论文题目: 人耳软骨细胞体外培养的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 耳鼻咽喉科学
作者: 冉鹏
导师: 郑春泉,吴海涛,潘世恺
关键词: 人耳软骨细胞,年龄因素,人胚胎耳廓软骨细胞,体外培养,胶原,蛋白聚糖,组织工程,胰岛素样生长因子
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 第一部分 人胚胎耳廓软骨细胞体外培养及生物学特性的研究 目的:研究人胚胎耳廓软骨细胞体外培养的方法及培养细胞的生物学特性。 方法:取人胚胎耳廓软骨,分离培养软骨细胞,观察其形态学改变,Ⅱ型胶原抗体免疫组化进行细胞来源的鉴定,测定其生长曲线,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA的表达。 结果:原代及早期传代细胞为多角形或三角形,随着代次的增加,细胞从多角形逐渐变为长梭形。到第6代时,几乎全部转变成梭形细胞。生长曲线表明,第1～4代细胞有旺盛的增殖力。Ⅱ型胶原抗体染色阳性。mRNA水平第1代和第2代Ⅱ型胶原表达较强,随传代表达逐渐减弱,第5代基本消失;第1代至第3代蛋白聚糖表达水平较高,随传代表达逐渐减弱,第6代基本消失。 结论:体外培养的第1至第4代人胚胎耳廓软骨细胞可做为耳软骨组织工程研究的种子细胞。 第二部分 不同年龄段人耳软骨细胞体外培养及生物学特性的研究 目的:观察年龄因素对体外培养的人耳软骨细胞生物学特性的影响。 方法:取不同年龄组人耳软骨,分离培养软骨细胞,观察其形态学改变,测定其细胞群体倍增时间,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达,进行比较。 结果:各年龄组人耳软骨细胞在细胞形态,细胞倍增时间,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达方面无明显差异。体外培养的人耳软骨细随着代次的增加,从多角形逐渐变为长梭形。到第5代时,几乎全部转变成梭形细胞。细胞倍增时间显示,第1～3代细胞有旺盛的增殖力。mRNA水平第1代和第2代Ⅱ型胶原含量及蛋白聚糖含量相对较高,第3代表达明显下降,第4代起两者
论文目录:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人胚胎耳廓软骨细胞体外培养及生物学特性的研究
材料与方法
结果
讨论
结论
第二部分 不同年龄段人耳软骨细胞体外培养及生物学特性的研究
材料与方法
结果
讨论
结论
第三部分 胰岛素样生长因子Ⅰ在人耳软骨细胞体外培养中的作用
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
综述
缩略词表
致谢
论文独创性声明
发布时间: 2005-09-19
参考文献
- [1].一、正常人耳软骨和先天性小耳畸形病人的残耳软骨的组织学及生物化学研究 二、人残耳软骨细胞体外培养的生物学特性 三、人残耳软骨细胞种植于聚羟基丁酸酯—聚羟基己酸酯共聚物支架形成组织工程软骨[D]. 金骥.中国协和医科大学2001
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