论文摘要
目的探讨自制柞蚕丝素蛋白多肽/羟基磷灰石复合支架对BMSCs粘附的影响以及复合材料对兔桡骨缺损的修复作用,为临床治疗骨缺损寻找更为理想的植骨材料打下实验基础。方法应用精炼法提取柞蚕丝素纤维,制作丝素蛋白多肽溶液反复浸泡HA支架,冷冻干燥后即成为TSF/HA支架,并检测其表面结构特性。取健康1日龄日本大耳白兔乳兔,提取分离培养BMSCs,将BMSCs与TSF/HA支架共同培养,制作复合支架。根据IS010993标准分别做降解实验、吸水测试及细胞粘附实验;并在3d、7d用扫描电镜检测细胞在支架材料表面吸附情况。取2月龄日本大耳白兔54只,随机分3组。分别制造桡骨缺损,其中18只植入TSF/HA复合支架即实验组(A组),18只植入HA支架即实验对照组(B组),另外18只不放支架即空白对照组(C组)。术后4、8和12周行X线拍片检测,作Lane-Sandhu放射学评估,观察骨修复情况。分别于4、8、12周处死实验动物,取骨折缺损处做切片行HE、Masson染色等,作Lane-Sandhu组织学评分对比细胞存活情况、生物特性及骨缺损修复情况。结果SEM镜下观察TSF/HA支架孔隙内壁上细胞粘附高于单纯HA支架,吸水率实验检测TSF/HA支架组高于单纯HA支架组,体外降解实验TSF/HA支架降解速率大于单纯HA支架,各项检测差异均有统计学意义(P<0.05);骨缺损修复术后4、8、12周X线检测及放射学评分显示,A组评分最高,B组次之,C组最低,各组间差异有统计学意义(P<0.05);HE、Masson组织化学染色表明,A组新骨生成最多,骨修复最快,C组最少,差异有统计学意义(P<0.05);12周后取桡骨观察证实:A组支架几乎全被吸收,骨折处密度增高,骨质发白,B组可见部分支架未被吸收,但骨缺损愈合良好;C组骨缺损处被结缔组织填充覆盖,骨缺损未愈合。结论1、TSF/HA复合后,增加了BMSCs吸附数量。2、TSF/HA复合后,加速了支架的降解。3、TSF/HA复合BMSCs后,能促进骨缺损愈合。