导读:本文包含了过氧亚硝酸根阴离子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:荧光探针,过氧亚硝酸根阴离子,苯并噻唑衍生的花菁,比色
过氧亚硝酸根阴离子论文文献综述
侯田鑫[1](2019)在《基于花菁染料新型荧光分子探针的设计合成及其对细胞内过氧亚硝酸根阴离子的检测》一文中研究指出过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-)是一种短寿命的内源性活性物质,在许多生理和病理过程中起着重要作用。在这项工作中,我们合成了基于苯并噻唑衍生的花菁结构的近红外荧光探针Cy-SN,用于测定过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-。设计的探针通过氧化裂解共轭的碳碳双键与ONOO-特异性反应并产生非荧光产物。同时,与ONOO-反应后,探针在630 nm处的特征吸收大大降低,伴随着从亮蓝色到绿色黄色的剧烈颜色变化,呈现出明显的可视化特性。我们研究并证明了探针能够以剂量反应方式用于测量ONOCT并且具有低至26 nM的检测限。此外,我们通过共聚焦荧光显微镜将探针Cy-SN应用于活细胞中内源性ONOO-的成像,其显示出良好的细胞渗透性和低细胞毒性。探针Cy-SN用于外源ONOC-比色检测和内源荧光成像的成功应用表明其在生物分析中具有巨大的应用潜力。第一章,主要介绍了过氧亚硝酸根阴离子的性质,及其在细胞内与其合成相关的一氧化氮和超氧阴离子自由基的性质,及其相互作用。分析检测过氧亚硝酸根阴离子的方法,包括分光光度法、化学发光法、电子自旋共振法、电化学分析法和荧光光谱法。在荧光光谱法里介绍了用于检测过氧亚硝酸根阴离子的有机荧光探针,包括荧光素类、罗丹明类、氟硼荧(BODIPY)类及花菁类等。第二章,我们设计合成了一种新型的基于花菁结构Cy5并修饰有苯并噻唑基团的有机分子荧光探针Cy-SN,在这不跟我们介绍了详细和合成步骤并通过质谱和核磁氢谱对其进行表征。我们研究了该探针的光谱性质,不同pH条件下荧光探针Cy-SN的荧光强度及其对过氧亚硝酸根阴离子的响应能力,荧光探针Cy-SN对不同浓度ONOO-的光谱检测,并得到该探针对ONOC-的检测限为26 nM。除此之外,我们还探究了该探针Cy-SN对ONOC-的选择性,及其检测机理。最后,我们将该探针用于活细胞中内源及外源性ONOC-的检测,并对其进行荧光成像,该探针表现出低细胞毒性和良好的细胞成像性能。因此具有良好的应用前景。(本文来源于《华北电力大学(北京)》期刊2019-03-01)
杨雨竹[2](2017)在《新型过氧亚硝酸阴离子特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的设计、合成及应用研究》一文中研究指出在时间分辨荧光生化分析技术中,基于稀土金属配合物的分子荧光探针由于具有高灵敏度、低背景荧光干扰等优点,在生物分析和临床医疗等方面得到了广泛的应用。同时,过氧亚硝酸阴离子(ONOO~-)作为一种具有强氧化性的细胞毒性物质,对生物体具有严重的伤害性。在本论文的研究中,以新合成的两种铕(Ⅲ)配合物作为荧光探针,建立了溶液体系中及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光检测新方法。在探针结构设计中,将2,4-二甲氧基苯基作为ONOO~-的识别基团,引入到?-二酮类配位体中,合成了两种?-二酮类铕(Ⅲ)配合物时间分辨荧光探针,并建立了基于该类探针的溶液体系中过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光测定方法及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光成像测定方法。针对以上问题本论文做了以下研究工作:1、新型过氧亚硝酸阴离子特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用首先设计合成出一种含有2,4-二甲氧基苯基的?