茶条槭（Acer ginnala Maxim.）组织培养及愈伤组织中没食子酸代谢调控的研究

论文摘要

本论文以茶条槭成熟种子为材料，通过外植体直接出芽和愈伤组织分化两种途径，建立了茶条槭的离体培养体系，并对愈伤组织中没食子酸代谢调控培养技术进行了研究，得到以下研究结果：1、茶条槭再生体系的建立通过不定芽和愈伤组织两种途径，建立了茶条槭的组织培养再生体系。成熟种子在WPM+6-BA1.0mg／L的培养基中萌发后，切掉胚根接种于WPM+TDZ0.01 mg／L+6-BA0.1mg／L的培养基中，4周之后从基部直接产生不定芽，不定芽的诱导频率达到93.3％，平均每个外植体产生再生芽的数目为3.12。以不定枝茎段作为外植体，在WPM+TDZ 0.002-0.01 mg／L+6-BA 0.1 mg／L中培养3周诱导形成愈伤组织，最高诱导频率为98.0％。愈伤组织转入WPM+TDZ 0.01 mg／L+6-BA 0.1 mg／L培养基中得到再生芽，分化频率为42.0％，平均每块愈伤组织产生再生芽10个左右。两种途径得到的再生芽转到WPM+0.3 mg／L IBA的培养基上均可生根、长成完整植株，小苗移栽成活率达到89.0％。2、没食子酸愈伤组织代谢培养体系的建立最适合没食子酸生产的愈伤组织培养体系为：NT为基本培养基，附加TDZ0.01mg／L和6-BA0.1mg／L，蔗糖浓度为20g／L，培养基pH值为5.8，没食子酸最高产量为245.3mg／瓶。比较了MS、WPM、NT、B5、N6五种基本培养基，发现NT培养基不仅有利于愈伤组织的生长，而且对没食子酸的积累也比较理想；20g／L蔗糖浓度是适合于愈伤组织生长的，也是最有利于没食子酸积累的蔗糖浓度，此时愈伤组织生长量为8.21g／瓶，没食子酸含量为3.34％，产量为245.3mg／瓶；愈伤组织在pH5.8时具有最大的生长量和增殖倍数，分别为5.64g／瓶和9.49倍。pH5.8时，没食子酸含量最高，为3.05％，没食子酸产量也最高，为133.8mg／瓶；对红、黄、蓝、绿四种单色光和紫外照射对愈伤组织生长和没食子酸含量的影响进行了初步探讨。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 植物组织培养的发展概述
• 1.2 槭树科植物组织培养的研究进展
• 1.3 影响植物组织培养的因素
• 1.3.1 外植体的选择
• 1.3.2 培养基成分
• 1.3.3 外源激素的种类和浓度
• 1.3.4 其他影响因素
• 1.4 植物组织培养生产次生代谢产物研究概况
• 1.4.1 植物次生代谢及细胞培养生产次生代谢产物研究进展
• 1.4.2 影响细胞培养生产次生代谢产物的因素
• 1.5 没食子酸的研究情况
• 1.5.1 没食子酸简介
• 1.5.2 没食子酸的生物合成途径
• 1.6 茶条槭研究现状及本实验的意义
• 2 茶条槭组织培养体系的建立
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 植物材料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 仪器与设备
• 2.1.4 实验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 不同消毒方式对种胚污染率及萌发效果的影响
• 2.2.2 不同基本培养基和6-BA浓度的对种胚萌发的影响
• 2.2.3 不定芽直接再生途径
• 2.2.4 愈伤组织再生途径
• 2.2.5 不同浓度的激素NAA、IBA对不定芽生根的影响
• 3 愈伤组织中没食子酸代谢调控研究
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 植物材料
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 仪器与设备
• 3.1.4 实验方法
• 3.1.5 培养条件计数据统计方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 不同基本培养基对愈伤组织生长和没食子酸合成的影响
• 3.2.2 蔗糖浓度对愈伤组织生长和没食子酸含量影响
• 3.2.3 pH值对愈伤组织生长和没食子酸含量的影响
• 3.2.4 光质对愈伤组织生长和没食子酸含量影响
• 3.2.5 紫外照射对愈伤组织生长和没食子酸含量的影响
• 结论
• 一、茶条槭组织培养体系的建立
• 二、愈伤组织中没食子酸代谢调控培养的研究
• 讨论与建议
• 参考文献
• 附录
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