蒙古口蘑液体发酵及菌丝体多糖提取的研究

论文摘要

蒙古口蘑,属真菌门、担子菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属,含有多种活性物质,具有很高的营养和药用价值。由于蒙古口蘑人工栽培难度较大,长期以来的驯化栽培都未能获得实质性的突破,目前野生蒙古口蘑的滋生环境受到了严重破坏,蒙古口蘑资源锐减。通过液态发酵法,不仅可以获得大量的菌丝体和胞内及胞外多糖等活性物质,还可以使这一资源得到合理的开发和利用。主要研究内容和结论如下：1.本文以蒙古口蘑KM-1菌株为研究对象,通过考察不同营养因子对KM-1菌株液态发酵产多糖量的影响,优化出该菌株的最适发酵培养基。结果表明蒙古口蘑KM-1菌株能够较好的利用大多数碳源和有机氮源,确定液态发酵最优培养基为酵母膏2%、葡萄糖3%、KH2P040.3％.MgS040.3％.在此培养基条件下进行液体发酵培养,胞内多糖和胞外多糖的含量分别为1.067g/L、0.985g/L。2.在最优发酵培养基的基础上,利用单因素实验,从发酵起始pH、温度、接种量、转速等因素中筛选出对胞内和胞外多糖产量起主要影响的因素进行正交实验。实验结果表明,最佳工艺条件是pH6.5、温度25℃、接种量12%、转速180r/min,此时摇瓶培养的胞外多糖和胞内多糖分别为1.187g/L、1.073g/L3.通过单因素实验和响应面分析法优化菌丝体多糖提取工艺。结果表明,蒙古口蘑菌丝体多糖的热水浸提工艺中3个关键因素即浸提温度、浸提时间、料液比与多糖得率之间的关系接近于二次多项式模型:Y=-58.69+1.27X1+4.75X2+0.42X3-3.00E-003X1X2+1.00E-003X1X3+3.00E-003 X2X3-7.58E-003X12-1.05X22-8.07E-003X32,模型的预测值和实验的真实值之间的相关性为59.1%,获得最大多糖得率的工艺条件为提取温度58.83℃、提取时间2.1h8、料液比:113.78留mL、醇沉时乙醇用量为提取液体积的3倍,在此条件下,蒙古口蘑菌丝体多糖热水浸提法的多糖得率7.23%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 蒙古口蘑概述
• 1.1.1 蒙古口蘑的营养价值
• 1.1.2 蒙古口蘑的药理作用
• 1.2 国内外对蒙古口蘑的研究
• 1.3 蒙古口蘑的液态发酵研究
• 1.4 蒙古口蘑多糖的研究
• 1.4.1 蒙古口蘑多糖的提取
• 1.4.2 口蘑多糖的分离和纯化
• 1.4.3 口蘑多糖的生物学功能
• 1.5 本项目研究的意义与主要内容
• 1.5.1 研究意义
• 1.5.2 主要研究内容
• 第二章 蒙古口蘑液态发酵培养基的优化研究
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.1.1 菌种
• 2.2.1.2 试剂与药品
• 2.2.1.3 仪器与设备
• 2.2.2 试验方法
• 2.2.2.1 技术路线
• 2.2.2.2 菌种活化扩大培养方法
• 2.2.3 液态发酵培养基优化的设计
• 2.2.3.1 氮源的筛选
• 2.2.3.2 碳源的筛选
• 2.2.3.3 无机盐的选择
• 2.2.3.4 正交实验
• 2.2.3.5 测定指标及方法
• 2.3 结果和分析
• 2.3.1 葡萄糖标准曲线的测定
• 2.3.2 氮源对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 2.3.3 碳源对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 2.3.4 无机盐对蒙古口蘑产多糖量的影响
• 2.3.5 正交试验优化发酵培养基
• 2.4 讨论与小结
• 第三章 蒙古口蘑液态发酵工艺的优化研究
• 3.1 引言
• 3.2 材料和法
• 3.2.1 材料
• 3.2.1.1 菌种
• 3.2.1.2 试剂和药品
• 3.2.1.3 仪器与设备
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.3 单因素实验确定发酵工艺参数
• 3.2.3.1 发酵液起始pH值的确定
• 3.2.3.2 发酵温度的确定
• 3.2.3.3 接种量的选择
• 3.2.3.4 摇瓶转速的确定
• 3.2.4 正交实验优化发酵工艺条件
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 发酵液初始PH对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 3.4.2 发酵温度对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 3.4.3 接种量对产多糖能力的影响
• 3.4.4 加液量对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 3.4.5 转速对蒙古口蘑产多糖能力的影响
• 3.4.6 正交实验优化发酵工艺条件
• 3.5 讨论与小结
• 第四章 响应面分析法优化茵丝体多糖提取工艺
• 4.1 引言
• 4.2 材料和方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.1.1 菌丝体
• 4.2.1.2 试剂
• 4.2.1.3 仪器与设备
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.2.1 菌丝体多糖提取条件的初步研究
• 4.2.2.2 响应去面法设计实验
• 4.2.2.3 多让含量的测定
• 4.3 结果和分析
• 4.3.1 单因素实验初步确定茼丝体多糖提取条件
• 4.3.1.1 不同浸提温受对菌丝体多糖得率的影响
• 4.3.1.2 不同浸提时间对菌丝体多糖的影响
• 4.3.1.3 不同料液比对多糖得率的影响
• 4.3.1.4 乙醇用量对菌丝体多糖得率的影响
• 4.3.2 响应面法优化菌丝体多糖提取工艺
• 4.3.2.1 模型的方差分析
• 4.3.2.2 响应面分析
• 4.4 讨论与小结
• 第五章 结果与展望
• 5.1 结果
• 5.2 展望
• 参考文献
• 在校期间发表的论文
• 致谢