本文主要研究内容
作者高俊莹,张东超,李璇,王华琳,姜宁（2019）在《弓形虫表面抗原SAG1黏附宿主细胞表面硫化肝素的特性研究》一文中研究指出：本研究旨在探究弓形虫表面抗原SAG1黏附宿主细胞表面硫化肝素的特性及其在虫体入侵宿主细胞过程中的作用。通过提取弓形虫ME49株DNA,利用PCR方法扩增SAG1基因片段并将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,获得重组质粒pGEX-SAG1。将获得的重组质粒pGEX-SAG1转入大肠杆菌BL21 CodonPlus-RIPL后利用IPTG诱导表达重组蛋白质GST-SAG1。将纯化后的重组蛋白质进行SAG1与肝素的特异性结合分析,并利用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot方法检测SAG1黏附宿主细胞的活性。通过体内和体外肝素抑制虫体入侵试验进一步分析外源肝素对SAG1黏附宿主细胞表面硫化肝素的阻断作用。结果显示:成功构建重组表达载体pGEX-SAG1,并表达和纯化了重组蛋白质GST-SAG1。肝素结合与竞争抑制试验发现SAG1能够与肝素结合,且肝素能够以浓度依赖的方式抑制这种结合。IFA和Western blot分析结果表明,SAG1能黏附至Vero细胞和HEK293A细胞表面。肝素阻断虫体入侵试验表明,外源肝素可竞争抑制SAG1与宿主细胞表面硫化肝素结合,进而阻断弓形虫的入侵。结果表明弓形虫表面抗原SAG1参与黏附宿主细胞表面的硫化肝素并促进弓形虫的入侵。此研究进一步揭示了弓形虫表面抗原SAG1作为弓形虫入侵的重要因子在虫体入侵过程中与宿主细胞表面硫化肝素的互作关系,同时也为进一步阐明肝素在弓形虫入侵过程中的分子机制奠定基础。
Abstract
ben yan jiu zhi zai tan jiu gong xing chong biao mian kang yuan SAG1nian fu su zhu xi bao biao mian liu hua gan su de te xing ji ji zai chong ti ru qin su zhu xi bao guo cheng zhong de zuo yong 。tong guo di qu gong xing chong ME49zhu DNA,li yong PCRfang fa kuo zeng SAG1ji yin pian duan bing jiang ji ke long zhi yuan he biao da zai ti pGEX-4T-1,huo de chong zu zhi li pGEX-SAG1。jiang huo de de chong zu zhi li pGEX-SAG1zhuai ru da chang gan jun BL21 CodonPlus-RIPLhou li yong IPTGyou dao biao da chong zu dan bai zhi GST-SAG1。jiang chun hua hou de chong zu dan bai zhi jin hang SAG1yu gan su de te yi xing jie ge fen xi ,bing li yong jian jie mian yi ying guang shi yan (IFA)he Western blotfang fa jian ce SAG1nian fu su zhu xi bao de huo xing 。tong guo ti nei he ti wai gan su yi zhi chong ti ru qin shi yan jin yi bu fen xi wai yuan gan su dui SAG1nian fu su zhu xi bao biao mian liu hua gan su de zu duan zuo yong 。jie guo xian shi :cheng gong gou jian chong zu biao da zai ti pGEX-SAG1,bing biao da he chun hua le chong zu dan bai zhi GST-SAG1。gan su jie ge yu jing zheng yi zhi shi yan fa xian SAG1neng gou yu gan su jie ge ,ju gan su neng gou yi nong du yi lai de fang shi yi zhi zhe chong jie ge 。IFAhe Western blotfen xi jie guo biao ming ,SAG1neng nian fu zhi Veroxi bao he HEK293Axi bao biao mian 。gan su zu duan chong ti ru qin shi yan biao ming ,wai yuan gan su ke jing zheng yi zhi SAG1yu su zhu xi bao biao mian liu hua gan su jie ge ,jin er zu duan gong xing chong de ru qin 。jie guo biao ming gong xing chong biao mian kang yuan SAG1can yu nian fu su zhu xi bao biao mian de liu hua gan su bing cu jin gong xing chong de ru qin 。ci yan jiu jin yi bu jie shi le gong xing chong biao mian kang yuan SAG1zuo wei gong xing chong ru qin de chong yao yin zi zai chong ti ru qin guo cheng zhong yu su zhu xi bao biao mian liu hua gan su de hu zuo guan ji ,tong shi ye wei jin yi bu chan ming gan su zai gong xing chong ru qin guo cheng zhong de fen zi ji zhi dian ding ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自畜牧兽医学报的高俊莹,张东超,李璇,王华琳,姜宁，发表于刊物畜牧兽医学报2019年09期论文，是一篇关于弓形虫论文,原核表达论文,硫化肝素论文,肝素结合论文,细胞黏附论文,畜牧兽医学报2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自畜牧兽医学报2019年09期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。