毛细管电泳化学发光联用技术在生物样品分析中的应用研究

毛细管电泳化学发光联用技术在生物样品分析中的应用研究

论文摘要

随着生命科学的发展,对于生命物质中微量组分的分离和测定越来越为人们所重视。建立简单、快速、高效的分离分析手段已成为生命科学及相关领域中日益迫切的需求。毛细管电泳(Capillary Electrophoresis , CE) 分离技术因其分离效率高、分离速度快、样品消耗少、分离装置简单及操作成本低等优点,迅速发展成为一种强有力的分离分析技术。由于CE 采用极小的样品体积和极细的毛细管内径,使得研究CE 的高灵敏检测技术成为CE 发展的重要课题。化学发光(Chemiluminescence , CL) 检测是CE 最灵敏的检测手段之一。由于该方法无需激发光源,且光学系统简单、信号背景低、检测灵敏度高,因而CE 和CL 的联用技术能同时满足分析的选择性和灵敏度的要求,并可用于复杂样品中微量组分的分离和测定。但是,目前对该技术的研究主要围绕着仪器接口的设计和新体系的开发,应用也仅限于对无机离子、有机分子和一些药物的检测上,而涉及生物体内微量组分的分离和检测,则研究较少。本文旨在将毛细管电泳化学发光联用技术(CE-CL)应用于复杂的生物样品分析中。首先自行设计、组装了一套测定灵敏度高、操作简单的毛细管电泳化学发光检测装置;然后发展了一系列测定生物样品中微量组分的新方法。并成功的应用于人血清、猴血清、大鼠脑组织、大鼠胃组织、猴胃组织、体液、果汁等多种生物样品中氨基酸、神经递质、胍基丁胺、叶酸的测定。本论文的研究工作包括以下几个主要部分: 一、在前人工作的基础上,经过优化和改进,自行设计、组装了毛细管电泳化学发光检测装置。该装置具有组装成本低,运行费用低,操作简单,接口稳定,

论文目录

  • 第一章 绪论
  • 一、引言
  • 二、 CE-CL联用技术
  • 1. 在线套管式
  • 2. 柱后套管式
  • 3. 在柱填充固体氧化物式
  • 4. 柱端液池式
  • 5. 化学发光与微全分析系统(μ-TAS)联用技术
  • 三、CE-CL 的应用研究进展
  • 1 金属离子的检测
  • 2 蛋白质和多肽的检测
  • 3 氨基酸的检测
  • 4 生物碱的检测
  • 5 三磷酸腺苷(ATP)的检测
  • 6 药物的检测
  • 四、本论文主要研究工作
  • 参考文献
  • 第二章 生物样品中痕量氨基酸类神经递质的毛细管电泳-化学发光测定研究
  • 1 引言
  • 2 实验部分
  • 2.1 主要仪器和试剂
  • 2.2 实验方法
  • 3 结果与讨论
  • 3.1 实验条件优化
  • 3.2 工作曲线和检出限
  • 3.3 方法的精密度
  • 3.4 样品测定
  • 4 结束语
  • 参考文献
  • 第三章 人血清中游离氨基酸的毛细管电泳化学发光测定研究
  • 1 引言
  • 2 实验部分
  • 2.1 主要仪器和试剂
  • 2.2 实验方法
  • 3 结果与讨论
  • 3.1 发光反应条件的优化
  • 3.2 分离条件的优化
  • 3.3 线性范围和检测限
  • 3.4 方法精密度
  • 3.5 样品测定
  • 参考文献
  • 第四章 毛细管电泳化学发光检测定法测定叶酸的研究
  • 1 引言
  • 2 实验部分
  • 2.1 主要仪器和试剂
  • 2.2 实验方法
  • 3 结果与讨论
  • 3.1 Luminol浓度的影响
  • 3.2 电泳电解质pH 值的影响
  • 3.3 氧化溶液pH 值的影响
  • -浓度的影响'>3.4 BrO-浓度的影响
  • 3.5 光照时间的影响
  • 3.6 加热时间的影响
  • 3.7 工作曲线、线性范围和检出限
  • 3.8 精密度
  • 3.9 样品测定
  • 4、结束语
  • 参考文献
  • 第五章 生物样品中胍基丁胺的毛细管电泳-化学发光测定研究
  • 1 引言
  • 2 实验部分
  • 2.1 主要仪器和试剂
  • 2.2 实验方法
  • 3 结果与讨论
  • 3.1 分离条件的优化
  • 3.2 发光条件的优化
  • 3.3 测定条件的确定
  • 3.4 方法精密度
  • 3.5 工作曲线和检出限
  • 3.6 样品的测定
  • 4 结束语
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间所发表(或待发表)的论文
  • 致谢
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