病患儿43例作为实验组,其中包括急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL）组29例、急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia, AML）组14例。ALL组包括L1 5例和L2 24例;所有ALL患儿都进行了流式细胞学分析:T-ALL 2例、B-ALL 27例。AML组包括M2 3例、M3 6例、M4 3例和M5 2例。除2例失访外,其余41例患儿在首次化疗缓解后,经继续治疗观察六个月,均为完全缓解,将其作为缓解组;再继续治疗观察两个月后,38例为持续完全缓解,3例呈不良预后（均为缓解后复发）。实验组根据有无髓外浸润症状又分为髓外浸润组（37例）和非髓外浸润组（6例）。同期选择10例非恶性血液病患儿及20例健康儿童作为对照组。2.标本采集及处理:从实验组和对照组中分别采集外周血和骨髓液,之后应用ELISA法和流式细胞术分别对SDF-1和CXCR4进行检测。3.统计学分析:所得数据采用SPSS13.0软件进行统计学处理,统计学方法采用t检验、t′检验、方差分析、秩和检验及Pearson相关分析,结果表示为均数±标准差,以P<0.05作为显著性界限。结果:1血浆SDF-1水平1.1实验组患儿的血浆SDF-1水平为802.94±244.00（pg/ml）,对照组为391.83±119.77（pg/ml）,实验组明显高于对照组,其差异具有统计学意义（t′=9.53,P<0.05）。1.2 ALL组患儿的血浆SDF-1水平为871.64±240.87（pg/ml）,AML组为660.64±187.20（pg/ml）,ALL组高于AML组,两者间的差异具有统计学意义（t=2.88,P<0.05）。SDF-1水平在L1组与L2组、T-ALL组与B-ALL组比较,其差异均无统计学意义（P>0.05）;SDF-1水平在AML各亚型组（M2、M3、M4、M5）比较,亦无统计学意义（P>0.05）。1.3在41例缓解组中,初诊时血浆SDF-1水平为799.09±241.21（pg/ml）,缓解后为549.96±210.91（pg/ml）,两者比较,其差异具有统计学意义（t=6.96,P<0.05）。并且缓解后的SDF-1水平高于对照组,两者间的差异具有统计学意义（t′=4.00,P<0.05）。1.4在不良预后的3例患儿中（均为缓解后再次复发）,血浆SDF-1水平在初诊时、缓解时及复发时分别为791.59±254.56、699.03±238.97、926.60±138.29（pg/ml）,三者比较结果示:初诊时和复发时的SDF-1水平高于缓解时,其差异均具有统计学意义（P<0.05）;而初诊时与复发时的SDF-1水平比较,其差异无统计学意义（P>0.05）。1.5 37例髓外浸润组患儿初诊时血浆SDF-1水平为815.91±248.95（pg/ml）,6例非髓外浸润组患儿初诊时SDF-1水平为722.93±211.97（pg/ml）,两者比较,其差异无统计学意义（t=0.86,P>0.05）。1.6实验组患儿的血浆SDF-1水平与外周血白细胞计数（WBC）呈正相关关系,相关系数为0.57（P<0.05）;与HGB及PLT无相关性（P>0.05）。2 CXCR4的表达情况2.1 CXCR4在实验组患儿的相对荧光强度（69.14±37.13）明显高于对照组（4.78±1.62）,两者间的差异具有统计学意义（t′=11.32,P<0.05）。2.2 CXCR4在ALL组的相对荧光强度（89.42±26.33）明显高于AML组（27.16±12.02）,两者间的差异具有统计学意义（t′=10.64,P<0.05）。2.3 CXCR4在L1组与L2组的相对荧光强度比较,其差异无统计学意义（P>0.05）;而在T-ALL组高于B-ALL组,其差异有统计学意义（P<0.05）。CXCR4在AML各亚型组（M2、M3、M4、M5）的相对荧光强度比较:M2组高于M3组,M4组高于M3组,其差异均有统计学意义（P<0.05）,余两两比较,其差异均无统计学意义（P>0.05）。而M4+M5组与M2组、M3组分别比较结果示:M4+M5组高于M2组、M3组,其差异均有统计学意义（P<0.05）。2.4髓外浸润组患儿初诊时CXCR4的相对荧光强度明显高于非髓外浸润组,其差异具有统计学意义（u=32,P<0.05）。2.5实验组患儿CXCR4的相对荧光强度与外周血白细胞计数（WBC）呈正相关关系,相关系数为0.58（P<0.05）;与HGB及PLT无相关性（P>0.05）。3实验组患儿CXCR4的相对荧光强度与血浆SDF-1水平呈正相关关系,相关系数为0.70（P<0.05）。结论:1 SDF-1和CXCR4在儿童急性白血病初诊时为高水平表达,提示它们可以作为急性白血病的一种检测指标。2 SDF-1水平和CXCR4的表达在ALL明显高于AML,说明它们的表达水平与急性白血病的类型具有一定相关性。3 SDF-1在急性白血病患儿初诊时为高水平表达,在缓解时表达水平下降,而在复发时又再次上升,提示动态检测SDF-1的水平,有助于判断病情发展、估计预后。4急性白血病患儿骨髓细胞表面CXCR4的高表达与髓外浸润和初诊时高白细胞计数密切相关。
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