莴苣根际拮抗菌的筛选与鉴定

论文摘要

莴苣是一种草本植物,具有丰富的营养价值和食疗功效,被誉为蔬菜中的绿色精灵。莴苣以嫩叶和嫩茎为可食部分,但目前过量地施用化肥和传统的化学农药防治病虫害的方法带来的化肥残留、农药残留不但对人体健康造成了严重危害,还对环境构成了极大的威胁。研制环保型农药,开发应用生物农药,采用生物防治的办法,是解决这一问题的有效途径,也应该更有利于大力发展生态农业、绿色农业、有机农业。本实验从济宁接庄实验田采样后,对健康莴苣根际土壤的微生物进行了分离,以枯萎病病原菌为指示菌筛选到2株拮抗菌,通过对其进行形态特征观察、常规生理生化的鉴定、16S rDNA序列分析,确定两株菌皆为枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis),并将该序列在Gene bank中注册,获得序列号为EU521704和EU521705。通过对菌株WSZ1抑菌谱的测定发现该菌能抑制多种病原真菌。为应用于实际生产,对菌株WSZ1的发酵条件进行初步研究发现:培养时间48h、温度30℃、起始pH7.0、接种量4%、装液量30mL/250mL三角瓶时菌体的生长量达到最大。本文为莴苣病害的生物防治提供了有效的拮抗菌株,旨在为拮抗物质的提取奠定基础,从而促进莴苣的无害化生产。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 莴苣概述
• 1.1.1 莴苣
• 1.1.2 莴苣的营养成分
• 1.1.3 莴苣的药用价值
• 1.1.4 莴苣枯萎病
• 1.2 拮抗菌在植物病害生物防治中的研究现状
• 1.2.1 目前研究的主要拮抗菌
• 1.2.2 拮抗菌的作用机制
• 1.3 目前拮抗菌在生物防治中存在的问题及其解决对策
• 1.3.1 拮抗菌在植物病害防治中存在的问题
• 1.3.2 解决对策
• 1.3.3 研究展望
• 1.4 本研究的目的与意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 土样
• 2.1.2 菌株
• 2.1.3 培养基的制备
• 2.1.4 主要仪器设备
• 2.1.5 主要试剂及药品
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 莴苣根际微生物的分离
• 2.2.2 拮抗菌的筛选
• 2.2.3 拮抗菌拮抗稳定性的测定
• 2.2.4 拮抗菌的鉴定
• 2.2.5 拮抗菌WSZ1 抑菌谱的测定
• 2.2.6 拮抗菌WSZ1 发酵条件的初步研究
• 第3章 结果与讨论
• 3.1 莴苣根际微生物的分离
• 3.2 拮抗菌的筛选
• 3.3 拮抗菌拮抗稳定性的测定
• 3.4 拮抗细菌的鉴定
• 3.4.1 形态及培养特征观察
• 3.4.2 菌株WSZ1、WSZ2 的生理生化特征
• 3.4.3 16S rDNA 序列分析
• 3.5 拮抗菌WSZ1 抑菌谱的测定
• 3.6 拮抗菌WSZ1 发酵条件的初步研究
• 3.6.1 菌体WSZ1 生长曲线的测定
• 3.6.2 拮抗菌WSZ1 发酵条件的初步研究
• 结论
• 参考文献
• 致谢