-二酮类配位体1,1,1,2,2,3,3-七氟-6-(2,4-二甲氧基苯基)-4,6-已二酮(HDPH),然后与铕(Ⅲ)离子及叁联吡啶(tpy)共同配位形成一种新型的?-二酮类铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]。该探针本身具有较强的荧光(量子产率:25.58%),在与ONOO~-反应后荧光强度降低达64倍,显示出高ONOO~-检测灵敏度。并且其他活性氧物种的干扰实验表明,该探针具有高的ONOO~-选择性。利用该探针已实现了溶液体系中及活细胞内ONOO~-的时间分辨荧光测定。2、过氧亚硝酸阴离子特异性识别可见光激发铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用在荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]的研究工作基础上,将配合物中的tpy用一种具有可见光敏化性质的配位体2-(N,N-二乙基苯胺-4-基)-4,6-二(3,5-二甲基吡唑-1-基)-1,3,5-叁嗪(DPBT)代替,合成出一种可见光激发的铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(DPBT)]。该探针的最大激发波长红移至400 nm,并且激发窗口由紫外光区延伸到可见光区460nm处。成功利用该探针对细胞内的ONOO~-进行了时间分辨荧光成像检测,并且探针负载细胞的光稳定性结果证明,与紫外光激发相比,可见光激发更有利于探针光稳定性的保持。(本文来源于《辽宁师范大学》期刊2017-04-01)
于聪聪[3](2016)在《过氧亚硝酸阴离子电化学传感器的构建》一文中研究指出活性氮(Reactive Nitrogen Species,RNS)主要指一氧化氮(NO·)与包括活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)在内的化合物相互作用,衍生出一系列具有高度氧化活性的自由基和硝基类化合物,包括一氧化氮(NO·)、过氧亚硝酸阴离子(Peroxynitrite,ONOO~–)、二氧化氮(NO2·)等。当生物体内RNS浓度超过正常的生理水平时,将会对生物体造成氧化损伤,进而引发各类疾病。在RNS中,过氧亚硝酸阴离子(ONOO~–)的氧化性是最强的,其引起的氧化损伤也是最严重的。因此,检测生物体内的ONOO~–在疾病的诊断和治疗方面意义重大。电化学传感器由于其制备简单、响应快速、灵敏度高、稳定性好,能够进行在线连续监测,广泛应用在食品检测、环境监测、生物分析等领域。本文研究了过氧亚硝酸阴离子溶液(PON)的制备,并构建了两种基于纳米材料的过氧亚硝酸阴离子电化学传感器,研究内容如下:1)研究了两种制备PON的方法,过氧化氢与亚硝酸反应法:在酸性环境下,过量的过氧化氢与亚硝酸反应生成过氧亚硝酸(ONOOH),再加入氢氧化钠猝灭反应生成ONOO~–;两相置换法:在碱性环境下,过氧化氢会以过氧根离子形式存在,亚硝酸异戊酯会和过氧根离子反应,生成ONOOH和异戊酯,异戊酯与ONOOH反应生成ONOO~–。2)利用滴涂法将多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰在裸玻碳电极(GCE)上,然后再滴涂已配好的依布硒啉(Ebselen)溶液,成功构建了一种过氧亚硝酸阴离子电化学传感器。结果表明,在最优的实验条件下,PON浓度在区间135μmol/L~945μmol/L时,所制传感器Ebselen/MWCNTs/GCE对PON的电流响应与PON的浓度呈现出很好的线性关系,计算得到的检出限为97.29μmol/L(信噪比S/N=3)。3)采用循环伏安法(CV)在MWCNTs修饰的GCE表面电聚合叁聚氰胺(Mel),然后电沉积金纳米粒子,最后将修饰电极浸没在血红素(Hemin)溶液里,成功构建了一种过氧亚硝酸阴离子电化学传感器。结果表明,在最优的实验条件下,PON浓度在区间10μmol/L~350μmol/L以及350μmol/L~1100μmol/L时,所制传感器Hemin/AuNPs/PMel/MWCNTs/GCE对PON的电流响应与PON的浓度呈现出很好的线性关系,计算得到的检出限分别为0.12μmol/L和47.61μmol/L(信噪比S/N=3)。(本文来源于《河北科技大学》期刊2016-12-01)
