黑曲霉诱导子和水杨酸对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响

论文摘要

本研究以多年生草本植物虎杖的幼嫩茎段为外植体,以其诱导出的愈伤组织为材料,通过添加黑曲霉诱导子和水杨酸,研究虎杖愈伤组织的白藜芦醇合成过程中诱导子对其影响。主要研究结果如下:（1）诱导子筛选用黑曲霉、青霉和灰葡萄孢的粗体物为诱导子,对愈伤组织进行诱导,结果表明,这三种诱导子均对白藜芦醇的积累有一定的促进作用,其中黑曲霉诱导子对白藜芦醇的促进作用最为显著,比对照提高了50.2%。（2）黑曲霉诱导子对白藜芦醇含量的影响对黑曲霉诱导子浓度、加入时间、诱导培养时间进行筛选。结果表明,当在接种后第14d加入100mg/L的黑曲霉诱导子,诱导6d的效果最好,可以使处理中白藜芦醇的含量比对照高2.25倍。（3）水杨酸对白藜芦醇含量的影响通过对水杨酸添加浓度、加入时间、诱导培养时间的筛选,发现在接种后第14d加入7mg/L的水杨酸,诱导6d的效果最好,可以使白藜芦醇比对照高近1倍。（4）黑曲霉诱导子、水杨酸、苯丙氨酸协同作用对白藜芦醇含量的影响通过添加黑曲霉诱导子、水杨酸、苯丙氨酸的不同组合,发现各组合对白藜芦醇的合成均有一定促进作用,黑曲霉诱导子-水杨酸-苯丙氨酸组合对白藜芦醇的积累效果最好。（5）黑曲霉诱导子活性成分对黑曲霉诱导子成分进行分离,结果表明经多糖组处理后的诱导子大大提高了愈伤组织中白藜芦醇的合成能力,经其处理后的白藜芦醇的相对含量高于对照及其他处理。而经蛋白质组处理后的诱导子对愈伤组织中白藜芦醇的合成有轻微的抑制作用。（6）内源脱落酸含量通过对黑曲霉诱导子处理中ABA含量的测定,发现诱导处理中的ABA先呈急剧上升趋势,在第4d达到峰值,随后呈缓慢下降趋势,而对照中的ABA在整个过程都呈缓慢上升趋势,ABA在处理的整个过程都大于对照。（7）苯丙氨酸裂解酶活性通过对处理中PAL活性进行测定发现,对照和处理的PAL活性变化趋势一致,均是先上升后下降,处理的PAL活性大于对照。在处理中,诱导前4d PAL活性迅速增加,此后又快速下降,在第4d达到峰值。对照中PAL活性先缓慢上升,然后下降,在第6d达到峰值。（8）过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧物岐化酶活性添加黑曲霉诱导子对这三种酶活性都有一定影响。对处理中POD活性的测定结果表明,处理和对照的变化趋势不同,处理的变化趋势为降-升-降-升-降趋势,对照呈略升-降-升的趋势;对CAT活性的测定结果表明,对照和处理的变化趋势基本一致,呈升-降-升-降的趋势;对SOD活性的测定结果表明,处理和对照的变化趋势不同,处理的变化趋势为降-升-降-升-降,对照的为降-升-降。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩略符号与中英文对照表
• 1.前言
• 2.综述部分
• 2.1 白藜芦醇相关研究进展
• 2.1.1 白藜芦醇的理化性质
• 2.1.2 白藜芦醇的药理作用
• 2.1.3 白藜芦醇在自然界的分布及应用状况
• 2.1.4 白藜芦醇在虎杖中的相关研究
• 2.2 诱导子对植物次生代谢物的影响及应用
• 2.2.1 诱导子的分类
• 2.2.2 诱导子调节植物产生次生代谢物的作用机理
• 2.2.3 诱导子对植物次生代谢合成途径及细胞生理反应的影响
• 2.2.4 影响诱导子作用效果的因素
• 2.2.5 真菌诱导子在植物次生代谢物产生上的应用
• 3.本研究目的与意义
• 4.材料与方法
• 4.1 实验材料
• 4.2 试验设计
• 4.2.1 真菌诱导子的制备
• 4.2.2 真菌诱导子的筛选
• 4.2.3 水杨酸浓度、加入时间、诱导培养时间的筛选
• 4.2.4 黑曲霉诱导子、水杨酸和苯丙氨酸协同作用
• 4.2.5 真菌诱导子活性成分
• 4.2.6 生理生化指标的测定
• 4.3 项目测定方法
• 4.3.1 愈伤组织生长周期的测定
• 4.3.2 愈伤组织中白藜芦醇含量的测定
• 4.3.3 脱落酸的测定
• 4.3.4 酶活性的测定
• 4.4 数据统计分析
• 5.结果与分析
• 5.1 真菌诱导子对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响
• 5.1.1 愈伤组织的生长曲线
• 5.1.2 不同种类真菌诱导子对愈伤组织中白藜芦醇含量的影响
• 5.1.3 不同浓度的黑曲霉诱导子对愈伤组织中白藜芦醇含量的影响
• 5.1.4 不同时间加入黑曲霉诱导子对愈伤组织生物量和白藜芦醇含量的影响
• 5.1.5 加入黑曲霉诱导子后不同培养时间对愈伤组织中白藜芦醇含量的影响
• 5.2 水杨酸对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响
• 5.2.1 水杨酸添加浓度的筛选
• 5.2.2 不同时间加入水杨酸对愈伤组织生物量和白藜芦醇含量影响
• 5.2.3 加入水杨酸后不同培养时间对愈伤组织中白藜芦醇含量影响
• 5.3 黑曲霉诱导子、水杨酸和苯丙氨酸协同作用对白藜芦醇含量的影响
• 5.4 真菌诱导子活性成分的研究
• 5.5 黑曲霉诱导子对愈伤组织内源脱落酸（ABA）的影响
• 5.6 黑曲霉诱导子对愈伤组织中酶活性的影响
• 5.6.1 苯丙氨酸裂解酶（PAL）
• 5.6.2 过氧化物酶（POD）
• 5.6.3 过氧化氢酶（CAT）
• 5.6.4 超氧物岐化酶（SOD）
• 6.讨论
• 6.1 真菌诱导子与虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的关系
• 6.2 水杨酸与虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的关系
• 6.3 黑曲霉诱导子、水杨酸和苯丙氨酸协同作用对中白藜芦醇含量的影响
• 6.4 真菌诱导子活性成分的研究
• 6.5 黑曲霉诱导子对愈伤组织内源脱落酸（ABA）的影响
• 6.6 黑曲霉诱导子对愈伤组织中酶活性的影响
• 6.6.1 苯丙氨酸裂解酶（PAL）
• 6.6.2 过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧物岐化酶（SOD）
• 7.结论与存在的问题
• 参考文献
• 致谢
• 硕士学习期间发表文章
• 附图