论文摘要
目的:建立一种新的单细胞内IFN-γ的检测方法-毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法(CEIA-LIF)。 材料与方法:选2例重型再障(Sever Aplastic Anemia, SAA)患者及1例正常人,用Ficoll淋巴细胞分离液及免疫磁珠法,分离纯化外周血CD8+T细胞。将其与毛地黄皂苷反应15min,再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20min。用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测,并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性。 结果:纯化的CD8+T细胞内的IFN-γ,是在不溶膜的情况下得到全部检测。2例SAA患者外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的含量,分别为(151.53±28.92)z mol和(223.72±45.23)z mol,高出正常对照(47.47±17.97)zmol约3~4倍,(p<0.01)。 结论:CEIA-LIF法对单个CD8+T细胞内含量的测定是可行的,有望用于临床检测。
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