姜黄素防治细菌脓毒症的实验研究

论文摘要

背景与目的脓毒症是由严重细菌感染引起的全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）的晚期失代偿表现,可导致感染性体克（septic shock）、多器官功能障碍综合症（multiple organ dysfuction syndrome, MODS）。近年来,虽然大量广谱、高效抗生素的应用为临床治疗脓毒症提供了有力的措施,但并没有从根本上改变脓毒症患者高病死率的现状。姜黄素（Curcumin,Cur）具有拮抗脂多糖诱发的炎症反应的作用,本课题将从动物水平观察姜黄素对大肠埃希菌感染导致的细菌脓毒症的防治作用,并进一步从细胞分子水平探讨其作用机制。方法（1）体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,观察姜黄素对LPS诱导RAW264.7细胞释放TNF-α（tumor necrosis factor-α）和NO（nitric oxide）的影响;（2）建立小鼠脓毒症模型,观察姜黄素对大肠埃希菌感染小鼠的保护作用;（3）以蛋白免疫印迹法分析姜黄素对LPS诱导RAW264.7细胞NF-кB核转移的影响;（4）以蛋白免疫印迹分析姜黄素对RAW264.7细胞Hsp70表达的影响。结果（1）姜黄素显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞的TNF-α和NO释放,并具有明显的量效关系;（2）100、200 mg/kg姜黄素显著降低大肠埃希菌感染小鼠的死亡率,降低血清中TNF-α和NO的含量,并减轻细菌脓毒症小鼠的肝脏损害;（3）姜黄素具有明显的抑制LPS诱导RAW264.7细胞NF-кB核转移的作用;（4）姜黄素能够诱导RAW264.7细胞表达Hsp70蛋白,并呈明显的时效和量效关系。结论姜黄素对细菌脓毒症小鼠具有显著保护作用,其机制可能与姜黄素上调单核巨噬细胞Hsp70蛋白的表达,进而抑制NF-кB的活化,并与抑制单核巨噬细胞释放TNF-α和NO等炎症因子有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 姜黄素对LPS诱导RAW264.7释放炎症因子的影响
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 3.1 姜黄素对RAW264.7细胞释放 TNF-α的影响
• 3.2 姜黄素对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞释放TNF-α的影响
• 3.3 姜黄素对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的响
• 4 讨论
• 5 结论
• 第二部分 姜黄素对脓毒症小鼠的保护作用
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 3.1 血浆内毒素的检测
• 3.2 姜黄素对细菌脓毒症小鼠血清TNF-α和NO 的影响
• 3.3 姜黄素对脓毒症小鼠血清ALT 和AST 的影响
• 3.4 肝脏病理改变
• 3.5 姜黄素对脓毒症小鼠生存率的影响
• 4 讨论
• 5 结论
• 第三部分 姜黄素抗炎作用机制的探讨
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 3.1 LPS 刺激对 RAW264.7 细胞 NF-kB （ p65 ）核移位的影响
• 3.2 姜黄素对 LPS 刺激 RAW264.7 细胞 NF-кB （ p65 ）核移位的影响
• 3.3 姜黄素对 RAW264.7 细胞 HSP70 蛋白的影响
• 4 讨论
• 5 结论
• 全文结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