李艳冬,周刚,肖晓丹,刘礼丹,崔国霞[4](2013)在《力竭运动诱导大鼠心肌过氧亚硝酸阴离子生成》一文中研究指出探讨力竭运动对大鼠心肌自由基生成的影响,将16只大鼠随机分为安静组和运动组,运动组采用跑台力竭运动模型,运动后即刻取样,测定血清中一氧化氮(NO)浓度、心肌中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)含量。结果:力竭运动后,心肌中ONOO-和MDA显着升高(P<0.05),SOD活力显着下降(P<0.01),血清中NO含量有一定上升,但无统计学意义(P>0.05)。结论:力竭运动诱导心肌ONOO-的大量生成,其机制可能源于力竭运动导致心肌超氧阴离子的大量生成与NO的过量生成。(本文来源于《湖北体育科技》期刊2013年06期)
王瑞勇,康小慧,吴静,尹瑜静,范淑敏[5](2012)在《模拟酶催化荧光分析法测定过氧亚硝酸根阴离子》一文中研究指出基于血红蛋白催化过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-)氧化L-酪氨酸的反应,建立了一种测定ONOO-的新方法.在优化实验条件下,酪氨酸荧光强度随ONOO-浓度增大而猝灭,产物酪氨酸二聚体的荧光强度随ONOO-浓度增大而增强.ONOO-浓度在3.0×10-6~5.0×10-8mol/L范围内与酪氨酸的相对荧光强度呈线性关系,检出限为1.12×10-9mol/L;ONOO-浓度在3.0×10-5~3.0×10-6mol/L范围内与产物酪氨酸二聚体的相对荧光强度呈线性关系,检出限为1.31×10-8mol/L.将该方法用于样品分析,结果令人满意.(本文来源于《郑州大学学报(理学版)》期刊2012年04期)
刘礼丹[6](2012)在《力竭运动对大鼠血清中过氧亚硝酸阴离子生成的影响》一文中研究指出运动可以诱导自由基的生成,这一现象已被发现了叁十余年,但其中的机制尚不清楚。大量研究已证实运动可导致体内超氧阴离子(O_2-)的生成,也有研究表明运动也导致骨骼肌一氧化氮合酶活性的增强,进而一氧化氮(NO)生成增加,而NO与O_2-能迅速反应形成过氧亚硝酸阴离子(ONOO~-)。ONOO~-是极强的氧化剂,推测其对运动性疲劳的产生起着至关重要的作用。本文以大鼠力竭运动为模型,诱发大鼠运动性疲劳为切入点,观察血清中各项自由基相关指标和代谢程度。以求更加深入、系统地探明是否力竭运动诱导血清ONOO~-的过量生成,为运动运动性疲劳的自由基学说提供新的理论依据。研究方法:32只6周龄雄性SD大鼠,分成对照组(C组)和力竭运动组(E组)。E组以运动跑台构筑力竭运动模型。力竭后即刻取样检测。研究结果:1.经力竭运动后,E组血清CK活性增加14%(P<0.05),而血清LDH没有显着性差异。2.E组血清MDA明显增加42%(P<0.05),而血清SOD活力降低了300%(P<0.05)。3.经力竭运动后,血清NO浓度升高了8%,ONOO~-更是升高18%(P<0.01)。研究结论:1.力竭运动导致血清CK活性上升,表明骨骼肌细胞损伤,大量骨骼肌细胞内的CK渗漏进入血液,产生运动性疲劳。2.力竭运动使机体生成过量的自由基,从而使细胞脂质过氧化反应加强,生成大量MDA;同时,血清SOD活性降低,反映出SOD因清除自由基而消耗。这两个指标的变化也间接反映了力竭运动导致自由基的过量生成。3.ONOO~-的升高其原因可能是大量的O_2-与NO反应生成,ONOO~-的生成可能是运动性疲劳的机制之一。(本文来源于《湖南大学》期刊2012-06-02)
