论文摘要
研究了霸王鞭(Euphorbia royleana Boiss)带芽眼茎段的离体快繁,无芽茎段和叶片的愈伤组织诱导以及通过无芽茎段和取自腋芽丛生芽叶片的直接分化成芽过程。获得结果如下:1腋芽丛生:以当年生带芽眼茎段为材料,在以MS为基本培养基,附加6-BA0.5~2.0mg/L和NAA0.1~1.0mg/L的芽诱导培养基中都可诱导腋芽萌发。在6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L以及MS+6-BA0.5 mg/L+NAA1.0 mg/L两种培养基中诱导率最高,可达100%,并且诱导出的芽生长状况良好。当6-BA增高到2mg/L时芽萌发率虽变化不大,但芽生长明显受到抑制,当6-BA为2mg/LNAA为0.1mg/L时芽出现玻璃化。诱导出的腋芽转入增殖培养基,最佳增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+KT1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,增殖系数为7.4。2愈伤诱导:霸王鞭愈伤组织诱导较为困难,在几种用于愈伤诱导的培养基中外植体都仅在切口边缘长出少量愈伤组织,并且褐化严重。茎块愈伤诱导较叶片容易。在愈伤诱导中TDZ对两种外植体的效果都相对较好,叶片只能在TDZ的诱导中产生少量颗粒状愈伤,TDZ不但能使茎块边缘产生疏松的愈伤组织,还能使茎块膨大,在表皮产生颗粒状突起,这些突起正是分化芽的雏形。3不定芽的诱导:茎块在MS+TDZ1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L中培养30d左右,在膨大的表皮上诱导形成大量芽状突起,诱导率为100%,再将茎块转入MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L中可形成大量叶丛,再经过壮苗后可长成健壮的芽丛。取腋芽丛生芽叶片放于MS+TDZ1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L中,在切口与愈伤的接口处也可诱导出绿色突起,诱导率为57.1%,同茎块一样在转入MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L后可形成叶丛,但能伸长的芽极少,且形态畸形。4壮苗,生根及移栽:健壮的芽有利于下一步的生根培养,在培养基MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.5mg/L上进行壮苗培养,叶片长大,叶色变深,茎迅速伸长。壮苗培养30d左右可转入生根培养基中,MS+IBA1.0 mg/L+6-BA0.1 mg/L的生根效果最好,生根率可达100%。生根1个月后,打开瓶口炼苗3天,分别移栽入装有蛭石、河沙、石英砂的小盆中,一盆一苗。每天用MS大量元素母液稀释100倍润湿基质,一星期后可改用自来水浇灌。移栽后10d左右小苗可长出新根,1个月时可长出新叶,在石英砂基质中成活率最高为67%。