脂肪间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞的实验研究

脂肪间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞的实验研究

论文摘要

骨组织工程研究的基础和关键之一是种子细胞。本课题研究的目的是探讨脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,AMSCs)是否可作为骨组织工程种子细胞。实验中从成人脂肪抽吸物中分离培养脂肪间充质干细胞,观察其体外扩增能力,进行成脂和成骨诱导;应用组织化学染色、免疫荧光染色和RT-PCR方法,检测其成脂分化和成骨细胞表型;比较脂肪和骨髓来源间充质干细胞的生物学性能;检测bFGF和BMP-2对AMSCs的增殖和成骨效应;最后将脂肪来源成骨细胞接种在天然珊瑚支架上,观察复合物在体内、外情况。结果显示:从成人脂肪抽吸物中分离获得的AMSCs可在体外稳定增殖并诱导成为脂肪细胞和成骨细胞;脂肪和骨髓来源的间充质干细胞有相似的生物学特征,其表面分子的表达差异主要表现在CD73和CD117,前者表达CD73,后者表达CD117;bFGF和BMP-2可分别促进脂肪间充质干细胞的增殖和成骨分化,两者联合应用在促进增殖的同时也促进分化;脂肪来源成骨细胞在体外可在天然珊瑚支架上良好的贴附和生长;植入裸鼠皮下8周后,有脂肪样组织生成,有少量的类软骨、骨样组织形成,但无确切成骨表现。由此可知,作为骨组织工程的种子细胞,AMSCs具有来源广泛,“变废为宝”的优点,在进一步研究其成骨诱导分化条件及高效的、复合生长因子的支架的基础上,其在骨组织工程研究中必将发挥重要的作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 综述 脂肪间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞的实验研究
  • 第一部分 脂肪间充质干细胞的分离培养及诱导分化
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 附图
  • 第二部分 脂肪间充质干细胞与骨髓间充质干细胞生物学性能比较及bFGF和BMP-2对脂肪间充质干细胞体外增殖及成骨分化的影响
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 附图
  • 第三部分 脂肪来源成骨细胞与珊瑚支架复合物体内、外观察
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 附图
  • 结论
  • 参考文献
  • 英文缩略语表
  • 致谢
  • 在读期间发表论文
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