王宇朋,王萍,李虹伟[7](2011)在《过氧亚硝酸阴离子与心血管疾病》一文中研究指出氧化应激及在氧化应激过程中产生的活性氧簇(ROS)与心血管疾病的发生发展有密切关系。过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)作为一种重要的氧化应激产物及活性氧簇的一员,在其中发挥着重要的作用。本文对ONOO-与心血管疾病的关系做一综述,以期对下一步研究有所裨益。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2011年06期)
刘朝巍,刘仕昌,张涛,杨卓[8](2011)在《过氧亚硝酸阴离子供体通过蛋白激酶C途径抑制CA1区神经元延迟整流钾电流》一文中研究指出目的:过氧亚硝酸阴离子(ONOO-)是一种性质活泼的自由基,可引起强的氧化性损伤,介导了一氧化氮(NO)的大部分毒性作用。本研究探讨ONOO-对脑片海马神经元延迟整流钾电流(IK)和动作电位时程(APD)的影响及其作用机制。方法:应用全细胞脑片膜片钳技术记录IK和动作电位。结果:ONOO-供体SIN-1可抑制IK电流峰值,使其激活曲线向超极化方向移动,并可延长APD。脑片预处理PKC抑制剂chelerythrine(2.5μmol/L)可抑制SIN-1对IK的作用。PKC激动剂PDBu(6μmol/L)不仅加强而且模拟SIN-1对IK的影响。然而,鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂ODQ对SIN-1的作用无影响。结论:ONOO-可能通过PKC-IK-动作电位信号级联反应作用于海马神经元,并不依赖环磷鸟苷(cGMP)通路,这可能是ONOO-神经毒性的机制之一。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2011年05期)
荣琳[9](2010)在《过氧亚硝酸阴离子在肝性脑病中作用的研究》一文中研究指出目的:肝性脑病(hepatic encephalopathy, HE)是严重危害人类健康的疾病,有关其发病机制尚未完全明确。众所周知,HE病人血液中内毒素、肿瘤坏死因子升高,这两者均是一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)的促进剂。NOS被激活,促进一氧化氮(nitric oxide, NO)的合成,使体内NO大量增加,而且由于抗氧化防御能力下降,体内超氧阴离子自由基(superoxide anion,O2-·)也常见升高。NO与O2-·会迅速反应生成过氧亚硝酸阴离子(peroxynitrite, ONOO-),该反应几乎不可逆,因而HE病人体内ONOO可能异常增高。由于异常增高的ONOO可特异性使蛋白质酪氨酸(tyrosine, Tyr)线基硝基化而直接影响到蛋白质的功能;可使神经元细胞膜氧化从而导致神经传导功能障碍;可能造成肝、脑细胞线粒体破坏及能量合成障碍等,所以,在HE发病过程中,ONOO的作用不能排除。因此本研究通过对临床肝损伤病人及大鼠HE模型血清氧化/硝基化指标的检测,探讨ONOO在HE的发生发展中的作用,揭示ONOO-的致病机制,为HE病因的研究及其治疗提供新的思路和科学依据。研究方法:1.对临床肝损伤病人的研究1.1研究对象的选取与分组选取同一时期根据卫生部病毒性肝炎诊断标准明确诊断的病毒性肝炎伴HE患者45例和病毒性肝炎非HE患者30例以及同一时期的健康查体者30例,根据疾病严重程度将其分为3组:病毒性肝炎伴HE组,病毒性肝炎非HE组,健康对照组。HE的诊断:病毒性肝炎患者除肝功能严重损伤外,临床上出现一系列无其他原因可解释的神经精神症状,并按下列条件分期:Ⅰ期:前驱期,Ⅱ期:昏迷前期,Ⅲ期:昏睡期,Ⅳ期:昏迷期。1.2各种生化指标的测定空腹采血,离心分离后取血清。用高效液相色谱-荧光检测法检测血清中3-硝基酪氨酸(3-NT)含量;硫代巴比妥酸法检测血清中丙二醛(MDA)含量;黄嘌呤氧化物酶法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活力。2.对大鼠HE模型的研究2.1.大鼠HE模型的建立及分组用硫代乙酰胺(Thioacetamide, TAA)建立大鼠HE模型。雄性Wistar大鼠随机分为4组(每组15只):空白对照组(Ⅰ)、HE模型组(Ⅱ)、依布硒啉处理组(Ⅲ)、溶剂对照组(Ⅳ)。除Ⅰ组外,其它各组第1 d均腹腔注射TAA 300 mg/kg,第2-4 d,每日分别注射TAA 150 mg/kg,直至出现HE症状;Ⅰ组给予等量生理盐水腹腔注射。TAA处理组出现HE症状后,Ⅲ组每天经口灌胃依布硒啉1 mL/100g,Ⅰ组和Ⅱ组灌胃等量生理盐水,Ⅳ组灌胃等量0.5%二甲基亚砜(DMSO)。2.2.各种生化指标的测定各组大鼠于TAA处理前断尾法取血;采用TAA处理后,TAA处理组大鼠出现Ⅱ期HE症状时,各组大鼠断尾取血;灌胃处理后,在Ⅱ组大鼠出现Ⅲ期或Ⅳ期HE症状后,各组大鼠均断头处死,取血。用高效液相色谱-荧光检测法检测血清中3-NT含量;赖氏法检测血清中ALT的活力;硫代巴比妥酸法检测血清中MDA含量;黄嘌呤氧化物酶法检测血清中SOD的活力。2.3.组织病理切片的制作及染色各组大鼠断头处死后取肝组织,制作石蜡切片,进行苏木素-伊红染色观察组织病理改变。结果:1.临床生化指标分析1.1 HE病人血清中3-NT、SOD和MDA的检测结果病毒性肝炎伴HE组病人血清生化指标与病毒性肝炎非HE组比较:病毒性肝炎伴HE组病人血清中3-NT的含量明显升高(P<0.01),SOD的活性显着降低(P<0.01),MDA的含量明显升高(P<0.01)。病毒性肝炎非HE组病人血清生化指标与健康对照组比较:病毒性肝炎非HE组病人血清中3-NT的含量显着升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),MDA的含量显着升高(P<0.01)。1.2不同时期HE病人血清中3-NT、SOD和MDA的检测结果病毒性肝炎伴HE组病人Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期血清中各生化指标的差异均具有显着性(P<0.01)。随HE病情加重,病人血清中3-NT的含量升高(P<0.01),SOD的活性降低(P<0.01),MDA的含量升高(P<0.01)。1.3 HE病人血清中3-NT和SOD、MDA的相关性分析HE病人血清中3-NT和SOD、3-NT和MDA之间存在明显相关性(P<0.05),其中3-NT含量和SOD活性呈负相关。2大鼠一般状态及解剖观察腹腔注射TAA 2 d后,即可出现HEⅠ期或Ⅱ期症状。根据每只大鼠的具体情况减量注射TAA后,在3-7 d内,可继续发展至Ⅲ期或Ⅳ期症状直至死亡。Ⅲ组大鼠在出现HE症状后灌胃依布硒啉,发现HE的发展速度减缓、症状减轻,存活时间延长。Ⅳ组大鼠在出现HE症状后灌胃DMSO,其病情进展基本同Ⅱ组。3大鼠血清生化指标分析3.1 HE大鼠血清生化指标的自身前后对照出现HE症状后,血清中3-NT的含量较造模前显着增加(P<0.01);ALT的活性明显增高(P<0.01);SOD的活性降低(P<0.05),MDA的含量显着增加(P<0.01)。3.2 HE大鼠与正常大鼠血清生化指标的比较出现HE症状后,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组大鼠各血清指标与Ⅰ组相比:3-NT和MDA的含量均显着高于Ⅰ组(P<0.01);ALT的活性明显高于Ⅰ组(P<0.01);SOD的活性显着低于Ⅰ组(P<0.05),排除了饮食及腹腔注射刺激等因素对实验结果的影响。3.3药物处理后各组大鼠血清生化指标的比较药物处理后,Ⅱ组和Ⅳ组3-NT、ALT和MDA的含量显着高于Ⅰ组和ⅢⅡ组(P<0.01);Ⅱ组和Ⅳ组、Ⅰ组和Ⅲ组之间各指标的差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅱ组和Ⅳ组SOD的活性显着低于Ⅰ组和Ⅲ组(P<0.01),Ⅱ组和Ⅳ组、Ⅰ组和Ⅲ组之间大鼠血清中SOD活性的差异不具有统计学意义(P>0.05)。3.4各组大鼠不同时期血清生化指标的比较Ⅰ组大鼠在不同HE时期血清生化指标的比较:Ⅰ组大鼠在各种处理前后各血清指标的变化均无统计学意义(P>0.05);Ⅱ组和Ⅳ组大鼠在不同HE时期血清生化指标分析结果的比较:Ⅱ组和Ⅳ组大鼠在出现HE症状后血清中各生化指标的含量及活性与腹腔注射TAA前比较:3-NT和MDA的含量显着升高(P<0.01),ALT的活性显着增强(P<0.01),SOD的活性降低(P<0.05);用药后血清各生化指标的含量及活性与用药前比较:3-NT和MDA的含量显着升高(P<0.01),ALT的活性明显增强(P<0.01),SOD的活性降低(P<0.05);Ⅲ组大鼠在不同HE时期血清生化指标检测结果的比较:Ⅲ组大鼠出现HE症状后血清中各生化指标的含量及活性与腹腔注射TAA前相比:3-NT和MDA的含量显着升高(P<0.01),ALT的活性显着增强(P<0.01),SOD的活性降低(P<0.05);用药后血清中各生化指标的含量及活性与用药前相比:3-NT和MDA的含量显着降低(P<0.01),ALT的活性明显降低(P<0.01),SOD的活性增强(P<0.05)。4.大鼠病理学观察结果Ⅱ组和Ⅳ组大鼠肝细胞有不同程度的坏死、崩解及消失,未坏死细胞也有严重变性,坏死组织中有较多的炎性细胞浸润。随HE分期越高,肝脏的病理改变越明显。Ⅲ组肝细胞形态与Ⅰ组相比,肝细胞体积增大,肝小叶结构未见明显改变。结论:本次实验从临床和动物实验两个方面,从生化和组织病理学角度初步探讨了ONOO在HE发病中的作用,ONOO的异常增多导致蛋白质硝基化可能是HE的发病机制之一,提示ONOO-的清除剂如依布硒啉等有益于控制病情。(本文来源于《山东大学》期刊2010-05-20)
蒲法章[10](2010)在《超氧阴离子自由基和过氧亚硝酸根离子荧光测定法的研究》一文中研究指出自由基是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物,其中超氧自由基(O_2·~-)和过氧亚硝酸根离子(ONOO-)是具有代表性的两种自由基,它们在各种致病过程中都是重要的介导因素,与癌症、机体炎症、组织过氧化、蛋白质交联变性、DNA损伤和细胞信号转导等都有着直接的关系。O_2·~-不仅自身具有毒性,而且可以经过一系列反应生成其它活性氧自由基,进一步对生物体产生损伤作用,且停留时间较长。超氧自由基是生物活性最高的氧中心自由基之一,它在生命过程和化学反应中作为电子受体,形成不同的活性氧自由基链中的第一个自由基,经过一系列反应生成其它的氧自由基。和其它的活性氧相比,超氧自由基不是很活泼,但其寿命很长,因此,超氧自由基危害较大,捕获超氧自由基进行研究具有重要的意义。ONOO-是NO·与O_2·~-相互反应的产物。ONOO·能导致DNA损伤、酶抑制、细胞死亡和细菌中毒并且能够引起一系列疾病。通过对自由基的检测研究,可以帮助我们更好的解释疾病产生的原因,采取有效的预防措施,减少机体的伤害程度。目前测定O_2·~-与ONOO-的方法主要有电子自旋共振法(ESR)或电子顺磁共振法(EPR)、高效液相色谱法(HPLC)、化学发光法(CL)、荧光法以及电化学方法等。然而,由于生物体内活性氧自由基的半衰期非常短,稳态浓度极低,所以真正适用于检测生物活体内O_2·~-与ONOO-的方法还是比较少的。这就迫切需要科研工作者开发对O_2·~-与ONOO-能够专一识别、快速响应的荧光探针用以动态观测研究某些器官中活性氧自由基的产生、代谢、相互转化及其动态损伤生物机体的过程。本论文利用荧光分析技术测定活性氧自由基的方法,此技术具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。本文合成了叁种新型荧光探针,利用探针对(O_2·~-)和(ONOO-)进行了检测,提出了新的检测方法。具体研究内容分为以下叁个方面:(1)设计合成了一种新型的荧光探针香草醛缩苯胺,建立检测O_2·~-和SOD活性的荧光方法,研究测定方法的最佳条件,并用于测定大蒜﹑洋葱的SOD活性的测定,并与邻苯叁酚自氧化法测定出的SOD活性进行了比较。(2)设计合成新型的荧光探针荧光素酰肼,用荧光光谱法检测ONOO-,研究测定方法的最佳条件,探讨了其它物质对体系的干扰影响及荧光探针的检测单一性,研究测定方法的灵敏度,精密度。(3)设计合成新型的荧光探针罗丹明6G酰肼,用荧光光谱法检测ONOO-,研究测定方法的最佳条件,探讨了其它物质对体系的干扰影响及荧光探针的检测单一性,研究测定方法的灵敏度,精密度。(本文来源于《山东农业大学》期刊2010-05-01)
过氧亚硝酸根阴离子论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
在时间分辨荧光生化分析技术中,基于稀土金属配合物的分子荧光探针由于具有高灵敏度、低背景荧光干扰等优点,在生物分析和临床医疗等方面得到了广泛的应用。同时,过氧亚硝酸阴离子(ONOO~-)作为一种具有强氧化性的细胞毒性物质,对生物体具有严重的伤害性。在本论文的研究中,以新合成的两种铕(Ⅲ)配合物作为荧光探针,建立了溶液体系中及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光检测新方法。在探针结构设计中,将2,4-二甲氧基苯基作为ONOO~-的识别基团,引入到?-二酮类配位体中,合成了两种?-二酮类铕(Ⅲ)配合物时间分辨荧光探针,并建立了基于该类探针的溶液体系中过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光测定方法及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光成像测定方法。针对以上问题本论文做了以下研究工作:1、新型过氧亚硝酸阴离子特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用首先设计合成出一种含有2,4-二甲氧基苯基的?-二酮类配位体1,1,1,2,2,3,3-七氟-6-(2,4-二甲氧基苯基)-4,6-已二酮(HDPH),然后与铕(Ⅲ)离子及叁联吡啶(tpy)共同配位形成一种新型的?-二酮类铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]。该探针本身具有较强的荧光(量子产率:25.58%),在与ONOO~-反应后荧光强度降低达64倍,显示出高ONOO~-检测灵敏度。并且其他活性氧物种的干扰实验表明,该探针具有高的ONOO~-选择性。利用该探针已实现了溶液体系中及活细胞内ONOO~-的时间分辨荧光测定。2、过氧亚硝酸阴离子特异性识别可见光激发铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用在荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]的研究工作基础上,将配合物中的tpy用一种具有可见光敏化性质的配位体2-(N,N-二乙基苯胺-4-基)-4,6-二(3,5-二甲基吡唑-1-基)-1,3,5-叁嗪(DPBT)代替,合成出一种可见光激发的铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(DPBT)]。该探针的最大激发波长红移至400 nm,并且激发窗口由紫外光区延伸到可见光区460nm处。成功利用该探针对细胞内的ONOO~-进行了时间分辨荧光成像检测,并且探针负载细胞的光稳定性结果证明,与紫外光激发相比,可见光激发更有利于探针光稳定性的保持。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
过氧亚硝酸根阴离子论文参考文献
[1].侯田鑫.基于花菁染料新型荧光分子探针的设计合成及其对细胞内过氧亚硝酸根阴离子的检测[D].华北电力大学(北京).2019
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